trizol法同時提取rna-dna-蛋白質-資料下載頁
2025-09-25 08:58本頁面
【正文】 S調節(jié)pH至78并且加EDTA至1mM，可置于4℃或20℃長期保存。 常見問題分析： 得率低： B．最終得到的DNA沉淀沒有完全溶解 A260/A280 ：A. 檢測吸光度時，RNA樣品沒有溶于水，而溶于了TE中 B．酚除去的不徹底，（含10%乙醇）再洗一遍DNA沉淀。 DNA降解： ℃,而保存在了5至20℃ C．樣品勻漿時使用了高速勻漿儀 RNA污染： B．（含10%乙醇）洗的不徹底 蛋白質的提取 準備試劑：異丙醇 %乙醇 無水乙醇 1%SDS 操作步驟： ，用異丙醇沉淀蛋白質。每使用1ml ，室溫放置10分鐘，28℃12000g離心10分鐘棄上清。 2．%乙醇洗滌蛋白質沉淀。每使用1ml TRIzol加2ml洗滌液，室溫放置20分鐘，28℃7500g離心5分鐘，棄上清，重復兩次。用2ml無水乙醇同樣方法再洗一次。 3．真空抽干蛋白質沉淀510分鐘，用1%SDS溶解蛋白質，反復吸打，50℃溫浴使其完全溶解，不溶物28℃10000g離心10分鐘除去。分離得到的蛋白質樣品可用于Western Blot或5至20℃保存?zhèn)溆谩?注意事項： %乙醇或無水乙醇中28℃一個月以上或5至20℃一年以上。 2．% SDS在28℃透析三次，10000g離心10分鐘取上清即可用于Western Blot。 常見問題分析： 得率低： B．最后得到的蛋白質沉淀未完全溶解 蛋白質降解：組織取出后沒有馬上處理或冷凍 電泳時條帶變形：蛋白質沉淀洗滌不充內容總結
（1）TRIzol法同時提取RNA,DNA,蛋白質TRIzol試劑適用于從細胞和組織中快速分離RNA
（2）每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇
（3）預期產(chǎn)量：1mg組織或1106細胞提取RNA分別為： 肝和脾610μg ,腎34μg , ,胎盤14μg ,上皮細胞815μg ,成纖維細胞57μ
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