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第八章動物實驗質(zhì)量控制-資料下載頁

2025-01-18 16:00本頁面
  

【正文】 因素與動物的營養(yǎng)狀況對研究結(jié)果的影響更大、更直接。 動物早期營養(yǎng)狀況 ?動物早期的營養(yǎng)對其后期的營養(yǎng)狀況有影響。動物妊娠和哺乳階段的營養(yǎng)水平不僅影響仔代斷奶前的生長發(fā)育,而且對其斷奶后的生長發(fā)育特別是營養(yǎng)狀況有影響,當(dāng)這種影響較嚴(yán)重時,即使以后給予充足的營養(yǎng)也無濟(jì)于事,造成不可逆的后果。 動物實驗時的營養(yǎng) ? 在動物體內(nèi),各種營養(yǎng)素之間存在非常復(fù)雜的關(guān)系,了解其關(guān)系對于營養(yǎng)研究至關(guān)重要。如維生素 D和鈣、磷之間密切相關(guān),鈣、磷之間也有密切關(guān)系。當(dāng)我們研究維生素 D的需要量時,要注意鈣、磷水平與鈣、磷比例。 動物日糧 ? 在與營養(yǎng)相關(guān)研究中,尤其是營養(yǎng)與免疫、營養(yǎng)與癌癥、營養(yǎng)與衰老的研究已成為熱點,動物日量的控制問題日益受到重視。如研究維生素 E與免疫功能的關(guān)系時,要注意控制日量中維生素 A、微量元素硒、錳等的水平。此外,動物日量的種類對實驗結(jié)果也有一定影響。 第七節(jié) 影響動物實驗效果的藥物因素 一、抗菌素 ? 某些抗菌素對實驗動物有毒性,普魯卡因?qū)﹄嗍?、兔和小鼠有毒性,用含有鹽酸普魯卡因的青霉素-雙氫鏈霉素給蒙古沙鼠注射后 2h,可引起急性中毒和死亡。 ? 許多抗菌素對免疫系統(tǒng)有關(guān)細(xì)胞的功能具有不良影響。如四環(huán)素類可抑制小鼠的遲發(fā)型超敏反應(yīng)和巨噬細(xì)胞的體內(nèi)趨化性。 ? 抗菌素還可對實驗結(jié)果造成影響。如經(jīng)常使用抗菌素可引起動物心血管功能變化,有些抗菌素不僅減弱心肌和動脈平滑肌的收縮力,而且改變其他藥物如去甲腎上腺素增強(qiáng)收縮力的作用。 ? 抗菌素還影響代謝,并由此影響其他物質(zhì)的毒性,或改變藥物動力學(xué)。如氯霉素抑制肝臟微粒體酶,從而影響通過肝臟微粒體酶系統(tǒng)代謝的藥物,如巴比妥類麻醉劑的藥效。 二、麻醉劑和鎮(zhèn)靜劑 ? 麻醉劑對動物本身可有毒性,或可能增強(qiáng)其他藥物的毒性。 ? 麻醉劑對心血管功能的影響已有許多研究。如戊巴比妥和氟烷可通過依賴鈣的生化過程,而直接影響心肌和血管平滑肌,并影響平滑肌對被試藥物的敏感性及實驗結(jié)果。 ? 麻醉劑還會影響免疫功能。如氟烷在血中達(dá)到一定濃度時,會減弱大鼠淋巴細(xì)胞對致有絲分裂原的應(yīng)答;氟烷還有降低趨化性、減弱吞噬作用、改變淋巴細(xì)胞代謝活性作用。某些麻醉劑還可能影響腫瘤轉(zhuǎn)移手術(shù)后的轉(zhuǎn)歸。 一、分組 ? 實驗分組應(yīng)當(dāng)隨機(jī)而不是隨意。記錄及報告中,應(yīng)說明采用什么隨機(jī)分組方法。要設(shè)立空白對照組,以排除非實驗因素帶來的影響。還要注意溶媒或其他賦形劑等的影響,亦須設(shè)立相應(yīng)的對照組進(jìn)行比較。 二 .實驗藥物 ? 動物實驗中常常需要給動物體內(nèi)注入各種藥物以觀察其作用和變化。因此給藥的途徑、制劑是影響實驗中很重要的問題。 ? 藥物的濃度和劑量也是一個重要問題,劑量設(shè)計是否合理是實驗成功與否的關(guān)鍵。動物和人用藥劑量的換算以體表面積計算比以體重?fù)Q算好一些。 第八節(jié) 影響動物實驗結(jié)果的實驗設(shè)計 及實施因素 三、 給藥時間 ? 動物試驗的給藥時間應(yīng)當(dāng)一致。一是可比性強(qiáng),二是避免錯誤,而影響其他藥理試驗甚至臨床用藥。 四、 試驗周期 ? 急性毒性試驗給藥后至少觀察 1周,有的要觀察 2周或更長時間。 五、 動物實驗環(huán)境 ? 應(yīng)符合國家及地方的標(biāo)準(zhǔn),并保持穩(wěn)定。環(huán)境溫度對藥物的 LD50影響較大。 六、 資料記錄 ? 毒性試驗過程要做好觀察記錄,特別要詳細(xì)記錄中毒癥狀,尤其中毒發(fā)生時間、持續(xù)時間和恢復(fù)時間,或死亡時間等。 七、 剖檢 ? 對急性毒性( 7或 14d后)存活的實驗動物要稱量體重,尤其是低劑量組動物,以了解中毒效應(yīng)是短暫還是較長期的效應(yīng)。對死亡動物應(yīng)及時剖檢,觀察組織器官有無充血、出血、水腫或其他改變。肉眼觀察有明顯改變者,應(yīng)作病理鏡檢。 八、 評價 ? 同種實驗動物測定 LD50時,不同給藥途徑的 LD50值大小次序為,口服>肌肉注射、皮下注射>腹腔注射>靜脈注射,但也有少數(shù)藥物例外。