三少__12基因工程的基本操作步驟-資料下載頁
2025-03-08 05:43本頁面
【正文】 體上 轉(zhuǎn)化過程 : Ti質(zhì)粒 目的基因 構(gòu)建 表達(dá)載體 導(dǎo)入 植物細(xì)胞 插入 植物細(xì)胞染色 DNA 表達(dá) 新性狀 轉(zhuǎn)入 農(nóng)桿菌 （ 2）基因槍法 基因槍法又稱微彈轟擊法，是利用壓縮氣體產(chǎn)生的動力，將包裹在金屬顆粒表面的表達(dá)載體 DNA打入受體細(xì)胞中，使目的基因與其整合并表達(dá)的方法。 （ 3）花粉通道法 植物花粉在柱頭上萌發(fā)后，花粉管要穿過花柱直通胚囊。花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成的花粉管還未愈合前，剪去柱頭，然后，滴加 DNA（含目的基因），使目的基因借助花粉管通道進(jìn)入受體細(xì)胞。 將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞 ① 方法：顯微注射法 ② 程序： 目的基因表達(dá)載體提純 取卵（受精卵） 顯微注射 受精卵 新性狀動物 將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞 常用法 ： Ca2+處理 常用菌 ：大腸桿菌 微生物作受體細(xì)胞原因： 繁殖快 、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對少 過程： Ca2+處理大腸桿菌 感受態(tài)細(xì)胞 表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合 感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA 目的基因的獲取 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 目的基因的檢測與鑒定 基因工程基本操作的四個步驟 才能確定目的基因是否真正在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳和正確表達(dá)。 四、目的基因的檢測與鑒定 檢測 ①導(dǎo)入檢測：目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞 方法 —— DNA分子雜交 ②表達(dá)檢測 轉(zhuǎn)錄檢測 —— 分子雜交 翻譯檢測 —— 抗原抗體 雜交 分子檢測法 鑒定 抗蟲鑒定 抗病鑒定 活性鑒定等 個體水平的鑒定
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