血吸蟲(chóng)病免疫診斷技術(shù)規(guī)范-資料下載頁(yè)
2025-02-11 12:34本頁(yè)面
【正文】 ? 5）器材： ? 1. 移液器 50μl、 200μl吸頭、吸頭盒及移液器架 ? 2. 實(shí)驗(yàn)記錄紙、記錄筆、記號(hào)筆。 6）被檢樣血清檢查，要求： 本方法對(duì)待檢血清要求高，要仔細(xì)檢查，詳見(jiàn)注意事項(xiàng)。 4 操作程序 1） 將試劑盒、試劑取出，置予室溫下平衡 2） 樣本編號(hào)：樣本編號(hào) 1～ n號(hào)，從左到右按 1～ n號(hào)排列，并作好記錄。 3） 取 n塊預(yù)處理空白反應(yīng)板 (含質(zhì)控點(diǎn) )放好并編號(hào)。 4） 按順序每次取 2塊板，依次在反應(yīng)孔中間位置加入 2滴洗滌液，待液體完全滲透 5） 依次在每塊板反應(yīng)孔正中間垂直加入 25μl新鮮特檢血清（對(duì)應(yīng)編號(hào)），待血清完全滲透。 ? （關(guān)健操作： 如沒(méi)完全滲透就加液可呈假陰性，但過(guò)干后再加液則呈假陽(yáng)性。 完全滲透的標(biāo)準(zhǔn)是膜上特別是孔周邊折光液體消失） 6） 依次在每塊板加入 2滴洗滌液，待液體完全滲透。 7） 依次在每塊板加入 4滴金標(biāo)抗體液，待液體完全滲透。 8） 依次在每塊板加入 2滴洗滌液，待液體完全滲透，觀察結(jié)果。 9） 按順序取下一輪 2塊板，同上進(jìn)行第 3和第 4份、第 5和第 6份、 …… 樣本檢測(cè)。 10） 樣品全部檢測(cè)完成后復(fù)查結(jié)果（但必須控制在 1小時(shí)內(nèi)），并記錄。 11）清理臺(tái)面，移液器調(diào)至最高檔。 5 結(jié)果判斷 判斷結(jié)果的時(shí)間應(yīng)以完成操作后，即時(shí)觀察為準(zhǔn)。部分品種在放置數(shù)小時(shí)或 1日后，結(jié)果會(huì)發(fā)生變化 ? 1）出現(xiàn)兩個(gè)紅色圓點(diǎn)為陽(yáng)性； ? 2）出現(xiàn)一個(gè)紅色圓點(diǎn)為陰性； ? 3）無(wú)圓點(diǎn)（呈白板狀）表示試劑失效或操作有誤，應(yīng)當(dāng)重新測(cè)試 6 注意事項(xiàng) ? 1）本試驗(yàn)對(duì)血清標(biāo)本要求高，最好應(yīng)用新鮮血清。測(cè)定血清標(biāo)本要求離心分離以消除血脂的影響 (4000轉(zhuǎn)／分， 15分鐘或 8000轉(zhuǎn) l／分， 5分鐘 )，不宜用未稍采血（塑料管法）樣本。吸取血清標(biāo)本時(shí)，應(yīng)避開(kāi)血脂、纖維蛋白或沉淀等，取其清亮透明部分。 ? 2）試劑盒從冰箱取出后應(yīng)恢復(fù)至室溫才能使用，試劑盒最佳使用溫度是 30～37℃ 。 ? 3）以 2個(gè)樣本為一批依次進(jìn)行操作。血清樣品加樣時(shí)，應(yīng)在反應(yīng)孔的正上方垂直加樣。 ? 4）待反應(yīng)板上的液體完全滲透后，立即加入下一種液體。既要防止?jié)B透不全，又須避免反應(yīng)膜干枯（是本試驗(yàn)操作的關(guān)鍵）。在加液時(shí)應(yīng)避免出現(xiàn)氣泡，尤其是金標(biāo)液。 ? 5）判斷結(jié)果以即時(shí)觀察為準(zhǔn)．若較長(zhǎng)期保存，將反應(yīng)板正面朝下放置即可。 ? 6）于 28℃ 冷藏保存，切勿冷凍應(yīng)當(dāng)避免強(qiáng)烈光照和高溫。檢測(cè)完畢后 ,未用的反應(yīng)板要立即放入自封袋中密閉冷藏。 七、移液器的使用規(guī)程 1 量程的調(diào)節(jié) ? 在調(diào)節(jié)量程時(shí)，逆時(shí)針或順時(shí)針按照正常的調(diào)節(jié)方法，旋轉(zhuǎn)旋鈕即可 。