食品中大腸菌群的檢驗(yàn)-資料下載頁(yè)
2025-01-16 18:10本頁(yè)面
【正文】 1 mL生理鹽水加入無(wú)菌平皿作空白對(duì)照。3）及時(shí)將 15 mL～ 20 mL冷至 46 ℃ 的結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂（ VRBA）約傾注于每個(gè)平皿中。小心旋轉(zhuǎn)平皿，將培養(yǎng)基與樣液充分混勻，待瓊脂凝固后，再加 3 mL～ 4 mLVRBA覆蓋平板表層。翻轉(zhuǎn)平板，置于 36 ℃ 177。1 ℃ 培養(yǎng)18 h～ 24 h。實(shí)驗(yàn)步驟及操作要點(diǎn)：4）平板菌落數(shù)的選擇 選取菌落數(shù)在 15 CFU～ 150 CFU 之間的平板，分別計(jì)數(shù)平板上出現(xiàn)的典型和可疑大腸菌群菌落。典型菌落為紫紅色，菌落周?chē)屑t色的膽鹽沉淀環(huán)，菌落直徑為 mm 或更大。5）證實(shí)試驗(yàn) 從 VRBA 平板上挑取 10 個(gè)不同類(lèi)型的典型和可疑菌落，分別移種于 BGLB 肉湯管內(nèi)， 36 ℃ 177。1 ℃ 培養(yǎng) 24 h～ 48 h，觀察產(chǎn)氣情況。凡 BGLB 肉湯管產(chǎn)氣，即可報(bào)告為大腸菌群陽(yáng)性。6）大腸菌群平板計(jì)數(shù)的報(bào)告 經(jīng)最后證實(shí)為大腸菌群陽(yáng)性的試管比例乘以 4）中計(jì)數(shù)的平板菌落數(shù)，再乘以稀釋倍數(shù)，即為每 g（ mL）樣品中大腸菌群數(shù)。例： 104樣品稀釋液 1 mL，在 VRBA平板上有 100個(gè)典型和可疑菌落，挑取其中 10個(gè)接種 BGLB肉湯管，證實(shí)有 6個(gè)陽(yáng)性管，則該樣品的大腸菌群數(shù)為： 1006/10104/g（ mL） =105CFU/g（ mL）。 三 大腸菌群 PetrifilmTM測(cè)試紙片法四、美國(guó) FDA標(biāo)準(zhǔn)方法 —— 行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)采用兩步法：用于對(duì)出口食品中大腸菌群進(jìn)行檢驗(yàn) 推測(cè)試驗(yàn) 證實(shí)試驗(yàn)樣品稀釋后，選擇三個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度接種三管LST肉湯發(fā)酵管。 36177。1℃ 培養(yǎng) 48177。2h，觀察是否產(chǎn)氣。 將產(chǎn)氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于煌綠乳糖膽鹽（ BGLB）肉湯中， 36177。 1℃ 培養(yǎng) 48177。2h ， 觀察是否產(chǎn)氣 。以 BGLB產(chǎn)氣為陽(yáng)性，查 MPN表，報(bào)告每 ml（ g）樣品中大腸菌群的 MPN值。 思考題1．大腸菌群的檢驗(yàn)分哪幾個(gè)步驟？各有何作用？2．在糖發(fā)酵試驗(yàn)中，若發(fā)現(xiàn)發(fā)酵倒管內(nèi)存在極微小的氣泡，這種情況可否算作產(chǎn)氣陽(yáng)性？3．造成本實(shí)驗(yàn)誤差的主要原因有哪些？演講完畢，謝謝觀看
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