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發(fā)酵工程02第二章發(fā)酵菌種選育-資料下載頁

2025-01-18 13:39本頁面
  

【正文】 接測定最初分離物的生物活性,能加速篩選過程。 五、檢測系統(tǒng) ? 篩選過程的成功依賴于排除那些已知的或并非需要的代謝產(chǎn)物的檢驗方法,這樣才能識別出人們需要的化合物。 性能簽別 ? 性能鑒別是分離和篩選微生物代謝產(chǎn)物中最基礎的工作。 ? 鑒別可分為兩方面: 一是對微生物方面進行形態(tài)、培養(yǎng)、生化功能答試驗觀察,并確定微生物產(chǎn)生菌的類群; ? 二是從化學的早期鑒別來鑒別微生物的代謝產(chǎn)物。化學的早期鑒別一般對產(chǎn)生菌所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物進行紙上層析、薄板層析、紙上電泳、抗菌譜、高壓電泳、紫外分光光度法、液相和氣相色譜等試驗,井獲得各種圖譜,與已知圖譜進行比較鑒別。 薄板層析結果? 如果認為是有實用前途的代謝產(chǎn)物,則要進一步大量培養(yǎng),并進行動物試驗、毒性考查、藥物代謝等實驗,并進行提高發(fā)酵水平和改善提取工藝的工作,以備投入生產(chǎn)。? 如果是新的代謝產(chǎn)物.一般要進一步確定其化學結構,井在此基礎上進行合成法的研究或進行化學改造,研究結構與生物活性的相互關系,并對作用機制、生物合成過程作進一步的研究。 菌種篩選方法 ? 誘變處理后,突變細胞只占存活細胞的百分之幾,而能使生產(chǎn)狀況提高的細胞又只是突變細胞中的少數(shù)。? 為了花費最少的工作量,在最短的時間內(nèi)取得最大的篩選成效,就要求采用效率較高的科學篩選方案和手段。菌種篩選方案 ? 初篩:目的是刪去明確不符合要求的大部分菌株,把生產(chǎn)性狀類似的菌株盡量保留下來,使優(yōu)良菌種不致于漏網(wǎng)。初篩工作以量為主,測定的精確性還在其次。初篩的手段應盡可能快速、簡單。? 復篩的目的是確認符合生產(chǎn)要求的菌株,所以,復篩步驟以質為主,應精確測定每個菌株的生產(chǎn)指標。 菌種篩選的手段 ? 初篩? 從菌體形態(tài)變異分析 ? 平皿快速檢測法 具體的有紙片培養(yǎng)顯色法、變色圈法、透明圈法、生長圈法和抑制圈法等 ? 搖瓶培養(yǎng)法搖瓶培養(yǎng)法也可用于初篩。 初篩的搖瓶培養(yǎng)一般是一個菌株只做一次發(fā)酵測定,從大量菌株中選出 1020%較好的菌株,淘汰8090%的菌株;而復篩中搖瓶培養(yǎng)一般是一個菌株培養(yǎng) 3瓶,選出 35個較好的菌株,再做進一步比較,選出最佳的菌株 。 特殊變異菌的篩選方法 營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選 經(jīng)誘變處理后的菌懸液在篩選前一般應先進行誘變后培養(yǎng),以促使變異細胞發(fā)生分離,防止出現(xiàn)表型延遲現(xiàn)象,篩選出不純的菌株。營養(yǎng)缺陷型的篩選一般包括濃縮、進一步檢出和鑒別營養(yǎng)缺陷型等步驟。 ? 抗性突變菌株的篩選 抗性突變株的篩選相對比較容易,只要有 106頻率的突變體存在,就容易篩選出來。抗性突變株的篩選常用的有一次性篩選法和階梯性篩選法兩種手段。 一次性篩選法 噬菌體抗性菌株、耐高溫菌株 階梯性篩選法藥物抗性突變株。 ? 組成酶變異株的篩選 許多水解酶是誘導酶,只有在含有底物或底物類似物的培養(yǎng)環(huán)境中,微生物才會合成這些酶類,所以,誘導酶的生產(chǎn)不僅需要誘導物,而且受到誘導物的種類、數(shù)量以及分解產(chǎn)物的影響。 具體的篩選方法有恒化器法、循環(huán)培養(yǎng)法和誘導抑制物法。 ? 1)恒化器法:常被用于微生物的 “馴化 ”。在培養(yǎng)基中添加不能起誘導作用的低濃度底物,菌生長速率極慢,而群體中少數(shù)組成型變異株則可合成有關的酶,分解利用該底物,生長速率較快。? 為了提高組成酶變異株的優(yōu)勢,即它在群體中的比例,可以應用恒化器培養(yǎng)技術。隨著恒化器培養(yǎng)中不斷加入新鮮基質而逐漸增大組成酶變異株的優(yōu)勢,這樣就能夠比較容易地做進一步的純化分離。 ? 2) 循環(huán)培養(yǎng)法:利用不含誘導物的培養(yǎng)環(huán)境和含有誘導物的培養(yǎng)環(huán)境進行交替循環(huán)培養(yǎng)待分離的菌懸液,從而使組成酶變異株得到富集。? 當接種到不含誘導物而含有其它可利用碳源的培養(yǎng)基中時,兩種類型菌株同樣能較好地生長,但在此環(huán)境中組成型突變株已能合成有關的水解酶,而誘導型菌株就不能合成。? 