【正文】 56 敵百蟲 2023/3/23 107 名 稱： Paration 別 名：對硫磷 分子量： 291 S(C2H5O)2P NO2O一六 0五 2023/3/23 108 名 稱： Chlorpyrifos 分子量： 349 分子式： NClClCl(C2H5O)2POS毒死蜱 2023/3/23 109 擬除蟲菊農(nóng)藥 一、概 述 除蟲菊 2023/3/23 110 名 稱： Cypermethrine 別 名： Agrothrin 分子量： 415 ClClC CHCH3CH3COOCHCNO氟氯氰酯 2023/3/23 111 名 稱： Dichlofluanid 別 名： Recamethrin 分子量： 503 CHCH 3CH 3CNBr2COOO溴氰菊酯 2023/3/23 112 名 稱： Flucythrinate 別 名： Payoff 分子量： 451 C NOOC H (C H 3)2F 2C H OO氟氰戊菊酯 2023/3/23 113 名 稱： Fenvalerate 別 名：氰戊菊酯 分子量： 419 CNOOCH (CH 3)2ClO殺滅菊酯 2023/3/23 114 氨基甲酸酯農(nóng)藥 氨基甲酸酯類農(nóng)藥基本結(jié)構(gòu)式： N/（ NN二）甲基氨基甲酸酯類 R’ N C C X R’’ O 2023/3/23 115 名 稱： Aldicarb 別 名： Temik 分子量： 190 C H 3 S C ( C H 3 ) 2 C H N O C N H C H 3O涕滅威 2023/3/23 116 名 稱： Carbaryl 別 名：胺甲萘 分子量： 201 CONHCH3O西維因 2023/3/23 117 名 稱： Carbofuran 別 名：呋喃丹 分子量： 221 C N H C H3C H2C H3C H3OOO蟲螨威 2023/3/23 118 名稱： Isoprocarb 別 名：葉蟬散 k 分子量： 193 O C O N H C H3C H (C H3)2異丙威 2023/3/23 119 （三）農(nóng)藥殘留的測定 2023/3/23 120 A. 氣相色譜法測定葡萄、胡蘿卜、菠菜、茶葉以及煙葉中的硫丹殘留 ?硫丹 （ Endosulfan） 是一種常見的有機(jī)氯農(nóng)藥 ， 主要以兩種異構(gòu)體的混合物 （ α硫丹和 β硫丹 ） 形式存在 ， 其比例為7:3。 它是一種廣譜的殺蟲劑 ， 具有觸殺 、 胃毒和熏蒸多種作用 ， 主要針對咀嚼式和刺吸式口器害蟲 。 該農(nóng)藥適用作物包括各種水果和蔬菜 、 茶葉 、 煙草以及棉花等 。 2023/3/23 121 A. 氣相色譜法測定葡萄、胡蘿卜、菠菜、茶葉以及煙葉中的硫丹殘留 ?硫丹被人吸入 、 攝入或經(jīng)皮膚吸收可以引起中毒 ， 主要損害運(yùn)動中樞 、 小腦 、 腦干以及肝 、 腎和生殖系統(tǒng) ， 而且對人有致突變作用 ， 為致癌物質(zhì) 。 ? 硫丹作為一種高效廣譜殺蟲劑曾經(jīng)被廣泛使用 ， 而且結(jié)構(gòu)穩(wěn)定 、 殘留期長 ， 因此在農(nóng)產(chǎn)品和食品中殘留現(xiàn)象較為普遍 。 2023/3/23 122 硫丹的化學(xué)結(jié)構(gòu) OOSOC lC lC lC lC lC lαEndosulfan ClClClClClClOOSOβEndosulfan 2023/3/23 123 (1) 樣品的制備 ：對于水果蔬菜類 ， 先用水洗去泥沙然后除去表面附著的水分 ， 取食用部分 ， 沿縱軸剖開 ， 切成四等分 ， 取相對的兩塊 ， 切碎 ， 混勻 。 