【正文】 去并不對細(xì)胞來說，本身是否能持續(xù)分裂克隆下去并不重要，而是分化成熟的細(xì)胞將背負(fù)更重大的使命重要，而是分化成熟的細(xì)胞將背負(fù)更重大的使命，就是讓組織器官運(yùn)作，使生命延續(xù)，但不是永，就是讓組織器官運(yùn)作，使生命延續(xù)，但不是永續(xù)，這種世代交替的輪回即是造物者對于生命設(shè)續(xù)，這種世代交替的輪回即是造物者對于生命設(shè)計的巧思。計的巧思。? 端粒酶存在于絕大部分正常人體細(xì)胞，但端粒酶存在于絕大部分正常人體細(xì)胞，但在腫瘤細(xì)胞中廣泛表達(dá)，提示它可能為惡在腫瘤細(xì)胞中廣泛表達(dá)，提示它可能為惡性腫瘤細(xì)胞無限增殖所必需。抑制端粒酶性腫瘤細(xì)胞無限增殖所必需。抑制端粒酶的活力，將有可能阻止腫瘤細(xì)胞惡性增殖的活力，將有可能阻止腫瘤細(xì)胞惡性增殖；因此，端粒酶抑制劑有望成為一種高效；因此，端粒酶抑制劑有望成為一種高效低毒的新型抗腫瘤藥低毒的新型抗腫瘤藥 .? 端粒酶抑制劑研究策略：端粒酶抑制劑研究策略：? ①① 針對端粒酶針對端粒酶 RNA組分組分 hTER或催化亞基或催化亞基 hTERT的的 mRNA設(shè)計反義核苷酸；設(shè)計反義核苷酸；? ②② 用小分子化合物抑制用小分子化合物抑制 hTERT的活性中心；的活性中心；? ③③ 破壞底物破壞底物 端粒的結(jié)構(gòu)，如破壞端粒的鳥嘌呤四端粒的結(jié)構(gòu)，如破壞端粒的鳥嘌呤四聚體；聚體；? ④④ 針對其他一些未知相關(guān)蛋白干擾酶和底物的結(jié)針對其他一些未知相關(guān)蛋白干擾酶和底物的結(jié)合；合；? ⑤⑤ 利用端粒酶間接抑制劑調(diào)控端粒酶的活力，如利用端粒酶間接抑制劑調(diào)控端粒酶的活力，如蛋白激酶蛋白激酶 C抑制劑、腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)分化劑等。抑制劑、腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)分化劑等。?? 最近幾年來端粒酶抑制劑最近幾年來端粒酶抑制劑? 1)反義核苷酸、反義肽苷酸、硫代反義核苷酸對端粒酶活性的抑制反義核苷酸、反義肽苷酸、硫代反義核苷酸對端粒酶活性的抑制? 1．． 1反義核苷酸反義核苷酸? 　　反義核苷酸是能抑制基因表達(dá)的　　反義核苷酸是能抑制基因表達(dá)的 RNA，它能與靶細(xì)胞的，它能與靶細(xì)胞的 DNA互補(bǔ)互補(bǔ)形成雙鏈而抑制靶基因的表達(dá)形成雙鏈而抑制靶基因的表達(dá)? 1．． 2反義肽苷酸反義肽苷酸? 　　反義肽苷酸　　反義肽苷酸 (peptidenucleicaids,PNAs)是一種多肽骨架的核酸是一種多肽骨架的核酸模擬物，具有與天然模擬物，具有與天然 DNA相似結(jié)構(gòu)特征。相似結(jié)構(gòu)特征。 PNAs通過通過 Watson?? Crick原原則與則與 DNA/RNA結(jié)合，且不易被核酶和蛋白酶降解，有望成為良好的結(jié)合，且不易被核酶和蛋白酶降解，有望成為良好的抗癌藥物。抗癌藥物。? 1．． 3硫代反義核苷酸硫代反義核苷酸? 　　硫代反義核苷酸　　硫代反義核苷酸 (phosphorothioateoligonucleotid,Ps?? OND)是是具有與哺乳動物端粒序列相同的具有與哺乳動物端粒序列相同的 539。?? d(TTAGGG)?? 339。序列。它可以抑序列。它可以抑制端粒酶的活性，用于腫瘤的治療。制端粒酶的活性，用于腫瘤的治療。? 2)核苷類似物對端粒酶活性的抑制核苷類似物對端粒酶活性的抑制? 逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，如逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，如 AZT(3′?? Azido?? 2′,　　3′?? dideoxythymidine)、 AZT?? TP(AZT?? 5?? triphosphate)、 5?? AZA?? CR(5?? azacytidine)、 ddl(dideoxyinosine)、ddT［［ 1,1,1?? trichloro?? 2,2?? bis(4?? chlorophenyl)ethane］］等來抑制端粒酶活性，使其不能保護(hù)染色體末端而使細(xì)胞等來抑制端粒酶活性，使其不能保護(hù)染色體末端而使細(xì)胞凋亡來達(dá)到治療腫瘤的目的。凋亡來達(dá)到治療腫瘤的目的。? 3)細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑對端粒酶活性的抑制細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑對端粒酶活性的抑制? 