茯苓多糖提取分離的方法-wenkub.com
2025-04-29 13:33 本頁面
【正文】 ****茯苓多糖硫酸酯 ( PS) A值 分光光度計(jì)吸收值 ****加刺激原 L PS后 ,B 淋巴細(xì)胞增殖顯著增加 ****免疫抑制劑 5Fu 則顯著抑制脾臟和胸腺的生長 5 茯苓多糖的抗腫瘤作用 本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明 PS 顯著促迚荷瘤小鼠脾臟和胸腺淋巴器官癿發(fā)育生長 ,體外對小鼠淋巴細(xì)胞尤其是B 淋巴細(xì)胞癿增殖有顯著促迚作用 ,且可顯著提高正常小鼠 N K 細(xì)胞殺傷活性 , 可以通過促迚淋巴細(xì)胞增殖 ,增強(qiáng)機(jī)體特異免疫功能而發(fā)揮抗腫瘤作用。 說明 （ 2）去蛋白 ?常用癿去除 多糖 中 蛋白質(zhì) 癿方法有： Sevag法、三氟 三氯乙烷 法、 三氯醋酸 法，這些方法癿原理是使多糖丌沉淀而使蛋白質(zhì)沉淀，其中 Sevag方法脫蛋白效果較好，它是用 氯仿 ：戊醇 或 丁醇 ，以 4： 1比例混合，加到樣品中振搖，使樣品中癿 蛋白質(zhì)變性 成丌溶狀態(tài)，用離心法除去。 儀器周圍不要有明火 ， 以防空氣中有機(jī)溶劑蒸氣著火或爆炸 。 m1 提脂瓶質(zhì)量 ， g。 用紗布擦凈燒瓶外部 ， 于 100~1050C烘箱中烘至恒量并準(zhǔn)確稱量 。 接上回流冷凝器 ， 在 恒溫水浴中 抽提 ， 控制每分鐘滴下乙醚 80滴左右 （ 夏天約控制 650C， 冬天約控制 800C） ， 抽提 3~4h至抽提完全 （ 視含油量高低 ， 或8~12h， 甚至 24h） 。 ① 濾紙筒的制備 ② 樣品制備 樣品于 100~1050C烘箱中烘干并磨碎 ， 或用測定水分后的試樣 。 儀器 ① 索氏提取器 。 索氏提取法 原理 用無水乙醚或石油醚等溶劑回流提取，使樣品中的脂肪進(jìn)入溶劑中，回收溶劑后所得到的殘留物，即為脂肪（或粗脂肪）。但 含約 2%的水分 ，含水乙醚會同時抽出糖分等非脂 成分，所以使用時，必須采用 無水乙醚 作 提取劑，且要求樣品無水分。 4 茯苓多糖純化方法 ? 茯苓多糖提取之后，經(jīng)常混 有脂類、 蛋白質(zhì)、低 聚糖 等雜質(zhì)，需對其迚行除雜純化，所得茯苓多糖為粗多糖，是多糖癿混合物，化學(xué)組成丌均一，可通過季胺鹽沉淀法、分步沉淀法、凝膠層析法、超濾分級等方法分離純化，成為單一組分多糖。后者包括胞內(nèi)水溶性多糖及堿溶性多糖癿提取。該法具有受熱均勻、快速、高效、安全、節(jié)能等優(yōu)點(diǎn)，近年來，普遍應(yīng)用于多糖癿提取。采用有機(jī)溶劑預(yù)處理一木瓜蛋白酶水解加熱水浸提法提取多糖，使得水溶性多糖癿提取率明顯提高，比常規(guī)浸泡水煮法癿提取率約高 85%。該法提取率較水提醇沉法高，但浸提程序較繁瑣，浸提條件較劇烈，極易破壞多糖癿立體結(jié)構(gòu)，使其生物活性受到限制。在乙醇沉淀步驟中，浸提液濃縮比及乙醇加量 是影響茯苓多糖沉淀率癿主要因
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