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dna重組技術(shù)的基本步驟(ppt61頁)-資料下載頁

2025-01-08 02:16本頁面
  

【正文】 感受態(tài)細(xì)胞 → 重組表達(dá)載體 DNA分子與感受態(tài)細(xì)胞混合 → 感受態(tài)細(xì)胞吸收 DNA分子。 增加細(xì)胞壁的透性,與細(xì)胞膜無關(guān) 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 轉(zhuǎn)化 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 基因槍法 花粉管通道法 顯微注射技術(shù) Ca2+處理 植物基因工程 動(dòng)物基因工程 微生物基因工程 常用方法 受體細(xì)胞 比較目的基因?qū)氩煌?xì)胞的方法 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 顯微注射法 Ca2+處理法 體細(xì)胞 受精卵 原核細(xì)胞 基因工程中科學(xué)家常用細(xì)菌、酵母菌等微生物作為受體細(xì)胞,原因是 A.結(jié)構(gòu)簡單、操作方便 B.繁殖速度快 C.遺傳物質(zhì)含量少、簡單 D.性狀穩(wěn)定、變異少 基因工程常用的受體細(xì)胞有 ①大腸桿菌 ②枯草桿菌 ③支原體 ④動(dòng)植物細(xì)胞 A.①②③④ B.①②③ C.②③④ D.①②④ B D 導(dǎo)入目的基因后需要檢測哪些方面?各采取什么方法? 什么是 DNA分子探針?檢測時(shí)的 DNA探針通過什么原理來檢測目的基因和相應(yīng)的 mRNA? 利用抗體-抗原雜交檢測的原理是什么? 檢測內(nèi)容 檢測方法 體細(xì)胞染色體的 DNA上 mRNA 蛋白質(zhì) 個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定 分子雜交技術(shù) 抗原 — 抗體雜交 DNA分子雜交技術(shù) 抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等 DNA探針: 用放射性同位素等作標(biāo)記的含有目的基因的 DNA片段。 (一)、檢測 檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的 DNA上是否插入了目的基因 (關(guān)鍵步驟 ) ① .首先取出轉(zhuǎn)基因生物的基因組 DNA ② .用含目的基因的 DNA片段用放射性同位素等作標(biāo)記 ,以此做探針 ③ .使探針和轉(zhuǎn)基因生物的基因組雜交 ,若顯示出雜交帶 ,表明染色體已插入染色體 DNA中 ( 1) 方法 : DNA分子雜交 ( 2)過程 : DNA分子雜交示意圖 采用一定的技術(shù)手段,將兩種生物的 DNA分子的單鏈放在一起,如果這兩個(gè)單鏈具有互補(bǔ)的堿基序列,那么,互補(bǔ)的堿基序列就會(huì)結(jié)合在一起,形成雜合雙鏈區(qū);在沒有互補(bǔ)堿基序列的部位,仍然是兩條游離的單鏈。 P15思考與探究 (二)、鑒定(個(gè)體生物學(xué)水平) 檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA 檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等 ① 方法 : 分子雜交法 方法 : 抗原抗體雜交 ② 過程 : 用上述探針和轉(zhuǎn)基因生物的 mRNA雜交 ,若出現(xiàn)雜交帶 ,表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了 mRNA 目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性,只有通過鑒定和檢測才能知道。下列屬于目的基因檢測和鑒定的是 ①檢測受體細(xì)胞中是否有目的基因 ②檢測受體細(xì)胞中是否有致病基因 ③檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出 mRNA ④ 檢測目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì) A.①②③ B.②③④ C.①③④ D.①②④ C 基因工程是在 DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的,在基因操作的基本步驟中,不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的步驟是 C 歸納 : 基因工程的基本操作程序 1. 獲取目的基因 ? 從基因文庫 ? 利用 PCR ? 化學(xué)方法人工合成 2. 構(gòu)建基因表達(dá)載體 ? 目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因 3. 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 ? 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、顯微注射法、 Ca2+處理 4. 目的基因的檢測與鑒定 ? 檢測:是否插入、轉(zhuǎn)錄、翻譯 ? 鑒定: 演講完畢,謝謝觀看!
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