【正文】 比較個樣品的顏色變化 ，并在 480 nm 處測其吸光度。比較個樣品的顏色變化 ，并在 480 nm 處測其吸光度。 21北京工商大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計） 21 總結(jié)：經(jīng)實(shí)驗結(jié)果表明 ， D72 樹脂吸附脫蛋白法為最佳的脫蛋白方法。 20北京工商大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計） 20 項目 原液 D72 樹脂 D113 樹脂 吸光度值 \595nm 蛋白質(zhì)濃度（ ug\ml） 蛋白質(zhì)損失率（ %） 吸光度值 \490nm （稀釋 10 倍） 多糖 質(zhì)量 （ mg） 多糖損失 率（ %） 小結(jié) 關(guān)于三種脫蛋白方法的比較： 三氯乙酸法 :脫蛋白效果不明顯，需進(jìn)行多次重復(fù)處理，對試劑消耗較大；雖然每次處理對多糖損失不是很大，但由于重復(fù)次數(shù)較多，累積后對多糖的損失量也較大；由于重復(fù)次數(shù)一般在 10 次以上，故總體處理時間較長。 雪蓮多糖脫蛋白方法方法的比較 取等量雪蓮提取液，在相同條件下用三氯乙酸法、 Seveage 法、樹脂法進(jìn)行脫蛋白，測溶液的蛋白損失率和多糖損失率，確定最適脫蛋白方法。 g/ml）吸光度值/595nm 樣品蛋白質(zhì)濃度的測定 吸取樣品液 ml，按上述操作，測光密度，以標(biāo)準(zhǔn)曲線計算蛋白質(zhì)含量。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 溶液的配制 （ 1）考馬斯亮藍(lán) G250 溶液：稱取考馬斯亮藍(lán) G250 100mg 溶于 50 ml 95%乙醇，加入100 ml 85% H3PO4，蒸餾水稀釋至 1000 ml，抽濾，避光保存。濃硫酸 ml，靜置 10 min； （ 4）搖勻，室溫放置 20 min 后于 490 nm 測光密度； （ 5）以 ml 水按上述操作做空白對照； （ 6）橫坐標(biāo)為多糖微克數(shù)，縱坐標(biāo)為光密度，得標(biāo)準(zhǔn)曲線。 12北京工商大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計） 12 圖 超聲波強(qiáng)化提取實(shí)驗裝置圖 1. Temperature controller 2. Temperature probe 3. Ultrasonic generator 4. Ultrasonic converter 5. Extract 6. Water bath 多糖含量的測定 測定方法主要采用苯酚 硫酸法。 提取方法 恒溫水浴加熱法 稱取粉碎好的 組培 23 年雪蓮 樣品 2 g，加入 200 ml 蒸餾水。 立題目的及意義 目前國內(nèi)外對雪蓮開發(fā)、利用主要在以雪蓮黃酮為主要成分，已研制開發(fā)一系列重要中成藥和保健品。超聲波進(jìn)入提取溶劑與原料的混合體系后，會賦予溶劑分子和物料顆粒加速度，使其運(yùn)動加速，但是由于分子結(jié)構(gòu)不同，溶劑分子的運(yùn)動速度遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于物料的運(yùn)動速度，從而使二者產(chǎn)生摩擦作用，繼而充分混合，使溶劑更加容易進(jìn)入物料顆粒內(nèi)部，使中藥材中的有效成分快速溶解于溶劑之中 [30]。小泡在湮滅過程中 ,能夠產(chǎn)生幾千攝氏度的高溫和幾千個大氣壓的高壓沖擊波，這就是空化現(xiàn)象。 超聲提取技術(shù)是近年來應(yīng)用在中草藥有效成分提取分離方面的一種最新的較為成熟的手段。雪蓮高級護(hù)膚霜已在法國化妝品博覽會上獲獎 ,產(chǎn)品遠(yuǎn)銷歐美各國，深受用戶歡迎[28]。 雪蓮蟲草酒具有通絡(luò)生血活血、強(qiáng)筋壯骨、健肺補(bǔ)腎，能提高人體免疫能力 [25]。從動物腸粘膜中提取的肝素是硫酸化的葡萄糖胺聚糖物質(zhì)，在臨床上用于預(yù)防輸血凝血及其它血栓性疾病。 槲蕨 多糖顯示了一定程度的抗細(xì)菌和抗真菌活性 [26]。實(shí)驗表明，它可延長家蠶五齡期壽8北京工商大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計） 8 命 14%[6]。人們對將多糖應(yīng)用于因病毒感染所致艾滋病等疑難疾病的治療寄予很大的希望。 1987 年，德國的 Bayer公司研制的木聚糖硫酸酯對 艾滋病有較好的療效。冠心病之間的關(guān)系 [20]。茶多糖具有明顯的降血糖的作用，其中有降血糖作用的多糖為半乳葡聚糖 [9][19]。 降血糖活性 有研究表明 [17]植物多糖能夠促進(jìn)胰島分泌胰島素，影響糖 代謝酶的活性，促使外周組織對葡萄糖的作用，抑制糖異生。己發(fā)現(xiàn)有 100 多種中藥所含多糖類化合物具有免疫促進(jìn)作用 。有的還能誘導(dǎo)干擾素的產(chǎn)生。免疫系統(tǒng)紊亂，不僅會產(chǎn)生多種疾病，而且與人體衰老及老年人多發(fā)病有關(guān)。 [37]多糖中的官能團(tuán)的種類或有無對其生物活性有極大的影響，而這些官能團(tuán)往往可以通過一定的化學(xué)方式進(jìn)行添加或消除，所以多糖中官能團(tuán)的改造己成為研究多糖構(gòu)效關(guān)系的有力手段。另外，多糖的分子量溶解度、旋光度、粘度等性狀也影響其生理功能?；钚远嗵堑幕瘜W(xué)結(jié)構(gòu)是其生物活性的基礎(chǔ)。愈潰瘍等疑難病癥的治療方面己顯示了誘人的5北京工商大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計） 5 前景 [11]。由于多數(shù)以糖類為基礎(chǔ)的藥物的作用位點(diǎn)是在細(xì)胞表面，而不進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，因此這類藥物對于整個細(xì)胞、進(jìn)而整個機(jī)體的干擾要比進(jìn)入細(xì)胞 核、質(zhì)內(nèi)小得多。在這一系列的生物過程中，最重 要的生物活性因子便是糖鏈。到目前為止，己有近 300 種的多糖類化合物從天然產(chǎn)物中被分離提取出來。然而，因為在糖合成中沒有如核酸那樣的藍(lán)圖，因而糖僅是包含由環(huán)境不同而產(chǎn)生的多種組分，保持相似的結(jié)構(gòu)，很難得到相同結(jié)構(gòu)的糖，而且也沒有發(fā)展倍增技術(shù)。而且，糖甚至能在其線形聚合物上伸出側(cè)鏈，這讓推斷純凈的天然糖結(jié)構(gòu)非常困難。很少有人肯在方法上花很多工夫 [3]。之所以如此，有兩個重要原因 :第一是理論上的簡單化。 2北京工商大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計） 2 3北京工商大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計） 3 新疆雪蓮化學(xué)成分 從新疆雪蓮中提取分離的化合物 化學(xué)類型 化合物名稱 黃酮 高車前素、金合歡素、檞皮素 [1]、 芹菜素 5,6二甲氧基黃酮、芹菜素6 甲氧基黃酮 [2] 黃酮苷 蘆丁、 檞皮素 3oαL鼠李糖苷 [3] 糖類 多糖（ 813）、天山雪蓮花多糖（ SIP）、精制雪蓮多糖（ SPSI） [4] 生物堿 大苞雪蓮堿（ 13脯胺酸取代的二氫去氫廣木香內(nèi)酯） [5]、 秋水仙堿 [2] 倍半萜內(nèi)酯及內(nèi)酯苷 大苞雪蓮內(nèi)酯（ 4,10環(huán)外亞甲基 8羥基 11甲基愈創(chuàng)內(nèi)酯） [6]、去氫廣木香內(nèi)酯 [7]、 3αOH,11β,13二氫去氫廣木香內(nèi)酯 8βD葡萄糖苷[8]、 11α,13二氫去氫廣木香內(nèi)酯、雪蓮內(nèi)酯、大苞雪蓮內(nèi)酯 8βD葡萄糖 [4]。那里氣候奇寒、終年積雪不化，這種獨(dú)有的生存習(xí)性和獨(dú)特的生長環(huán)境使 其天然而稀有，并造就了它獨(dú)特的藥理作用和神奇的藥用價值，人們奉雪蓮為 “百草之王 ”、 “藥中極品 ”。 雪蓮花是我國藏族、蒙古族、維吾爾族、納西族和普米族常用的珍稀民族藥，在《本草綱目拾遺》和藏本草《晶珠本草》中都有記載，起來源于鳳毛菊屬的水母兔子、綿頭雪兔子及天山雪蓮花等同屬 多中植物的干燥地上部分或全草，具有抗風(fēng)濕、通絡(luò)活血的功效，用于頭部創(chuàng)傷、熱性刺痛、婦科病、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和腦中風(fēng)。 Rutin。 利用紅外光譜 和高效液相色譜 的特性 對雪蓮多糖的單糖組成進(jìn)行分析。 利用 考馬斯亮藍(lán) G250 法測蛋白的含量。雪蓮還有抗菌、抗輻射、抗寒、耐高山缺氧、強(qiáng)心、解痙鎮(zhèn)靜、平喘等功效 ，具有巨大的可開發(fā)利用價值。 我承諾，論文中的所有內(nèi)容均真實(shí)、可信。 作 者 簽 名： 日 期： 指導(dǎo)教師簽名： 日 期： 使用授權(quán)說明 本人完全了解 大學(xué)關(guān)于收集、保存、使用畢業(yè)設(shè)計（論文）的規(guī)定，即：按照學(xué)校要求提交畢業(yè)設(shè)計（論文）的印刷本和電子版本；學(xué)校有權(quán)保存畢業(yè)設(shè)計（論文）的印刷本和電子版，并提供目錄檢索與閱覽服務(wù)；學(xué)校可以采用影印、縮印、數(shù)字化或其它復(fù)制手段保存論文；在不以贏利為目的前提下，學(xué)?？梢怨颊撐牡牟糠只蛉績?nèi)容 。 畢業(yè)論文（設(shè)計） 題目 雪蓮 多糖的 提取 及分離純化 工藝研究 2北京工商大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計） 畢業(yè)設(shè)計（論文）原創(chuàng)性聲明和使用授權(quán)說明 原創(chuàng)性聲明 本人鄭重承諾：所呈交的畢業(yè)設(shè)計（論文），是我個人在指導(dǎo)教師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的成果。 