20xx年醫(yī)學(xué)專題—hela細(xì)胞的研究及對(duì)癌癥研究的貢獻(xiàn)-資料下載頁(yè)
2025-10-26 12:59本頁(yè)面
【正文】 CO2的細(xì)胞培養(yǎng)(p233。iyǎng)箱中培養(yǎng)(p233。iyǎng)，隔天傳代一次。,傳代(chu225。n d224。i),胰酶消化細(xì)胞，將細(xì)胞懸液收集至離心管中。800rpm離心5min，棄上清液。加兩倍量培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞，平均分置于兩個(gè)培養(yǎng)瓶中， 37℃，5%CO2及飽和濕度的CO2培養(yǎng)箱中。1224小時(shí)內(nèi)觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。,Ⅲ、Hela cells 的培養(yǎng)、傳代、凍存和復(fù)蘇,Fig. 9 培養(yǎng)瓶（左）、倒置顯微鏡（中）、5%CO2培養(yǎng)箱（右）,第九頁(yè)，共十一頁(yè)。,10,復(fù)蘇(f249。 sū),準(zhǔn)備37℃恒溫水浴箱。從液氮中取出冰存管、迅速(x249。n s249。)置于溫水中并不斷攪動(dòng)。凍存管中的凍存物在1min之內(nèi)融化。打開(kāi)凍存管，將細(xì)胞懸液吸到離子管中。 800rpm離心5min，棄上清液。沉淀加10ml培養(yǎng)液，吹打均勻，再離心10min，棄上清液。加適當(dāng)培養(yǎng)基后將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至25mm2培養(yǎng)瓶中， 37℃培養(yǎng)，第二天觀察生長(zhǎng)情況。,凍存,胰酶消化細(xì)胞，將細(xì)胞懸液收集至離心管中。800rpm離心5min，棄上清液。沉淀加含保護(hù)液的培養(yǎng)液，計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞至5106/ml左右(zuǒy242。u)。將懸液分至凍存管，每管1ml。將凍存管口封嚴(yán)。按下列順序降溫：室溫 冰箱冷藏室（4℃，30min ） 冰箱冷凍室（ 20℃，60min ） 低溫冰箱（70℃，過(guò)夜 ） 液氮。,第十頁(yè)，共十一頁(yè)。,內(nèi)容(n232。ir243。ng)總結(jié),匯報(bào)人： 李海航。附：HepG2細(xì)胞（人體肝癌細(xì)胞）該癌細(xì)胞是取自于一個(gè)15歲白人的肝癌組織。Jonas Salk醫(yī)生(yīshēng)用了近9年的時(shí)間，于1953年成功研制出第一個(gè)成功脊髓灰質(zhì)炎疫苗。1224小時(shí)內(nèi)觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。從液氮中取出冰存管、迅速置于溫水中并不斷攪動(dòng)。將凍存管口封嚴(yán),第十一頁(yè)，共十一
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