20xx年醫(yī)學專題—測定細菌生長曲線-資料下載頁
2024-11-19 05:11本頁面
【正文】 在處理別人的實驗結果中也加入自己的分析?？偟膩碚f，這是個很有意思也很有意義的實驗。七、 思考1. 計算出大腸桿菌和枯草芽孢桿菌在牛肉膏蛋白胨葡萄糖培養(yǎng)基中對數(shù)生長期中的代時(min)（繁殖一代的時間），為什么比理論時間長好多？代時見表二。經(jīng)查資料得：大腸桿菌理論代時為37度時18分鐘，而枯草桿菌一般是給30度下的理論代時為31分鐘，實驗測得代時長于理論值的原因： 理論代時是在理想的培養(yǎng)條件下測得，糖分、氧氣等營養(yǎng)物質供應充足，細菌生長狀況良好，之前的分裂次數(shù)較少。實際實驗條件與理論值條件存在差距。如培養(yǎng)過程中不補料，營養(yǎng)物質有限。單純的振蕩不能保證體系中有足夠的溶氧。對培養(yǎng)液的pH值，氧化還原電勢也未加控制，測量過程中溫度不能保持穩(wěn)定等等。2. 為什么可用比濁法來表示細菌的相對生長狀況？培養(yǎng)液的渾濁度與細菌的濃度與成正比，可以利用分光光度計測定細菌濁液的光密度來推知菌液的濃度。濁度的變化代表體系細菌數(shù)量的變化。其原理是：一個細胞懸浮液用肉眼觀察是呈現(xiàn)混濁的，這是因為光線通過懸浮液是，細胞散射光線。存在的細胞數(shù)越多，分散的光線就越多，因此懸浮液濁度就越大。通過分光光度計可以檢出沒有被細胞散射的光線。對于大腸桿菌和枯草桿菌，從理論上OD值與細胞總量成正比?？梢灾苽鋵⒓毎麛?shù)目與濁度聯(lián)系起來的標準曲線。3. 生長曲線中為什么會有穩(wěn)定期和衰退期？當細胞的繁殖速度達到高峰時，其細胞總數(shù)就不會再增加，這是由于調整期、對數(shù)生長期兩階段糖類營養(yǎng)物質的消耗，代謝產(chǎn)物乙醇的積累及培養(yǎng)基的pH值、氧化還原電勢的改變，對細胞產(chǎn)生了較大的抑制性。當死亡細胞數(shù)和繁殖細胞數(shù)接近穩(wěn)定時，就出現(xiàn)穩(wěn)定期，細胞總數(shù)處于穩(wěn)定狀態(tài)。進入穩(wěn)定期后，如果繼續(xù)培養(yǎng)，由于營養(yǎng)物質（如糖類和氧氣）的進一步消耗，代謝物的進一步積累，溶液進一步酸化，導致細胞死亡的速率提高。當細胞死亡數(shù)超過繁殖數(shù)時，活細胞總數(shù)不再穩(wěn)定，生長曲線進入衰退期。4. 什么條件下接種為宜？液體種子比固體種子有什么優(yōu)越性？接種時以分裂次數(shù)少、生長狀況良好的種子為宜。液體種子較之固體種子，遲滯期略短，對數(shù)生長期較長，代時略短，較晚進入死亡期。因為從固體中接種到培養(yǎng)液后，細菌需要合成新的RNA、核糖體、酶等才能適應新的生長條件，需要更長的時間適應。5. 根據(jù)實驗結果，談談在工業(yè)上如何縮短發(fā)酵時間？（1）保證充分的營養(yǎng)供應，根據(jù)細菌的特性如果是需氧的要保證充足的氧氣供應，維持最適宜的溫度和pH值，盡快排出代謝廢物，隨時觀察隨時監(jiān)控，這樣可以保證細菌的高速生長。（2）在保證營養(yǎng)的前提下，可以擴大接種量，這樣可以縮短調整期。（3）選取合適的培養(yǎng)基、盡量是與種子生長性質相同或者相近的培養(yǎng)基，選取合適菌齡的種子。八、 參考文獻陳金春、陳國強編著，微生物學實驗，北京，2005。內容總結
（1）實驗七 測定細菌生長曲線
實驗目的
了解細菌生長曲線特征，測定細菌繁殖的代時
（2）注意，由于光密度表示的是培養(yǎng)液中的總菌數(shù)，包括活菌與死菌，因此所測定的生長曲線的衰亡期不明顯
（3）進入穩(wěn)定期后，如果繼續(xù)培養(yǎng)，由于營養(yǎng)物質（如糖類和氧氣）的進一步消耗，代謝物的進一步積累，溶液進一步酸化，導致細胞死亡的速率提高
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