而對茶葉與煙草等干燥產(chǎn)品 ， 則將樣品全部磨碎 ， 四分法縮分 。 2023/3/23 124 (2) 提取 勻漿法 ：稱取 5 g樣品于高速組織搗碎機(jī)中 ， 加入 25 mL100%純甲醇 ， 充分勻漿搗碎 2 min， 取上清液 ， 待凈化 機(jī)械振蕩法 ：稱取 5 g樣品 ， 加入 25 mL100%純甲醇 ， 于電動振蕩機(jī)上振蕩 1 h， 靜置 （ 或離心 ） ， 取上清液 ， 待凈化 。 人工手搖法 ：稱取 5 g樣品 ， 加入 25 mL100%純甲醇 ， 手動搖晃 5 min， 靜置 （ 或離心 ） ， 取上清液 ， 待凈化 。 2023/3/23 125 (3) 凈化 固相萃取法 ：將 C18反相萃取柱安裝在固相萃取真空抽濾裝置上 。 用 3 mL甲醇預(yù)淋洗 ， 取 1 mL樣液用水稀釋至 10 mL上樣 ， 淋洗液為 4 mL的 40%甲醇 ， 最后用 4 mL正己烷洗脫 ，收集洗脫液 ， 蒸干后用正己烷定容至 1 mL。 2023/3/23 126 (3) 凈化 層析柱法 ：在直徑 15 cm 2 cm玻璃層析柱內(nèi) ， 底部墊少許脫脂棉 ， 從下向上依次填入 1 cm無水硫酸鈉 ， 1 g 5%加水脫活的弗羅里硅土 （ 或中性氧化鋁 ） ， 裝好柱后輕輕敲實(shí) 。 上樣量 1 mL， 先用 4 mL正己烷洗脫 ， 接著用正己烷 /丙酮(v/v3:1)洗脫 。 收集最初流出的 8 mL洗脫液 ， 轉(zhuǎn)移到蒸餾瓶中 ， 將其蒸發(fā)至干 ， 用正己烷清洗 ， 定容至 1 mL。 注：弗羅里硅土和中性氧化鋁在使用前需在 600 ℃ 下高溫活化4 h。 2023/3/23 127 氣相色譜測定 ? 島津 GC－ 2023氣相色譜儀 ， 日本島津公司 ? DB5彈性石英毛細(xì)管柱 ， 美國安捷倫公司 ? （ 30m ） ? 電子捕獲檢測器 2023/3/23 128 測定條件 進(jìn)樣口溫度 ： 280 ℃ ， 檢測器溫度： 300 ℃ ， 載氣： %氮?dú)?， 柱流速： mL/min。 分流進(jìn)樣 ， 分流比 1:10， 進(jìn)樣量 μL。 色譜柱程序升溫 ： 130 ℃ （ 1 min） 8 ℃ /min 220 ℃ （ 1 min）5 ℃ /min 260 ℃ （ 6 min） 2023/3/23 129 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 準(zhǔn)確稱取 α硫丹 ， β硫丹標(biāo)準(zhǔn)品 配制成 1000 μg/mL正己烷貯備液 ， 分別吸取一定量的貯備液按 1:1混合 ， 用正己烷稀釋定容至 ， 1， 5， 10， 20， 50， 80 μg/L標(biāo)準(zhǔn)系列 ， 以上述色譜條件進(jìn)樣測定 ， 制得標(biāo)準(zhǔn)曲線 。 2023/3/23 130 計(jì)算殘留量 ?樣品采用外標(biāo)法定量 ， 以所得樣品的峰高換算出對應(yīng)于標(biāo)準(zhǔn)曲線的物質(zhì)的質(zhì)量 。 然后代入下式計(jì)算殘留量 : 樣品殘留量 (mg/kg) = 樣品峰高對應(yīng)的物質(zhì)的質(zhì)量 (ng) 樣品定容體積 (mL) 進(jìn)樣體積 樣品質(zhì)量 (g) 2023/3/23 131 樣品加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn) 在氣相色譜分析確定待測樣品中的硫丹農(nóng)殘含量均低于 μg/kg 后 ， 樣品要做加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn) 。 