【正文】 子、轉(zhuǎn)化因子家族以及其他細(xì)胞因子等。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)：細(xì)胞因子共同特性（1）化學(xué)性質(zhì)大都為糖蛋白。（2）細(xì)胞因子可以旁分泌、自分泌或內(nèi)分泌的方式發(fā)揮作用。（3）一種細(xì)胞可產(chǎn)生多種細(xì)胞因子，不同類型的細(xì)胞可產(chǎn)生一種或幾種相同的細(xì)胞因子。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)指導(dǎo)：血象特點(diǎn)血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)指導(dǎo)血象：血紅蛋白、紅細(xì)胞均減少，以血紅蛋白減少更為明顯。輕度貧血時(shí)紅細(xì)胞形態(tài)無明顯異常，中度以上貧血時(shí)紅細(xì)胞體積減小，中心淡染區(qū)擴(kuò)大，嚴(yán)重時(shí)紅細(xì)胞可呈環(huán)狀，并有嗜多色性紅細(xì)胞及點(diǎn)彩紅細(xì)胞增多。網(wǎng)織紅細(xì)胞輕度增多或正常。白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類一般正常。血小板計(jì)數(shù)一般正常。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)：單向擴(kuò)散試驗(yàn)單向擴(kuò)散試驗(yàn)：瓊脂內(nèi)混入抗體，待測抗原從局部向瓊脂內(nèi)自由擴(kuò)散，如抗原和相應(yīng)抗體結(jié)合，則形成沉淀環(huán)。試管法：%瓊脂糖溶液中，注入小試管內(nèi)，上層加抗原溶液使待測抗原在凝膠中自由擴(kuò)散，在抗原抗體比例恰當(dāng)位置形成沉淀環(huán)。平板法：%瓊脂糖內(nèi)，未凝固前傾注成平板，然后在上打孔，將抗原加入孔中，放37℃讓其自由擴(kuò)散，24～48h后可見孔周圍出現(xiàn)沉淀環(huán)，測定環(huán)的直徑或面積計(jì)算標(biāo)本中待測抗原的濃度。有兩種計(jì)算方法：l）Mancini曲線：適用大分子抗原的和長時(shí)間擴(kuò)散（》48h）的結(jié)果，沉淀環(huán)直徑的平方與抗原濃度呈線性關(guān)系c/d2=k.（其中c為抗原濃度 d為沉淀環(huán)直徑 k為常數(shù)）單向擴(kuò)散試驗(yàn)檢測時(shí)的注意點(diǎn)：（1）抗血清必須特異性強(qiáng)、效價(jià)高、親和力強(qiáng)，在良好條件下保存。（2）每次測定都必須作標(biāo)準(zhǔn)曲線。（3）每次測定時(shí)必須用質(zhì)控血清作質(zhì)控。（4）注意雙環(huán)現(xiàn)象（出現(xiàn)了兩種抗原性相同成分）。（5）應(yīng)用單克隆抗體測量多態(tài)性抗原時(shí)，測定值偏低；用多克隆抗體測量單克隆病時(shí)，測定值偏高2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)：雙向擴(kuò)散試驗(yàn)雙向擴(kuò)散試驗(yàn)：在瓊脂內(nèi)抗原和抗體各自向?qū)Ψ綌U(kuò)散，在最恰當(dāng)?shù)谋壤幮纬煽乖贵w沉淀線，根據(jù)沉淀線的位置、形狀以及對比關(guān)系，可對抗原或抗體作出定性分析。雙向擴(kuò)散試驗(yàn)也分為試管法和平板法。試管法：在含有抗原的溶液和含有抗體瓊脂中間，加一層普通瓊脂，讓下層抗體和上層抗原向中間自由擴(kuò)散，在抗原、抗體濃度最適時(shí)形成沉淀線。平板法：是在瓊脂板上相距3～5mm打一對孔，或者梅花孔、雙排孔、三角孔等。在相應(yīng)孔中加入抗原或抗體，待其自由擴(kuò)散后，抗原、抗體形成可見的沉淀線。根據(jù)沉淀線的位置可作如下分析：①抗原、抗體是否存在及其相對含量。一般沉淀線靠近抗原孔，提示抗體量大，沉淀線靠近抗體孔，提示抗原量大。