因此對具體藥物要具體分析。 九、 關(guān)于最大限度試驗 ? 我國新藥審批辦法關(guān)于急性毒性試驗未提最大限度試驗,而有最大耐受劑量( MTD),這比較符合實際。并且規(guī)定,如果口服大于 5g/kg,或注射大于 2g/kg均不產(chǎn)生急性毒性癥狀或死亡,就不必做進(jìn)一步試驗。當(dāng)然這不適用于中藥及某些西藥復(fù)方制劑,更不能依此作為長期毒性限度試驗的依據(jù)。 第九節(jié) 影響動物實驗效果的 動物實驗技術(shù)環(huán)節(jié)因素 一、 動物選擇 ? 應(yīng)按照不同實驗的要求選擇合適的動物。如作腫瘤的研究工作,就必須了解哪種動物是高癌種,哪種是低癌種,各種動物自發(fā)性腫瘤的發(fā)生率是多少。 二、實驗季節(jié) ? 生物體的許多功能隨著季節(jié)產(chǎn)生規(guī)律性的變動。如,不同季節(jié)對輻射效應(yīng)有影響。 三、晝夜過程 ?人和動物的生命活動存在晝夜規(guī)律性變動。研究發(fā)現(xiàn):小鼠、大鼠和猴等動物的血液成分如白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白、單核細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞與血液生化值,普遍存在日夜節(jié)律,部分參數(shù)具有 24小時周期性。 ?抗病力和易感性也可能存在日夜節(jié)律。 ?動物對照射的敏感性在晝夜間有不同的變化,白天放射敏感性降低,夜間升高。 ?體溫、血糖、基礎(chǔ)代謝率、內(nèi)分泌激素的分泌均發(fā)生晝夜節(jié)律性變化 。 四、麻醉深度 ? 動物實驗中往往需要將動物麻醉后才能進(jìn)行各種手術(shù)和實驗。要求麻醉深度要適度,而且在整個實驗過程中要保持始終恒定。如果麻醉過深,動物處于深度的抑制,甚至瀕死狀態(tài),動物各種正常反應(yīng)受到抑制,那是不會做出可靠的實驗結(jié)果的。麻醉過淺,在動物身上進(jìn)行手術(shù)或?qū)嶒?,將會引起?qiáng)烈的疼痛的刺激,使動物全身,特別是呼吸、循環(huán)功能發(fā)生改變,消化功能也會發(fā)生改變,如疼痛刺激會反射性地長時間中止胰腺的分泌。所以麻醉深度必須合適。 五、手術(shù)技巧 ? 手術(shù)熟練可以減少對動物的刺激,動物受的創(chuàng)傷、出血等就少,將會提高實驗成功率和實驗結(jié)果的正確性。 六、對照問題 ? 一般對照的原則是“齊同對比”。對照方法很多,有空白對照、實驗對照 `、有效(或標(biāo)準(zhǔn))對照、配對對照、組間對照、歷史對照以及正常值對照等。 ? 1. 空白對照是在不給任何措施情況下觀察動物自發(fā)變化的規(guī)律,以排除非實驗因素帶來的影響。 ? 2. 實驗對照是采用與實驗組相同操作條件的對照,如給藥實驗中的溶媒或其它賦形劑、手術(shù)、注射以及觀察撫摸等都可以對動物發(fā)生影響。 ? 3. 有效(或標(biāo)準(zhǔn))對照:常用于藥物研究。對一新藥的療效要用一已知的有效藥或能引起標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)的藥物做對照,這樣既可考核實驗方法的可靠性,又可通過比較了解新藥的療效和特點。 ? 4. 配對對照:是同一個體在前后不同時間比較對照期和實驗期的差異,或同一個體的左右兩部分作對照處理和實驗處理的差異,這樣可大大減少抽樣誤差。 ? 5. 組間對照:是將實驗對象分成兩組或幾組比較其差異。這種對照個體差異和抽樣誤差比較大。組間對照可用交叉對照方法以減少誤差。 ? 6. 歷史對照與正常值對照 這種對照要十分慎重,必須要條件、背景、指標(biāo)、技術(shù)方法相同才可進(jìn)行對比,否則將會得出不恰當(dāng)?shù)纳踔铃e誤的結(jié)論。 ? 7. 實驗重復(fù)和肯定 選用動物一方面要數(shù)量合適,不造成浪費,另一方面也應(yīng)做必要的重復(fù)實驗。有些實驗單做一種動物還不夠,應(yīng)當(dāng)重復(fù)做幾種動物。 ? 由于不同種屬動物有不同的功能和代謝特點,所以在肯定一個實驗結(jié)果時最好采用兩種以上的動物進(jìn)行比較觀察,其中一種應(yīng)該是非嚙齒類動物。尤其是動物實驗結(jié)果要外推到人的實驗,所選用的動物品種應(yīng)不少于 3種,而且其中之一不應(yīng)是嚙齒類動物。常用的生物序列是小鼠 大鼠狗(或猴)。 謝謝! 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH
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