膠體金生產(chǎn)工藝配方原則(ppt78頁(yè))-資料下載頁(yè)
2025-02-15 16:29本頁(yè)面
【正文】 ： QS HLJ 64 ?嗜異性抗體 人類血清中含有能與嚙齒類動(dòng)物 (如鼠等 )Ig(s)結(jié)合的天然嗜異性抗體，易和包被和標(biāo)記的抗體產(chǎn)生反應(yīng)，能造成假陽性。 解決的辦法是：可在標(biāo)本稀釋液中加入過量的動(dòng)物 Ig(s)，但加入量不足或亞類不同時(shí)無效。 Made by： QS HLJ 65 ?醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠 Ig(s)抗體（嗜異性抗體的一種） 臨床開展的用鼠源性 CD3等克隆抗體治療，用放射性同位素標(biāo)記鼠源性抗體的影像診斷及靶向治療等新技術(shù)，均有可能使些病人體內(nèi)產(chǎn)生抗鼠抗體；另外，被鼠等嚙齒類動(dòng)物咬傷的病人體內(nèi)也可以產(chǎn)生抗鼠 Ig(s)抗體。 解決的方法是：測(cè)定抗原時(shí)，在標(biāo)本中加入足量的正常鼠 Ig(s)，從而克服由于上述原因造成的假陽性。 Made by： QS HLJ 66 例子： Sg采用了雙抗體夾心的方法進(jìn)行檢測(cè)，包被材料和標(biāo)記材料都是單克隆抗體，屬于鼠 IGg類別，由于人體經(jīng)常和動(dòng)物打交道，體內(nèi)易產(chǎn)生嗜異性抗體，如抗鼠抗體，抗牛抗體等等，這類嗜異性抗體極易導(dǎo)致假陽反應(yīng)的產(chǎn)生。 Made by： QS HLJ 67 為了消除嗜異性抗體的影響，可通過在樣品墊中加入正常的動(dòng)物血清或純化的鼠 IGg，又或者在膜上噴有鼠 IGg A線，金子中加有正常的動(dòng)物血清或純化的鼠 IGg等等方式將嗜異性抗體排斥在 T線前，消除這方面的假陽。 Made by： QS HLJ 68 ? 嗜靶抗原的自身抗體 抗甲狀腺球蛋白、抗胰島素等嗜靶抗原的自身抗體，有時(shí)能與靶抗原結(jié)合形成復(fù)合物，在 ELISA方法中均可干擾抗原抗體測(cè)定結(jié)果。 解決的辦法是：測(cè)定前需用理化方法將其解離后再測(cè)定。 Made by： QS HLJ 69 ?交叉反應(yīng)物質(zhì) 類地高辛、類 AFP樣物質(zhì)等，是與靶抗原有交叉反應(yīng)的物質(zhì)。在用多抗測(cè)定抗原時(shí)對(duì)測(cè)定結(jié)果影響不大，但在用單克隆抗體測(cè)定抗原時(shí)，如果交叉抗原測(cè)定簇正好是所用單克隆抗體相對(duì)的靶決定簇時(shí)，也會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果。 Made by： QS HLJ 70 抗凝劑和防腐劑的影響 ?抗凝劑 (如肝素、 EDTA、枸櫞酸鈉 )，防腐劑 (如 NaN3)因?yàn)閷?duì)離子和蛋白活性的影響，有時(shí)會(huì)導(dǎo)致假陽的產(chǎn)生。 Made by： QS HLJ 71 其他因素 ?血清脂質(zhì)過高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過高等，均對(duì)膠體金測(cè)定結(jié)果有干擾作用。 ?解決方法：表面活性劑及聚合物的使用，降低粘度，保證正常爬速。 Made by： QS HLJ 72 （二）假陰問題 Made by： QS HLJ 73 ?以上原因主要強(qiáng)調(diào)了膜和金子的影響，在膠體金反應(yīng)體系中，靜電作用力，疏水作用力，共價(jià)鍵起了關(guān)鍵的作用，假陰的產(chǎn)生，在體系里的每一個(gè)配方優(yōu)化中，需要充分考慮這幾個(gè)作用力，同時(shí)以和假陽相反的思路進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。 Made by： QS HLJ 74 提高靈敏度的一些方向 ①選用小孔徑的膜②減少封閉試劑 ： PEG等 Made by： QS HLJ 75 穩(wěn)定性問題 產(chǎn)品的穩(wěn)定性和配方、生產(chǎn)過程的溫濕度控制，物料穩(wěn)定性都有關(guān)系。 產(chǎn)品穩(wěn)定性試驗(yàn)和有效期的轉(zhuǎn)化 3年 2年 1年 70℃ 3~4個(gè)星期 2個(gè)星期 1個(gè)星期 60℃ 2個(gè)月 1個(gè)月 2個(gè)星期 50℃ 6個(gè)月 2~4個(gè)月 1個(gè)月 40℃ 1年 5~7個(gè)月 2~3個(gè)月 Made by： QS HLJ 76 提高穩(wěn)定性的一些思路 ①減少或者增加表面活性劑的量 ②減少或者增加聚合物 ③改變 Ph值或者 buffer ④ 增加或者減少糖的含量 ⑤在金子墊里改變糖的種類 Made by： QS HLJ 77 上樣問題和吸樣量的問題 ?使用親水材料才能加快速度和減少吸樣量，但上樣過快會(huì)帶來顯色偏淺等問題，需要慎重對(duì)待。 78
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