②抗原、抗體相對分子量的分析；抗原或抗體在瓊脂內(nèi)自由擴(kuò)散，其速度受分子量影響。分子量小者，擴(kuò)散快，反之較慢。由于慢者擴(kuò)散圈小，局部濃度較大，形成沉淀線彎向分子量大的一方。如若兩者分子量相等，則形成直線。③抗原性質(zhì)的分析，受檢的抗原性質(zhì)可能完全相同、部分相同、完全不同，沉淀弧可分別出現(xiàn)完全融合、部分融合、不融合三種情況；④抗體效價(jià)的滴定?？贵w效價(jià)是抗原、抗體經(jīng)過自由擴(kuò)散形成沉淀線，出現(xiàn)沉淀線的最高抗體稀釋度為該抗體的效價(jià)。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)指導(dǎo)：酸化甘油溶血試驗(yàn)（1）原理：當(dāng)甘油存在于低滲溶液氯化鈉磷酸緩沖液時(shí)，可阻止其中的水快速進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)，使溶血過程緩慢。但甘油與膜脂質(zhì)又有親和性，可使膜脂質(zhì)減少。當(dāng)紅細(xì)胞膜蛋白及膜脂質(zhì)有缺陷時(shí)，導(dǎo)致紅細(xì)胞懸液的吸光度降至50%的時(shí)間（AGLT50）明顯縮短。參考值：AGLT50大于l800s（30min）（2）臨床意義：減少見于遺傳性球形細(xì)胞增多癥（25～150s）、腎功能衰竭、慢性白血病、自身免疫性溶貧和妊娠婦女。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)血液檢驗(yàn)復(fù)習(xí)指導(dǎo)：紅細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)與功能：紅細(xì)胞膜含脂類40%，蛋白質(zhì)50%，碳水化合物10%.膜的主要蛋白有主體蛋白和外周蛋白。后者包括收縮蛋白、肌動蛋白、錨蛋白和區(qū)帶（～）等，即骨架系統(tǒng)，起支架作用，對維持紅細(xì)胞的形狀、穩(wěn)定性和變形性有重要作用。膜的主要脂類為磷脂和膽固醇，起屏障和保持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定性作用。：屏障作用和可變性；半透性；免疫性；受體特性：激素類受體、遞質(zhì)類受體、丙種球蛋白受體、病毒受體、EP0受體和鐵蛋白受體等。：紅細(xì)胞能量代謝紊亂；紅細(xì)胞膜有遺傳性缺陷；酶缺陷。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)血液檢驗(yàn)輔導(dǎo)：血紅蛋白病的定義與分類血紅蛋白病的定義與分類：血紅蛋白病是一組由于生成血紅蛋白的珠蛋白肽鏈（α、β、γ、δ）的結(jié)構(gòu)異?；蚝铣呻逆溗俾实母淖儯鹧t蛋白功能異常所致的疾病。血紅蛋白病多為遺傳性，如：因控制遺傳的珠蛋白基因發(fā)生突變所致的結(jié)構(gòu)性血紅蛋白?。灰蛑笇?dǎo)珠蛋白合成速率的遺傳基因缺陷所致的珠蛋白生成障礙性貧血或稱海洋性貧血。另外，也可見獲得性血紅蛋白病。通常是由接觸或誤服化學(xué)藥物所致。常見的結(jié)構(gòu)性血紅蛋白病是因合成的珠蛋白的氨基酸序列改變而引起血紅蛋白功能或理、化性質(zhì)異常的疾病，如：引起血紅蛋白異常聚合的HbS??；不穩(wěn)定血紅蛋白癥、高鐵血紅蛋白血癥等。常見的珠蛋白生成障礙性貧血為α或β珠蛋白生成障礙性貧血。也有多種基因異常導(dǎo)致的血紅蛋白病，如HbE、Hb Constant Spring、Hb Lepore等。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)臨床檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)：溶血空斑形成試驗(yàn)溶血空斑形成試驗(yàn)：經(jīng)典的溶血斑試驗(yàn)用于檢測實(shí)驗(yàn)動物抗體形成細(xì)胞的功能，其原理是將綿羊紅細(xì)胞（SRBC）免疫小鼠，4天后取出脾細(xì)胞，加入SRBC及補(bǔ)體，混合在溫?zé)岬沫傊芤褐?