【正文】 聚乙炔的分?jǐn)?shù)表現(xiàn)出了典型的紫外光吸收譜。169。2004全文電子刊愛爾蘭有限公司 版權(quán)所有。關(guān)鍵字：抗氧化活性；細(xì)胞毒性；桔梗grandi?orum；清除；美騰引文：添加抗氧化劑對(duì)各種食物，防止或 阻止自由基誘導(dǎo)的脂質(zhì)氧化，負(fù)責(zé)?avors和不良的發(fā)展食品中的化學(xué)化合物(Angelo，1996)。在表單中的生物系統(tǒng)還可以生成自由基活性氧(氧)，如超氧陰離子 自由基(O2??)，過氧化氫(H2 O2)，羥基自由基(OH?)，單線態(tài)氧(1 O2)(哈利韋爾等。, 1995)。這些反應(yīng)活性氧導(dǎo)致不可逆轉(zhuǎn)的破壞 組件損壞的細(xì)胞，如脂類、蛋白質(zhì)與DNA(Lopaczyski和Zeisel，2001)。雖然正常 細(xì)胞擁有對(duì)活性氧的抗氧化防御系統(tǒng)，細(xì)胞損傷的不斷積累導(dǎo)致疾病，如癌癥和老化(Mat233。s和S225。nchez Jim233。nez，2000)。通過消除活性氧在連續(xù)的抗氧化劑量也有預(yù)防這些疾病的作用生物系統(tǒng)(斯甘巴托等。，2001)?？鼓[瘤藥物，另一方面，主要是相關(guān)的 損壞的系統(tǒng)的治療作用。正常情況下，DNA或其他組件的單元格 由各種原因不可逆轉(zhuǎn)的損壞進(jìn)行凋亡細(xì)胞死亡，這是一個(gè)自我毀滅的代謝根據(jù)基因編碼細(xì)胞死亡信號(hào)(Korsmeyer，1995；胡珀等。，1999)。不過，癌細(xì)胞 已經(jīng)不可逆轉(zhuǎn)地開發(fā)，獲取能力，以逃避通過多種方式的凋亡。抗腫瘤藥物的目的 觸發(fā)器在這些癌細(xì)胞凋亡信號(hào)系統(tǒng)雖然擾亂它們的擴(kuò)散(加粗等。，1997)。有很多開發(fā)與各種生物活性的植物，包括抗氧化劑，antiin?ammatory和抗癌活動(dòng)。例如，一些研究報(bào)告，天然產(chǎn)物提取物，如水果、蔬菜和中藥，對(duì)癌癥產(chǎn)生積極影響，而化療或最近荷爾蒙治療(Pezzuto，1997；吳等。，2002)。因此，許多植物 已檢查以確定新的和有效的抗氧化和抗癌化合物，以及澄清嗎 預(yù)防癌癥和凋亡的機(jī)制(Pietta等。, 1998；金等。1998；Swamy和Tan，2000)在particu，東方藥用植物被認(rèn)為是其中之一 由于他們的各種物種的最有希望的來源應(yīng)用程序。此外，其療效已 亞洲許多幾十年的臨床使用證明。桔梗根grandi?orum。Candolle(韓國名，Doraji，日本名字，桔梗，和中文名字，39。Jiegeng39。)，屬于桔?？萍胰嗽鳛槭称吩匣驏|方傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)。桔梗提取物grandi?orum已報(bào)告有廣泛的健康bene?ts。特別是，在韓國，4年的根 一直被用來治療支氣管炎、哮喘、肺結(jié)核、糖尿病和in?ammatory疾病(青木和嗎李1972；李，1973)。最近，其immunopharmacological的影響研究(Nagao等。1986)，和一?對(duì)應(yīng) 作者。電話。：+86 822點(diǎn)3290 3435；傳真：+86 822點(diǎn)927 5201。電子郵件地址：limst@korea。交流。氪(S。t。林)杰。你們。李等。民族藥物學(xué)93/日志(2004)409–415些 活性化合物，如三萜(Nikaido等。，1999)和皂甙(石井等。1984)已identi?ed。一些 研究甚至延長桔梗的培育期 22年的grandi?orum使用獲得專利的方法(李，1991)，報(bào)告說，其水提取物是有效防止膽固醇、血脂異常，CCl4誘導(dǎo)肝毒性(Leeand Jeong, 2002）先前的研究中，據(jù)報(bào)道，原油 桔梗grandi?orum石油醚提取物對(duì)人腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出強(qiáng)烈的抑制活性增長，有機(jī)提取物是更大的活動(dòng) 比水提取物(李等。，1998)。在這 研究中，桔梗grandi?orumroot石油醚提取物是分次使用漸變?nèi)軇?、和與商業(yè)的抗氧化活性的比較 抗氧化劑。此外，抗癌活性 分?jǐn)?shù)也檢查。2。材料與方法 。物質(zhì) 切碎和干桔梗根grandi?orumA。直流(桔?？萍易?Youngju栽培，韓國是從東方草藥市場購買，和韓國分子醫(yī)學(xué)和營養(yǎng)研究所con?rmed身份。人體直腸(HRT18)，肝癌(HepG2)和冒號(hào)(HT29)癌細(xì)胞株是從美國購買類型文化集合(馬里蘭州、美國)。