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2024-11-19 05:25本頁面
【正文】 的能量成定量關(guān)系。 檢測單位用OD值表示， OD是optical delnsity（光密度）的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度， OD＝1og（1／trans），其中trans為檢測物的透光值。 在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長，在此波長下，此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段，就會造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此，在測定檢測物時，我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測，稱為測量波長。,第四十一頁，共四十九頁。,酶標(biāo)儀配件,光源： 氙閃燈（波譜寬、低熱輻射、壽命長，但是可見區(qū)能量低） 鹵素?zé)簦ú荒苡糜谧贤鈪^(qū)，可見區(qū)能量強(qiáng)）,ELx800光源： 鹵鎢燈光源,第四十二頁，共四十九頁。,酶標(biāo)儀配件,濾光片和單色器： 濾光片和單色器各有優(yōu)缺點(diǎn)，選擇濾光片還是單色器和具體的實(shí)驗(yàn)要求有關(guān)。 光吸收ELISA： 單色器優(yōu)于濾光片，由于鹵素?zé)艄鈴?qiáng)大，兩者的靈敏度不相上下，單色器更為靈活、方便使用。 熒光檢測ELISA 各有優(yōu)缺點(diǎn)，單色器靈活，但是靈敏度低、特異性差；濾光片特異性好、靈敏度高，但靈活性不足。一般ELISA都是使用常用的熒光素，對科研工作者來講濾光片較好。,ELx800 標(biāo)配濾光片 405, 450, 490, 630 nm 連續(xù)波長(采用單色器),第四十三頁，共四十九頁。,MD 公司：業(yè)界老大，產(chǎn)品質(zhì)量過硬，做工精細(xì)。但對中國支持服務(wù)較差、管理混亂。 Bio－Tek 公司：與MD公司伯仲之間，產(chǎn)品質(zhì)量過硬，做工精細(xì)。進(jìn)入中國市場十多年，市場占有率高，服務(wù)較好。 PE公司：著名的分析儀器生產(chǎn)商，但酶標(biāo)產(chǎn)品單一、簡單，后續(xù)支持不足。 Tecan 公司: 著名的液體分裝設(shè)備生產(chǎn)商，高端產(chǎn)品較好，底端產(chǎn)品較差。,酶標(biāo)儀生產(chǎn)廠家,第四十四頁，共四十九頁。,Biotek ELx800 酶標(biāo)儀的使用,先從試劑說明書上獲得以下信息： （1）使用什么波長 （2）如何判斷結(jié)果。 設(shè)置酶標(biāo)儀上參數(shù)，即DEFINE定義 在MainMenu下，選DEFINE SELECT ASSAY NUMBER，進(jìn)行DEFINE定義： （1） METHOD（方法）：可定義波長及板類型 （2）MAP（排板）：可定義板的加樣的位置、數(shù)量、標(biāo)準(zhǔn)或?qū)φ瘴铮?（3）FORMULA（公式）：可定義CUTOFF定性臨界公式，中介值，結(jié)果判斷； （4）CURVE（曲線）：可定義定量下所使用的曲線的類型。,第四十五頁，共四十九頁。,上機(jī)操作 開機(jī) → 機(jī)器自檢 → 進(jìn)入主菜單MainMenu → 按READ功能鍵 → 選擇要做項(xiàng)目的編號及名稱→輸入要做的樣本數(shù)量→ 按ENTER 鍵 → 把檢測板放入機(jī)器運(yùn)載臺上 →打印機(jī)打印出結(jié)果（打印機(jī)要打開并放好紙）→取走檢測板，按ENTER鍵→ 選擇要做項(xiàng)目的編號及名稱 →按MainMenu鍵，進(jìn)入主菜單MainMenu → 操作結(jié)束,Biotek ELx800 酶標(biāo)儀的使用,第四十六頁，共四十九頁。,酶標(biāo)儀的使用注意事項(xiàng),工作環(huán)境 為延緩光學(xué)部件的老化，應(yīng)避免陽光直射。 操作時環(huán)境溫度應(yīng)在15℃－40℃之間，環(huán)境濕度在15％－85％之間。 操作電壓應(yīng)保持穩(wěn)定。 操作環(huán)境空氣清潔，避免水汽，煙塵。 保持干燥、干凈、水平的工作臺面，以及足夠的操作空間。 操作注意事項(xiàng) 嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作，反應(yīng)時間準(zhǔn)確。 請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部。 不要在測量過程中關(guān)閉電源。 使用后蓋好防塵罩。,第四十七頁，共四十九頁。,ELISA的操作要點(diǎn),嚴(yán)謹(jǐn)?shù)脑O(shè)計，優(yōu)質(zhì)的試劑，正確的操作和良好的儀器是保證ELISA必要條件。 嚴(yán)格遵照規(guī)定操作，必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。,第四十八頁，共四十九頁。,內(nèi)容總結(jié),ELISA、酶標(biāo)儀、洗板機(jī)。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原（抗體）含量成正比。解離后的抗原或抗體均能保持原有的結(jié)構(gòu)和活性。封閉就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙，從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。陽性對照品的基本組成應(yīng)盡量與檢測標(biāo)本的組成相一致，多以含蛋白保護(hù)劑的緩沖液為基質(zhì)。加入的量應(yīng)與試劑的敏感度相稱。顯色是酶催化無色的底物生成有色產(chǎn)物的溫育反應(yīng)。反應(yīng)的溫度和時間仍是影響顯色的因素,第四十九頁，共四十九頁
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