作者簽名： 日 期： 3北京工商大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計） 誠信聲明 本人鄭重聲明：所呈交的畢業(yè)設(shè)計（論文）是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下 ， 由我本人獨(dú)立完成。如在文中涉及到抄襲或剽竊行為，本人愿承擔(dān)由此而造成的一切后果及責(zé)任。 本文完善了雪蓮多糖的測定方法，優(yōu)化了雪蓮多糖的提取 ，對雪蓮多糖進(jìn)行了進(jìn)一步的分離純化及紅外光譜和高效液相測譜特性進(jìn)行了初步研究。在相同條件下用三氯乙酸法、 Seveage法、樹脂法進(jìn)行脫蛋白，比較各方法的蛋白損失率和多糖損失率，確定最適脫蛋白方法。 關(guān)鍵詞：雪蓮； 多糖 ； 超聲提??； 純化 5北京工商大學(xué)畢業(yè)論文（設(shè)計） Abstract Saussurea involucrata is a wellknown Chinese traditional medicine for the treatment of inflammation, arthritis, menstrual problems and regulating menstrual cycles. Modern pharmacological studies have demonstrated that it possesses some activities such as free radical scavenging, antifatigue, antiinflammation, anticancer, and immunomodulation. The extracts of S. involucrata are mainly posed of flavonoids, which are the active ponents, including apigenin, kaempferide, acacetin, luteolin, quercetin, and rutin etc. According to Chinese Pharmacopoeia, rutin and chlorogenic acid are two ponents in for quality identification of S. involucrata. This paper carried on the related research on the content analysis and ultrasoundassisted extraction of bioactive pounds (rutin, chlorogenic acid and syringin) in S. involucrata, and the chemicl pounds contents of different parts of S. involucrata were also investigated. A RPHPLC method was used for the simultaneous detection of rutin, chlorogenic acid and syringin in S. involucrata, the HPLC flow rate, detection wavelength and column temperature chromatographic conditions were optimized for content detection. Ultrasoundassisted extraction method was studied by single factor experiments and response surface experimental design to optimize the extraction process, the establishment of a multimodel parameter extraction model was verified by experiment. In addition, the main chemical ponents in different parts of S. involucrata were measured, the results showed flowers, stems and leaves have different levels of each ponent. Key words: Saussurea involucrata。 Ultrasound extraction?，F(xiàn)在藥理和化學(xué)研究表明，雪蓮花類藥材主要含黃酮、出體、倍半帖內(nèi)酚、木脂素和多糖等成分，具有抗癌、抗生育、調(diào)節(jié)心血管系統(tǒng)、清除自由基和免役促進(jìn)等作用。 《綱目拾遺》中就有天山雪蓮的文字記載 :天山雪蓮又名 “鳳毛菊 ”，性大熱，能補(bǔ)陰益陽，祛一切寒癥，雪蓮全草人藥，具有通經(jīng)活血，暖宮散寮、散寒除濕、強(qiáng)精助陽，止血消腫的功效，使用安全無毒、無副作用，雪蓮人