Dulbecos Modi?ed鷹介質(zhì)(DMEM)，胎牛血清及trypsin–EDTA獲得了從Gibco肝(大 島，紐約，美國)，以及文化用品等48嗯板是向Nunclon品牌產(chǎn)品。3(45Dimethylthiazol2)25diphenyltetrazolium溴(美騰)、11二苯2picrylhydrazyl(清除)是從西格瑪阿德采購公司(st。路易斯、鉬、美國)。硅酸(生物南港100–200網(wǎng))是從生物實(shí)驗(yàn)室的產(chǎn)品。(Richmond CA，美國)，薄層色譜分析和制備(薄)是使用硅膠60 F254(默克，達(dá)姆施塔特、德國).。提取和分離 桔梗grandi?orum的干燥根(600克)磨成粉，和石油醚提取(4)在室溫72℃的振動(dòng)。在粉之后 粒子已經(jīng)確定，清除黃色的上清液 ?ltered ?m孔尺寸聚四氟乙烯?lter(Milipore公司, 比爾里卡，美國)，集中(，干重)真空蒸發(fā)。集中被分割(分?jǐn)?shù)I–V)與溶劑的使用硅膠柱 漸變石油醚和乙醚(9:1–5:5)?？寡趸钚缘臏y(cè)定。硫氰酸鐵測(cè)試(FTC)使用硫氰酸鐵的抗氧化活性分析根據(jù)報(bào)告的大澤的方法是執(zhí)行嗎 和Namiki(1981)。 ()已添加。在40?C在黑暗的混合物螺旋蓋瓶。在孵化期間， 從混合。，在500納米的紅色吸收測(cè)量。的 抑制脂質(zhì)過氧化水平的每個(gè)分?jǐn)?shù) 吸光度比值計(jì)算，沒有任何樣品的空白。硫代巴比妥酸測(cè)試(總膽汁酸)這是根據(jù)Kikuzaki和Nakatani報(bào)告的方法執(zhí)行(1993)。兩毫升 20三氯醋酸酸和硫代巴比妥酸溶液添加2毫升到1毫升含亞油酸的混合解決方案，根據(jù)FTC的準(zhǔn)備過程。混合物放在沸騰的水 浴10分鐘。在冷卻之后，混合料離心機(jī)在20分鐘的轉(zhuǎn)速可達(dá)3000。DPPH自由基清除測(cè)試布洛伊斯所描述的這個(gè)測(cè)試來衡量(1958)。其中一個(gè) 毫升的部分解決方案(50、100和200?g/毫升乙醇)添加到清除解決方案的1毫升( 乙醇)。在30分鐘以后，室溫反應(yīng)，吸收的解決方案是為517納米。每個(gè)分?jǐn)?shù)的清除自由基的活性通過比較其吸光度與空白的決定解決方案(示例)。對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性(美騰測(cè)試)從原油餾分I–V分居使用硅膠柱和梯度溶劑醚提取物(9:1–5:5)，– g/g，基于初始重量粗提取物(表1)。總酚含量 在分?jǐn)?shù)介乎，與分?jǐn)?shù)第二，后者是eluted，8:2的混合石油醚 和乙醚，包含酚的最高水平化合物。這是根據(jù)執(zhí)行過程的輕微modi?cation Mosmann報(bào)告(1983)。在 48嗯板，人類癌癥細(xì)胞懸液(3104 細(xì)胞/好)是在37?C為24。單元格 然后漂洗和種植在新DMEM包含每個(gè)分?jǐn)?shù)(?g/300毫升)。在24或48的孵化之后，在37?C，DMEM被刪除，而細(xì)胞再次創(chuàng)業(yè) (?g/)為4小時(shí)。?對(duì)應(yīng) 作者。電話。：+86 822點(diǎn)3290 3435；傳真：+86 822點(diǎn)927 5201。電子郵件地址：沖區(qū)(20 50烷基硫酸鈉N，n甲酰胺、pH值 )被添加到每個(gè)解散美騰產(chǎn)生的紫甲臘，這些細(xì)胞被孵化 在未來2小時(shí)。板讀取使用分光光度計(jì)(型號(hào)DU64)at2。薄層色譜(薄)硅膠柱的分?jǐn)?shù)分析與石油的流動(dòng)相薄層ether:chloroform:methanol(15:7:3伏/視頻/視頻)(A)或石油 醚：乙醚：醋酸(80:20:1 v/視頻/視頻)(B)根據(jù)報(bào)告的過程稍微modi?cationAmarowicz等。(2000)。薄層上的分隔點(diǎn) identi?ed板在紫外燈短(254納米)和長(365納米)波長，并噴灑 H2 SO4。酚類化合物可以可視化的噴涂板1 FeCl3解決方案中的鹽酸1美元(Reio，1958)?？焖贆z測(cè)抗氧化景點(diǎn)的活動(dòng)，車牌是沾了清除 解決方案(擱樓里瓦斯等。，2000)。在識(shí)別之后，多數(shù) 板上的活動(dòng)現(xiàn)場，使用一個(gè)薄層板的制備 刮和收集大量的定量清除抗氧化活性的檢測(cè)。3。結(jié)果和討論?對(duì)應(yīng) 作者。電話。：+86 822點(diǎn)3290 3435；傳真：+86 822點(diǎn)927 5201。電子郵件地址：