在以上空白樣品中添加幾個(gè)不同濃度的硫丹標(biāo)樣 ， 室溫靜置過夜 。 按照上述方法處理 ， 測定 ， 計(jì)算回收率 。 2023/3/23 132 B. 氣相色譜法測定蔬菜中 5 種農(nóng)藥百菌清、甲胺磷、樂果、敵殺死、敵百蟲殘留 樣品來源： (1) 從無公害基地隨機(jī)采取蔬菜 ， 共 8 個(gè)品種即西紅柿 、 四季豆 、 大白菜 、 窩筍 、 黃瓜 、 豇豆 、 辣椒 、 空心菜 ， 40 個(gè)批次 。 (2) 從農(nóng)貿(mào)市場隨機(jī)構(gòu)買蔬菜 ， 共 5 個(gè)品種即西紅柿 、 黃瓜 、小白菜 、 空心菜 、 豇豆 ， 10 個(gè)批次 。 2023/3/23 133 樣品的處理 測定百菌清 、 敵殺死的試樣制備 : 稱取 25g被測蔬菜 ， 用組織搗碎機(jī)搗碎后 ， 置于錐形瓶中 ，加 60ml丙酮和 50%的磷酸 2 ml ， 經(jīng)充分振蕩 10min后過濾 ，用 20ml丙酮洗滌錐形瓶 2次 。將濾液移入 250ml分液漏斗中 ，加入 20%的硫酸鈉 100ml搖勻后 ， 用 30ml環(huán)已烷提取 2次 ，靜止分層 ， 提取液用帶有硫酸鈉的漏斗干燥后 ， 在水浴中濃縮至 10ml進(jìn)行層析；層析柱依次墊少許脫脂棉 ， 4cm高的無水硫酸鈉 ， 10g弗羅里硅土 ， 2 cm 高的無水硫酸鈉 ， 用20ml環(huán)已烷預(yù)淋洗層析柱 ， 然后將濃縮液倒入柱中 ， 用環(huán)已烷淋洗 ， 收集淋洗液 ， 定容 。 2023/3/23 134 樣品的處理 測定樂果 、 敵百蟲 、 甲胺磷的試樣制備 : 稱取 10g被測蔬菜搗碎后放于于錐形瓶中 ， 加入 30ml丙酮 ，充分振蕩 30min， 抽濾 ， 取濾液 20ml于燒杯中 ， 加 30ml洗滌液 （ 5g氯化銨 、 10ml磷酸 、 100ml水組成 ， 用時(shí)稀釋 4 倍 ）放置 5min后抽濾 ， 用 5ml洗滌液洗滌燒杯后 ， 將濾液轉(zhuǎn)至分液漏斗中 ， 加 3g氯化鈉 ， 用 30ml二氯甲烷兩次提取 ， 合并提取液 ， 在 50℃ 水浴中濃縮至近干 ， 加入 5ml正已烷；在小型層柱中依次墊入少許脫脂棉 ， 1g硅膠 ， 將濃縮液倒入層析柱 ， 再依次以 5ml正已烷和二氯甲烷 (9 ： 1) 、 10ml正已烷和丙酮 (7 ： 4) 洗柱 ， 收集層析液于 50℃ 水浴近干 ， 用丙酮定容至 2ml。 2023/3/23 135 儀器 氣相色譜儀 SP 3420 型 [熱導(dǎo)檢測器 ( TSD) 、 電子捕獲檢測器 ( ECD) ] 2023/3/23 136 第八節(jié) 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測技術(shù) 三 、 重金屬殘留檢測技術(shù) ?環(huán)境中 80余種金屬元素可以通過 食物和飲水 攝入 ，以及 呼吸道吸入 和 皮膚接觸 等途徑進(jìn)入人體 ， 其中一些金屬元素在較低攝入量的情況下對人體即可產(chǎn)生明顯的毒性作用 。 如鉛 、 鎘 、 汞等 ， 常稱之為 有毒金屬 ； 另外許多金屬元素 ， 甚至包括某些必需元素 ， 如鉻 、 錳 、 鋅 、 銅等 ， 如攝入過量也可對人體產(chǎn)生較大的毒性作用或潛在危害 。 2023/3/23 137 第八節(jié) 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測技術(shù) ?