20xx年醫(yī)學專題—常用蛋白標簽-資料下載頁
2024-11-17 22:22本頁面
【正文】 腸桿菌，酵母和哺乳動物等細胞抽提液或已經(jīng)純化的蛋白液中的SNAPtag融合蛋白。將純化的或未純化的SNAPTag融合蛋白與表面固定了苯甲基鳥嘌呤的基質(zhì)混合，蛋白即可特異與底物作用，形成共價鍵，融合蛋白間接被固定在了基質(zhì)表面上，可以達到更方便快捷地研究蛋白功能或純化蛋白的目的。Halo TagHaloTag?標簽蛋白是一種脫鹵素酶的遺傳修飾衍生物，可與多種合成的HaloTag?配基有效地共價結(jié)合。這個分子量為33KDa的單體蛋白能融合在重組蛋白的N端或C 端，并在原核和真核系統(tǒng)中表達。HaloTag?配基是小分子化學物，能夠在體外或體內(nèi)與HaloTag?蛋白共價結(jié)合。這些配基由兩個關(guān)鍵組分組成：(1)一個通用的HaloTag?反應(yīng)聯(lián)結(jié)子，結(jié)合HaloTag?蛋白；(2)一個功能基團,例如熒光染料或親和媒介。能夠共價和特異性結(jié)合多種合成的報告基團和親和配基的特性，使得HaloTag?蛋白能夠用于檢測和親和結(jié)合或固相化固定目的蛋白。SUMOSUMO標簽蛋白是一種小分子泛素樣修飾蛋白（Small ubiquitinlikemodifier），是泛素(ubiquitin)類多肽鏈超家族的重要成員之一。在一級結(jié)構(gòu)上，SUMO與泛素只有18%的同源性，然而兩者的三級結(jié)構(gòu)及其生物學功能卻十分相似。研究發(fā)現(xiàn)SUMO可以作為重組蛋白表達的融合標簽和分子伴侶，不但可以進一步提高融合蛋白的表達量，且具有抗蛋白酶水解以及促進靶蛋白正確折疊，提高重組蛋白可溶性等功能。此外SUMO還有一項重要的應(yīng)用，就是可用于完整地切除標簽蛋白，得到天然蛋白。因為SUMO蛋白水解酶（我公司可提供）能識別完整的SUMO標簽蛋白序列，并能高效地把SUMO從融合蛋白上切割下來。切除SUMO后，經(jīng)過親和層析，去除標簽蛋白部分，就得到和天然蛋白一樣的重組蛋白。所以SUMO標簽也常用于和其他標簽一起應(yīng)用，作為特異酶切水解位點內(nèi)容總結(jié)（1）重組蛋白表達技術(shù)現(xiàn)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物學各個具體領(lǐng)域（2）MBP:
MBP（麥芽糖結(jié)合蛋白）標簽蛋白大小為40kDa，由大腸桿菌K12的malE基因編碼（3）檢測：可用GST抗體或表達的目的蛋白特異性抗體檢測（4）易于用Anti－HA抗體檢測和ELISA檢測（5），從而使其檢測更顯得快速、簡便、靈敏度高而且重現(xiàn)性
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