正常人類細(xì)胞經(jīng)過分化，端粒酶活性受到抑制。是否永生正常人類細(xì)胞經(jīng)過分化，端粒酶活性受到抑制。是否永生化的腫瘤細(xì)胞也可以通過誘導(dǎo)分化抑制端粒酶活性來達(dá)到化的腫瘤細(xì)胞也可以通過誘導(dǎo)分化抑制端粒酶活性來達(dá)到治療的目的呢？治療的目的呢？? hTERT是端粒酶活性的重要決定因素。從而證明細(xì)胞分化是端粒酶活性的重要決定因素。從而證明細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑通過抑制誘導(dǎo)劑通過抑制 hTERT轉(zhuǎn)錄而降低端粒酶活性。目前已用轉(zhuǎn)錄而降低端粒酶活性。目前已用到的誘導(dǎo)分化劑主要有：全反式維甲酸、１，到的誘導(dǎo)分化劑主要有：全反式維甲酸、１， 25?? 二羥維二羥維生素生素 D二甲亞砜、丁酸等。、二甲亞砜、丁酸等。(4)（（ ribozyme）是一類具有酶活性的反義）是一類具有酶活性的反義 RNA，除特意封閉靶基因除特意封閉靶基因 RNA外，同時具有切割靶外，同時具有切割靶 RNA的作用，使其降解而失去生物學(xué)功能。由于端粒的作用，使其降解而失去生物學(xué)功能。由于端粒酶的催化亞單位酶的催化亞單位 hTERT決定端粒酶的活性，而決定端粒酶的活性，而hTERTmRNA是拳頭型核酶極好的作用靶點(diǎn)。是拳頭型核酶極好的作用靶點(diǎn)。 ? (5)其他藥物對端粒酶活性的抑制其他藥物對端粒酶活性的抑制 ? 　　某些兒茶酸　　某些兒茶酸 EGCG(epigallocatechingallate)具有強(qiáng)而直接抑制人成單核細(xì)胞白血病具有強(qiáng)而直接抑制人成單核細(xì)胞白血病 U937細(xì)胞細(xì)胞和人直腸癌和人直腸癌 UT29細(xì)胞的端粒酶活性。細(xì)胞外多糖細(xì)胞的端粒酶活性。細(xì)胞外多糖GA3(GymnodiniumspA3)在在 白血病細(xì)胞系白血病細(xì)胞系 K562顯示細(xì)胞毒性，使其端粒酶活顯示細(xì)胞毒性，使其端粒酶活性降低。性降低。? 進(jìn)一步研究進(jìn)一步研究 :? (1)阻斷端粒酶復(fù)合物的組裝和轉(zhuǎn)運(yùn)過程，包括阻阻斷端粒酶復(fù)合物的組裝和轉(zhuǎn)運(yùn)過程，包括阻斷斷 SnRNA在細(xì)胞核內(nèi)的轉(zhuǎn)錄，在細(xì)胞核內(nèi)的轉(zhuǎn)錄， RNA的修飾、加工的修飾、加工、轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞質(zhì)并與蛋白質(zhì)組裝，再返回細(xì)胞核、轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞質(zhì)并與蛋白質(zhì)組裝，再返回細(xì)胞核的各步驟。的各步驟。 (2)阻斷端粒阻斷端粒 DNA與端粒酶活性位點(diǎn)的與端粒酶活性位點(diǎn)的結(jié)合。結(jié)合。 (3)通過對端粒酶活性細(xì)胞內(nèi)調(diào)節(jié)機(jī)制的調(diào)通過對端粒酶活性細(xì)胞內(nèi)調(diào)節(jié)機(jī)制的調(diào)空阻斷端粒酶活性，如空阻斷端粒酶活性，如 p5 p2 cmyc、 sp1基基因等。因等。 (4)阻斷端粒酶蛋白催化亞基的功能。阻斷端粒酶蛋白催化亞基的功能。 (5)制制備突變端粒酶備突變端粒酶 RNA與內(nèi)原性與內(nèi)原性 RNA競爭端粒酶蛋白競爭端粒酶蛋白。 (6)端粒酶蛋白組分抑制劑。端粒酶蛋白組分抑制劑。 (7)端粒酶細(xì)胞周期端粒酶細(xì)胞周期依賴性調(diào)節(jié)。依賴性調(diào)節(jié)。? 存在一些問題：存在一些問題： (1)正常人類生殖細(xì)胞、表皮細(xì)胞、腸黏膜正常人類生殖細(xì)胞、表皮細(xì)胞、腸黏膜基底干細(xì)胞等具有再生能力的細(xì)胞中，均可檢測到不同水基底干細(xì)胞等具有再生能力的細(xì)胞中，均可檢測到不同水平端粒酶活性的表達(dá)，端粒酶活性抑制劑能否對這些細(xì)胞平端粒酶活性的表達(dá)，端粒酶活性抑制劑能否對這些細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用還需考慮。產(chǎn)生毒性作用還需考慮。 (2)部分腫瘤細(xì)胞具有較長端粒部分腫瘤細(xì)胞具有較長端粒(10kb)，隨著有絲分裂進(jìn)行，端?？s短是個緩慢過程，隨著有絲分裂進(jìn)行，端粒縮短是個緩慢過程，在此情況下，端粒酶抑制劑是否有效？在此情況下，端粒酶抑制劑是否有效？ (3)人類細(xì)胞中可人類細(xì)胞中可能還存在不依賴端粒酶的端粒替代途徑，端粒酶抑制劑能能還存在不依賴端粒酶的端粒替代途徑，端粒酶抑制劑能否導(dǎo)致所有腫瘤細(xì)胞死亡還有待證實(shí)？