影響金屬毒物致毒作用強(qiáng)度的因素 主要有以下幾個(gè)方面： ① 金屬元素的存在形式； ② 機(jī)體的健康和營養(yǎng)狀況以及食物中某些營養(yǎng)素的含量和平衡情況； ③ 金屬元素間或金屬與非金屬元素間的相互作用； ④ 另一方面 ， 某些有些金屬元素間也可產(chǎn)生協(xié)同作用 。 ?檢測使用有機(jī)物破壞法提取 ， 采用分光光度法 、氫化物原子熒光光度法 、 原子吸收光譜法 、 電化學(xué)法 、 氣相色譜法測定 。 2023/3/23 138 第八節(jié) 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測技術(shù) 四 、 有害生物檢測 ? 真菌類： 形態(tài)學(xué)檢驗(yàn) （ 顯微鏡觀察 ） 、 萌發(fā)檢驗(yàn)等 。 ? 細(xì)菌類： 形態(tài)學(xué)檢驗(yàn) （ 顯微鏡觀察 ） 、 生化特性檢驗(yàn) 、 種子檢驗(yàn) 、 致病性測定等 。 ? 病毒類：隔離試種 、 鑒別寄主檢驗(yàn) 、 形態(tài)學(xué)檢驗(yàn) 。 ? 寄生蟲類：癥狀檢驗(yàn) 、 形態(tài)學(xué)檢驗(yàn) 。 ? 有害昆蟲類： 形態(tài)學(xué)檢驗(yàn) 。 2023/3/23 139 第八節(jié) 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測技術(shù) 五 、 真菌毒素的檢測 ?由真菌產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物統(tǒng)稱為 真菌毒素 。 ?真菌毒素 污染 一方面可引起糧食農(nóng)作物的病害和產(chǎn)品的腐敗變質(zhì) ， 使其喪失生產(chǎn)價(jià)值 、 食用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值；另一方面對人類和動物健康亦產(chǎn)生很大威脅 。 ?按真菌毒素的重要性及危害依次排列為 ：黃曲酶毒素 、 赭曲霉毒素 、 單端孢霉烯族毒素 、 玉米赤霉烯酮 。 ?真菌毒素具有 兩種毒性 ， 一是 DNA損傷 ， 有的可致癌；二是細(xì)胞毒性 ， 有破壞質(zhì)膜和細(xì)胞酶的作用 。 2023/3/23 140 第八節(jié) 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測技術(shù) 分析方法 ? 薄層色譜法 ：黃曲霉毒素 ? 高效液相色譜法 ：玉米赤霉烯酮 、 單端孢霉烯族毒素 ? 氣相色譜法 ：赭曲霉毒素 ? 免疫化學(xué)分析法 ：黃曲霉毒素 2023/3/23 141 第八節(jié) 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測技術(shù) 六 、 轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測技術(shù) ?轉(zhuǎn)基因植物 ：運(yùn)用重組 DNA技術(shù)將外源基因整合于受體植物基因組種 ， 改變其遺傳組成后產(chǎn)生的植物及其后代 ， 即為轉(zhuǎn)基因植物 。 2023/3/23 142 第八節(jié) 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測技術(shù) ? 轉(zhuǎn)基因生物的安全性包括兩方面 ：環(huán)境安全性 、 食品安全性 。 ? 環(huán)境安全性：轉(zhuǎn)基因植物演變成農(nóng)田雜草的可能性；基因