，澆在平皿?nèi)或玻片上，使成一蒲層，置37℃溫育。由于脾細(xì)胞內(nèi)的抗體生成細(xì)胞可釋放抗SRBC抗體，使其周圍的SRBC致敏，在補(bǔ)體參與下導(dǎo)致SRBC溶血，形成一個(gè)肉眼可見的圓形透明溶血區(qū)而成為溶血空斑（plaque）。每一個(gè)空斑表示一個(gè)抗體形成細(xì)胞，空斑大小表示抗體生成細(xì)胞產(chǎn)生抗體的多少。這種直接法所測的細(xì)胞為IgM生成細(xì)胞，其他類型Ig由于溶血效應(yīng)較低，不能直接檢測，可用間接檢測法，即在小鼠脾細(xì)胞和SRBC混合時(shí)，再加抗鼠Ig抗體（如兔抗鼠Ig），使抗體生成細(xì)胞所產(chǎn)生的IgG或IgA與抗Ig抗體結(jié)合成復(fù)合物，此時(shí)能活化補(bǔ)體導(dǎo)致溶血，稱間接空斑試驗(yàn)。但是上述直接和間接空斑形成試驗(yàn)都只能檢測抗紅細(xì)胞抗體的產(chǎn)生細(xì)胞，而且需要事先免疫，難以檢測人類的抗體產(chǎn)生情況。如果用一定方法將SRBC用其它抗原包被，則可檢查與該抗原相應(yīng)的抗體產(chǎn)生細(xì)胞，這種非紅細(xì)胞抗體溶血空斑試驗(yàn)稱為空斑形成試驗(yàn)，它的應(yīng)用范圍較大?，F(xiàn)在常用的為SPASRBC溶血空斑試驗(yàn)。SBA能與人及多數(shù)哺乳動物IgG的Fc段呈非特異性結(jié)合，利用這一特征，首先將SPA包被SRBC，然后進(jìn)行溶血空斑測定，可提高敏感度和應(yīng)用范圍。在該測試系統(tǒng)中，加入抗人Ig抗體，可與受檢細(xì)胞產(chǎn)生的免疫球蛋白結(jié)合形成復(fù)合物，復(fù)合物上的Fc段可與連接在SRBC上的SPA結(jié)合，同時(shí)激活補(bǔ)體，使SRBC溶解形成空斑。此法可用于檢測人類外周血中的IgG產(chǎn)生細(xì)胞，與抗體的特異性無關(guān)。用抗IgA、IgG或IgM抗體包被SRBC，可測定相應(yīng)免疫球蛋白的產(chǎn)生細(xì)胞，這種試驗(yàn)稱為反相空斑形成試驗(yàn)。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)臨床檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)：淋巴細(xì)胞分離：利用單核細(xì)胞在37℃和Ca2+存在時(shí)，能主動粘附在玻璃、塑料、尼龍毛、棉花纖維或葡聚糖凝膠的特性，從單個(gè)核細(xì)胞懸液中除去單核細(xì)胞，從而獲得純淋巴細(xì)胞群。主要的方法有：①粘附貼壁法；②吸附柱過濾法；③磁鐵吸引法。：根據(jù)相應(yīng)細(xì)胞的特性和不同的標(biāo)志加以選擇性純化。根據(jù)細(xì)胞的特性和標(biāo)志選擇純化所需細(xì)胞的方法是陽性選擇法，而選擇性去除不要的細(xì)胞，僅留下所需的細(xì)胞為陰性選擇。常用的方法包括：①E花環(huán)沉降法；②尼龍毛柱分離法；③親和板結(jié)合分離法；④磁性微球分離法及熒光激活細(xì)胞分離儀分離法。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：鋅的生理功能（1）鋅可以作為多種酶的功能成分或激活劑；（2）促進(jìn)生長發(fā)育，促進(jìn)核酸及蛋白質(zhì)的生物合成；（3）增強(qiáng)免疫及吞噬細(xì)胞的功能；（4）有抗氧化、抗衰老、抗癌的作用。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：鋅的吸收排泄鋅在小腸上皮細(xì)胞內(nèi)吸收，運(yùn)送至肝和全身。從糞便、尿、汗、頭發(fā)、及乳汁排泄?？梢詼y定血鋅或發(fā)鋅判斷體內(nèi)含鋅情況。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：鋅的含量分布鋅是體內(nèi)含量僅次于鐵的微量元素。鋅在在正常成人體內(nèi)含量為2～，男性略高于女性，視網(wǎng)膜、前列腺、胰腺濃度最高；肌肉內(nèi)儲鋅占全身鋅的62%，骨占28%。