在該過(guò)程中， 千萬(wàn)不要將按鈕旋出量程 ，否則會(huì)卡住內(nèi)部機(jī)械裝置而損壞了移液槍。 2 槍頭 (吸液嘴 )的裝配 ? 方法是將移液槍 (器 )垂直插入槍頭中，稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動(dòng)即可使其緊密結(jié)合。如果是多道 (如 8道或 12道 )移液槍，則可以將移液槍的第一道對(duì)準(zhǔn)第一個(gè)槍頭，然后傾斜地插入，往前后方向搖動(dòng)即可卡緊。 3 移液的方法 ? 移液之前，要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。 ? 吸取液體時(shí)，移液器保持豎直狀態(tài)，將槍頭插入液面下 (浸入的深度為： PP100、 P200小于或等于 2毫米， P1000小于或等于 3毫米。 ? 在吸液之前，可以先吸放幾次液體以潤(rùn)濕吸液嘴 (尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時(shí) )。這時(shí)可以采取兩種移液方法。 ? 一是前進(jìn)移液法。用大拇指將按鈕按下至第一停點(diǎn)，然后慢慢松開(kāi)按鈕回原點(diǎn)。接著將按鈕按至第一停點(diǎn)排出液體，稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點(diǎn)吹出殘余的液體。最后松開(kāi)按鈕。 ? 二是反向移液法。此法一股用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體，其原理就是先吸入多于設(shè)置量程的液體，轉(zhuǎn)移液體的時(shí)候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二停點(diǎn)。慢慢松開(kāi)按鈕至原點(diǎn)。接著將按鈕按至第一停點(diǎn)排出設(shè)置好量程的液體，繼續(xù)保持按住按鈕位于第一停點(diǎn) (千萬(wàn)別再往下按 )，取下有殘留液體的槍頭，棄之。 4 常見(jiàn)的錯(cuò)誤操作 1)吸液時(shí)，移液器本身傾斜，導(dǎo)致移液不準(zhǔn)確 (應(yīng)該垂直吸液，慢吸慢放 )。 2)裝配吸頭時(shí)，用力過(guò)猛，導(dǎo)致吸頭難以脫卸 3)平放帶有殘余液體吸頭的移液器 (應(yīng)將移液器掛在移液器架上 )。 4)用大量程的移液器移取小體積樣品 (應(yīng)該選擇合適量程范圍的移液器 )。 5)直接按到第二檔吸液 (應(yīng)該按照上述標(biāo)準(zhǔn)方法操作 )。 6)卸去吸頭：卸掉的吸頭一定不能和新吸頭混放，以免產(chǎn)生交叉污染。 5 移液器 (移液槍 )維護(hù)保養(yǎng)時(shí)的注意事項(xiàng) 1） 如不使用，要把移液槍的量程調(diào)至最大值的刻度， 使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護(hù)彈簧。 2）最好定期清洗移液槍，可以用肥皂水或 60％的異丙醇，再用蒸餾水清洗，自然晾干。 3）高溫消毒之前，要確保移液器能適應(yīng)高溫。 4） 校準(zhǔn)是可以在 2025度環(huán)境中，通過(guò)重復(fù)幾次秤量蒸餾水的方法來(lái)進(jìn)行 。 5）使用時(shí)要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法是吸取液體后懸空垂直放置幾秒中，看看液面是否下降。如果漏液，原因大致有一下幾方面： 槍頭是否匹配； 彈簧活塞是否正常； 如果是易揮發(fā)的液體 (許多有機(jī)溶劑都如此 )，則可能是飽和蒸汽壓的問(wèn)題。可以先吸放幾次液體，然后再移液。 謝謝 ! 2023年 無(wú)錫 演講完畢，謝謝觀看！
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