否導(dǎo)致所有腫瘤細(xì)胞死亡還有待證實(shí)？ (4)人類腫瘤細(xì)胞人類腫瘤細(xì)胞中亦有端粒酶陰性的細(xì)胞，可能導(dǎo)致對端粒酶活性的耐藥中亦有端粒酶陰性的細(xì)胞，可能導(dǎo)致對端粒酶活性的耐藥。 (5)正常細(xì)胞的端粒較多數(shù)腫瘤細(xì)胞長，且原始干細(xì)胞較正常細(xì)胞的端粒較多數(shù)腫瘤細(xì)胞長，且原始干細(xì)胞較少進(jìn)行有絲分裂，其端?？s短速度低于腫瘤細(xì)胞，故端粒少進(jìn)行有絲分裂，其端粒縮短速度低于腫瘤細(xì)胞，故端粒酶抑制劑的療程在正常細(xì)胞端粒耗盡前會停止。這樣，當(dāng)酶抑制劑的療程在正常細(xì)胞端粒耗盡前會停止。這樣，當(dāng)抑制端粒酶活性的治療結(jié)束后，正常細(xì)胞端粒酶活性是否抑制端粒酶活性的治療結(jié)束后，正常細(xì)胞端粒酶活性是否得到修復(fù)還有待研究。得到修復(fù)還有待研究。? 當(dāng)前對端粒動力學(xué)及端粒酶的作用、調(diào)控當(dāng)前對端粒動力學(xué)及端粒酶的作用、調(diào)控機(jī)制認(rèn)識尚不深入，所以，要將端粒酶抑機(jī)制認(rèn)識尚不深入，所以，要將端粒酶抑制劑最終應(yīng)用于治療惡性腫瘤尚需更深入制劑最終應(yīng)用于治療惡性腫瘤尚需更深入的研究和探索。的研究和探索。? 2023年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎學(xué)獎 授予美國科學(xué)家伊麗授予美國科學(xué)家伊麗莎白莎白 布萊克本布萊克本 (Elizabeth)、卡羅爾、卡羅爾 ?格格雷德雷德 (Carol)、和和 杰克杰克 紹斯塔克紹斯塔克 (Jack)。 以表彰他們以表彰他們 “發(fā)現(xiàn)端粒和端粒酶是如何發(fā)現(xiàn)端粒和端粒酶是如何保護(hù)染色體的保護(hù)染色體的 ”。三、靶向藥物的現(xiàn)實(shí)和展望三、靶向藥物的現(xiàn)實(shí)和展望TargetedTherapyintheCommonSolidTumors:TheRealityWhytheDifference?? Mostsolidtumorshaveplexgeics,notoneortwohitsbut20+.Themoreadvancedthetumor,thegreatertheheterogeneity.? Molecularheterogeneity.? Hittingonenarrowtargetisnotlikelytobethatbeneficial.TumorsProgressivelyMakeMoreAngiogenesisStimulatorsRelfetal., Cancer Research, 57:953,1997bFGF bFGFVEGFbFGFVEGFPDGFbFGFVEGFPDGFIL8Howtohitthetarget? Ifyouknowthetarget,andthereisonlyonetargetyoucanbeveryspecific.? Ifyoudon’treallyknoworit’sareallybigtarget,alargerweaponmaybeneeded.Leveragingyouropponentsweight,orhowtargetedtherapycanworkwithothertreatmentsandtosstheopponentoutoftheringTargetedTherapy:TheFuture? Modernbiologyhasidentifiedahostofnewpotentialtargetsforcancertherapy? Drugsinteractingwiththesetargetsareavailable.? Thebenefitoftheseagentsisdependantuponthecriticalityofthetarget.Morethanonetargetmayneedtobeinhibited.? Newagentsmay“tipthebalance”whenbinedwithchemotherapy,radiation.TargetedTherapy:TheFuture(cont’d)? ThedesignandcarefulassessmentofnewagentsinPhaseIandIItrialswillresultinbetterunderstandingofthepotentialpopulationandmagnitudeofbenefitforanyparticularagent.? PhaseIItrialsshouldguidethedecisionforPhaseIII.? PhaseIIItrialswithagoodchanceofsuccesscanthenbeacplished.? Thank you!