血鋅：80%存在于紅細(xì)胞，約18%的鋅分布于血漿。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技師臨檢基礎(chǔ)知識講解：輸血傳播性疾病的概述常見的有：乙型、丙型肝炎，艾滋病，巨細(xì)胞病毒感染，梅毒，瘧疾，弓形體病等。獻(xiàn)血者有EB病毒感染，黑熱病、絲蟲病、回歸熱感染時(shí)，均有可能通過輸血傳播。此外，如血液被細(xì)菌污染，可使受血者由此引起菌血癥，嚴(yán)重者可致敗血癥。在由輸血引起的疾病中，以肝炎和艾滋病危害性最大。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技師臨檢基礎(chǔ)知識講解：常見輸血的不良反應(yīng)溶血反應(yīng)、非溶血性發(fā)熱反應(yīng)、過敏反應(yīng)、蕁麻疹、非心源性肺水腫、移植物抗宿主病、輸血后紫癜、對紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板或血漿蛋白的同種（異體）免疫等。高熱（有休克）、充血性心力衰竭、理化性溶血、空氣栓塞、出血傾向、枸櫞酸鈉中毒、鉀中毒、血液酸化、高血氨、含鐵血黃素沉著癥、血栓性靜脈炎、疾病傳播（乙肝、丙肝、艾滋病、梅毒、瘧疾，巨細(xì)胞病毒感染等）。2012醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)臨床檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)：淋病奈瑟菌的臨床意義臨床意義：淋病奈瑟菌是常見的性傳播疾病淋病的病原菌，主要通過性接觸直接侵襲感染泌尿生殖道，口咽部及肛門直腸的黏膜。如單純性淋病、盆腔炎、淋菌型結(jié)膜炎。2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)臨床檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)：淋病奈瑟菌的生物學(xué)特性（1）形態(tài)與染色：本菌的形態(tài)與腦膜炎奈瑟菌很相似。在膿汁標(biāo)本中，此菌通常位于中性粒細(xì)胞內(nèi)，而在慢性淋病時(shí)常位于細(xì)胞外。從患者體內(nèi)新分離的菌株可有莢膜和菌毛，經(jīng)人工培養(yǎng)后，呈卵圓形或球形，排列不規(guī)則。無芽胞和鞭毛。（2）培養(yǎng)特性：營養(yǎng)要求較高，須在含有血液、血清或多種氨基酸和無機(jī)鹽類物質(zhì)的培養(yǎng)基上生長良好。國內(nèi)常用血液瓊脂、巧克力瓊脂、EPV瓊脂等培養(yǎng)基。初次分離時(shí)，須置5%～10224。2條件下才能生長。（3）生化反應(yīng)：可發(fā)酵葡萄糖、產(chǎn)酸，但不酵解麥芽糖（常借此與腦膜炎奈瑟菌相鑒別）。氧化酶和觸酶試驗(yàn)均陽性。主要有三種抗原：菌毛蛋白抗原、脂多糖抗原和外膜蛋白抗原。對外界抵抗力極低。2012年臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技師免疫檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)：淋巴細(xì)胞保存與活力的測定（1）短期保存技術(shù)：將分離的細(xì)胞用適量含10%～20%滅活小牛血清的Hanks、Tc19RPMIl640或其他培養(yǎng)液稀釋重懸。短期保存可置于4℃保存。（2）長期保存技術(shù)：液氮深低溫（196℃）環(huán)境保存細(xì)胞，加入二甲亞砜作為保護(hù)劑。：最簡便常用的為臺盼藍(lán)染色法。臺盼藍(lán)又稱錐藍(lán)，是一種陰離子型染料，這種染料不能透過活細(xì)胞正常完整的細(xì)胞膜，故活細(xì)胞不著色，但死亡細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性增加，可使染料通過細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，使死細(xì)胞著色呈藍(lán)色，通過死亡細(xì)胞與活細(xì)胞的百分比可反映細(xì)胞活力。