將它們轉接入含誘導物的培養(yǎng)基中時,變異株能迅速利用誘導底物進行生長繁殖,而誘導型出發(fā)菌株需經(jīng)歷一個誘導合成酶的階段,兩類菌株的生長就不同步,組成酶變異株所占的比例將逐漸增大。? 3)誘導抑制劑法:有些化合物能阻止某些誘導酶的合成,當在誘導物和誘導抑制劑同時存在的培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)待分離菌群時,誘導型菌株不能產(chǎn)生誘導酶,無法正常生長,只有組成型變異株能夠利用底物進行生長繁殖。 ? 靜夜四無鄰,荒居舊業(yè)貧。 三月 21三月 21Thursday,March11,2023? 雨中黃葉樹,燈下白頭人。 16:20:1816:20:1816:203/11/20234:20:18PM? 1以我獨沈久,愧君相見頻。 三月 2116:20:1816:20Mar2111Mar21? 1故人江海別,幾度隔山川。 16:20:1816:20:1816:20Thursday,March11,2023? 1乍見翻疑夢,相悲各問年。 三月 21三月 2116:20:1816:20:18March11,2023? 1他鄉(xiāng)生白發(fā),舊國見青山。 11三月 20234:20:18下午 16:20:18三月 21? 1比不了得就不比,得不到的就不要。 。 三月 214:20下午 三月 2116:20March11,2023? 1行動出成果,工作出財富。 2023/3/1116:20:1816:20:1811March2023? 1做前,能夠環(huán)視四周;做時,你只能或者最好沿著以腳為起點的射線向前。 4:20:18下午 4:20下午 16:20:18三月 21? 沒有失敗,只有暫時停止成功!。 三月 21三月 21Thursday,March11,2023? 很多事情努力了未必有結果,但是不努力卻什么改變也沒有。 16:20:1816:20:1816:203/11/20234:20:18PM? 1成功就是日復一日那一點點小小努力的積累。 三月 2116:20:1816:20Mar2111Mar21? 1世間成事,不求其絕對圓滿,留一份不足,可得無限完美。 16:20:1816:20:1816:20Thursday,March11,2023? 1不知香積寺,數(shù)里入云峰。 三月 21三月 2116:20:1816:20:18March11,2023? 1意志堅強的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 11三月 20234:20:18下午 16:20:18三月 21? 1楚塞三湘接,荊門九派通。 。 三月 214:20下午 三月 2116:20March11,2023? 1少年十五二十時,步行奪得胡馬騎。 2023/3/1116:20:1816:20:1811March2023? 1空山新雨后,天氣晚來秋。 4:20:18下午 4:20下午 16:20:18三月 21? 楊柳散和風,青山澹吾慮。 三月 21三月 21Thursday,March11,2023? 閱讀一切好書如同和過去最杰出的人談話。 16:20:1816:20:1816:203/11/20234:20:18PM? 1越是沒有本領的就越加自命不凡。 三月 2116:20:1816:20Mar2111Mar21? 1越是無能的人,越喜歡挑剔別人的錯兒。 16:20:1816:20:1816:20Thursday,March11,2023? 1知人者智,自知者明。勝人者有力,自勝者強。 三月 21三月 2116:20:1816:20:18March11,2023? 1意志堅強的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 11三月 20234:20:18下午 16:20:18三月 21? 1最具挑戰(zhàn)性的挑戰(zhàn)莫過于提升自我。 三月 214:20下午 三月 2116:20March11,2023? 1業(yè)余生活要有意義,不要越軌。 2023/3/1116:20:1816:20:1811March2023? 1一個人即使已登上頂峰,也仍要自強不息。 4:20:18下午 4:20下午 16:20:18三月 21MOMODA POWERPOINTLorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Fusce id urna blandit, eleifend nulla ac, fringilla purus. Nulla iaculis tempor felis ut cursus. 感謝您的下載觀看專 家告
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