植物細(xì)胞工程教學(xué)反思-資料下載頁
2025-10-31 22:25本頁面
【正文】 不用。4）母液濃度不能過高，否則易產(chǎn)生結(jié)晶，影響試驗(yàn)效果。5）在配制大量元素母液時(shí)，混合、溶解各種無機(jī)鹽時(shí)要注意先后順序，盡量把Ca2+，SO42,PO43等離子錯(cuò)開分別溶解，同時(shí)稀釋濃度要大些，并要慢慢地邊混合邊攪拌。培養(yǎng)基配制過程中應(yīng)注意哪些因素？培養(yǎng)基為什么要煮沸后再分裝？答：培養(yǎng)基配制過程中應(yīng)注意PH和滅菌；①PH影響外植體和培養(yǎng)材料對離子的吸收，過酸過堿的培養(yǎng)基影響培養(yǎng)材料的生長；此外，瓊脂培養(yǎng)基的PH值還影響到培養(yǎng)基的凝固狀況。②滅菌，植物組織培養(yǎng)必須在無菌環(huán)境中進(jìn)行。培養(yǎng)基煮沸后再分裝的原因：因?yàn)楹傊呐囵B(yǎng)基會(huì)在40℃左右時(shí)凝固，因?yàn)橐仍谒≈屑訜?，使其成為均勻液態(tài)時(shí)在尚未冷卻情況下盡快分裝。培養(yǎng)基的滅菌過程。答：①檢查滅菌鍋外層鍋內(nèi)水位，水量過少時(shí)應(yīng)加水。把分裝好的培養(yǎng)基及其他需滅菌的各種器具和蒸餾水放入滅菌鍋的消毒桶內(nèi)。②蓋上鍋蓋，注意按照說明操作并確定已蓋好，設(shè)置好溫度和時(shí)間參數(shù)，開啟電源加熱滅菌。③滅菌時(shí)間到后，先切斷電源，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，待滅菌鍋壓力表指針降到0時(shí)，打開排氣閥，旋松螺栓，開啟鍋蓋，取出已滅菌的培養(yǎng)基。④剛滅過菌的培養(yǎng)基成液體狀，取出時(shí)不要用力搖動(dòng)，否則會(huì)導(dǎo)致部分培養(yǎng)基沾附在瓶壁。放置在水平桌面上自然冷卻。在室溫下放置12天，觀察有無微生物生長，以確定培養(yǎng)基是否徹底滅菌。經(jīng)檢查沒有雜菌生長的方可使用。為什么？答：因?yàn)樵诟邏簻缇^程中，培養(yǎng)基的某些成分會(huì)發(fā)生分解氧化，常使培養(yǎng)基的pH值發(fā)生一定幅度的變化，pH值的變化方向和幅度取決于多種因素，如培養(yǎng)基的成分，濃度，滅菌時(shí)間及溫度等，因此在設(shè)定培養(yǎng)基pH值時(shí)應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況做適當(dāng)調(diào)整。哪些因素影響培養(yǎng)基的凝固？答：1）pH值調(diào)節(jié)不準(zhǔn)確，偏酸 ；2）滅菌時(shí)間過長，破壞了瓊脂的結(jié)構(gòu)； 3）瓊脂質(zhì)量及用量的問題。1mol/L HCl和NaOH的配制方法？答：如要1mol/L HCl 配制1L（36%鹽酸密度 ，37%鹽酸密度 ，）方法一：須配制1mol/L 1L= 1mol HCl，則 1 247。 36% 247。 =。方法二： 1000 36% 247。 = mol/L，根據(jù)m1*v1=m2*v2，v1=（1mol/L 1L）247。 mol/L = mL。即取36% mL定容于1L的蒸餾水水中。1mol/L NaOH的配制方法：取40g NaOH固體溶解于蒸餾水中，最后定容至1L。為什么常在消毒液中加入1～2滴表面活性劑如吐溫80？答：吐溫80作為一種表面活性劑，具有乳化、擴(kuò)散、增溶、穩(wěn)定等作用。在消毒液中加入1～2滴吐溫80可以促使消毒液更充分地濕潤整個(gè)外植體組織，進(jìn)而將消毒液滲透、擴(kuò)散到菌團(tuán)內(nèi)部，達(dá)到更好的消毒效果。，通過哪些措施來防止雜菌對接種工具、接種材料的污染？ n 污染原因歸結(jié)為3個(gè)方面: 1）是組織培養(yǎng)室或接種室的清潔問題。2）是外植體自身帶菌。3）是組織培養(yǎng)過程各環(huán)節(jié)操作不適宜或不嚴(yán)格。1胡蘿卜切塊滅菌后為什么要反復(fù)清洗？在接種時(shí)為什么一定要切割胡蘿卜塊的外圍？切割多大接種才最合適？被接種的部位一定要含有哪種組織，為什么？增殖率=（增殖的外植體數(shù)量/接種外植體數(shù)量）*100%；增殖系數(shù)（倍數(shù)）= 繼代培養(yǎng)后產(chǎn)生的莖芽總數(shù)/繼代接種時(shí)的外植體個(gè)數(shù)； 污染率=（污染的外植體數(shù)量/接種外植體數(shù)量）*100%；誘導(dǎo)率(%)=(分化出叢生芽的外植體數(shù)量/接種外植體數(shù)量)*100%； 注：增殖率，誘導(dǎo)率的計(jì)算均應(yīng)除去污染的外植體。
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