2012年臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技師生化檢驗(yàn)輔導(dǎo)：治療藥物監(jiān)測治療藥物監(jiān)測（TDM）是指應(yīng)用一定的分析技術(shù)測定體液中藥物的濃度，以藥代動力學(xué)理論為基礎(chǔ)和電子計(jì)算機(jī)為計(jì)算工具，研究藥物在體內(nèi)的過程，使臨床給藥個(gè)體化，科學(xué)化、合理化。無論是藥物的治療作用還是不良反應(yīng)，從本質(zhì)上說都是通過藥物和靶位受體間的相互作用而產(chǎn)生的。當(dāng)藥物在體內(nèi)達(dá)到分布平衡后，雖然血液和靶位的藥物濃度往往并不相等，但血藥濃度與藥物效應(yīng)間存在相關(guān)性。故檢測相對易采集的血藥濃度，替代心、腦、腎等難以取樣的靶位藥物濃度的可行性基礎(chǔ)2012年醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技師輔導(dǎo)：水與鈉的代謝紊亂水與鈉的代謝紊亂：等滲性缺水，低滲性缺水，高滲性缺水，水過多。一、等滲性缺水又稱急性缺水或混合性缺水，是外科病人最易發(fā)生的。水和鈉成比例的喪失，血清鈉仍在正常的沲圍，細(xì)胞外液滲透壓也保持正常。（—）病因：常見的有：①消化液的急性喪失如大量嘔吐和腸瘺等；②體液喪失在感染區(qū)或軟組織內(nèi)如腹腔內(nèi)或腹膜后感染、腸梗阻和燒傷等。（二）臨床表現(xiàn)：少尿、畏食、惡心、乏力、舌干燥、眼窩下陷、皮膚干燥、松弛，但不口渴。當(dāng)喪失體液達(dá)體重的5%（相當(dāng)于喪失細(xì)胞外液20%）時(shí)，出現(xiàn)血容量不足癥狀；當(dāng)喪失體液達(dá)體重的6%～7%時(shí)，可出現(xiàn)嚴(yán)重休克，當(dāng)體液的喪失主要是胃液時(shí)，可伴發(fā)代謝性堿中毒征象。（三）診斷：主要依據(jù)病史和臨床表現(xiàn)進(jìn)行診斷。實(shí)驗(yàn)室檢查有血液濃縮表現(xiàn)，尿比重增高，但血Na+和Cl濃度仍在正常范圍內(nèi)。（四）治療 在積極治療原發(fā)病的同時(shí)，應(yīng)給予等滲鹽水，并注意補(bǔ)充血容量（包括晶體和膠體）糾正體克?？筛鶕?jù)臨床表現(xiàn)估計(jì)補(bǔ)液量，也可根據(jù)血細(xì)胞比容（hct，正常值：，）來計(jì)箅。補(bǔ)液量（l）=hct上升值/hct正常值體重（kg）二、低滲性缺水（一）病因：①胃腸道消化液持續(xù)喪失，②大創(chuàng)面慢性滲液；③腎排鈉過多。（二）臨床表現(xiàn)：常見癥狀若頭暈、視光模糊、軟弱無力、脈納速，甚至神志不清，肌痙攣性疼痛、腱反射減弱、昏迷等。輕度缺鈉：乏力、頭暈、手足麻木、口渴不明顯。中度缺鈉：除上述癥狀外，尚有惡心、嘔吐、脈細(xì)速、血壓不穩(wěn)或下降、淺靜脈萎陷。重度缺鈉：病人神志不清、肌痙攣性抽搐、腱反射減弱或消失，出現(xiàn)木僵，甚至昏迷。常發(fā)生休克。（三）診斷：①依據(jù)病史及表現(xiàn)；②尿Na+和Cl下明顯減少；③血清鈉低于135mmol/L；④紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、血細(xì)胞比容、血非蛋白氮和尿素氮均有增高；⑤。（四）治療：①積極處理病因；②采用含鹽溶液或高滲鹽水靜脈輸注。三、高滲性缺水（）病因：①攝人水不足，如食管癌吞咽困難，病危病人給水不足等；②水分喪失過多，如高熱大汗、燒傷暴露療法、糖尿病昏迷等。（二）臨床表現(xiàn)輕度缺水 除口渴外，無其他癥狀，缺水量為體重的2%～4%.中度缺水 極度口渴、乏力、尿少、尿比重高；唇干舌燥、皮膚彈性差、眼窩下陷，常出現(xiàn)煩躁。缺水量為體重的4%～6%.重度缺水 除上述癥狀外，出現(xiàn)躁狂、幻覺、譫妄、甚至昏迷。缺水量超過體重的6%.（三）診斷：①依據(jù)病史及表現(xiàn)；②尿比重增高；③血清鈉在150mmol/l以上；