il8生物活性的檢測-資料下載頁
2024-12-30 21:48本頁面
【正文】 非細(xì)胞面上的細(xì)胞，靠近大夾子處的濾膜先接 觸細(xì)胞刮，在與細(xì)胞刮成 30度角方向輕輕上拉，該過程重復(fù)兩 次。 4) 固定，小心將濾膜浸入甲醇中，室溫 3分鐘，將濾膜取出，用塑 料夾夾住，自然干燥。 5) 染色，將固定后的濾膜在 Gimsa染色液中染色 30分鐘，自來水沖洗，置于玻片上，顯微鏡下觀察。 6) 計數(shù)，在高倍鏡下，每孔隨機(jī)選取 5個視野，累積細(xì)胞數(shù)，算出三個復(fù)孔的平均值。作為該稀釋度的遷移細(xì)胞數(shù)。 IL8組趨化的細(xì)胞數(shù)與緩沖液對照組中趨化細(xì)胞 數(shù)的比值即為趨化指數(shù)，趨化指數(shù)大于 2有意 義 。 技術(shù)要點 ： 1） .分離純化嗜中性粒細(xì)胞時，要仔細(xì)認(rèn)真保證細(xì)胞活力。 2） .每次做實驗均要設(shè)陰性對照，用真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染上清做趨 化實驗時，要設(shè)空載體轉(zhuǎn)染上清做陰性對照。 3） .向趨化小室下孔中加樣品時，上樣量要適中，使之能形 成稍微隆起的液面，既能防止氣泡形成，又可以防止樣 品發(fā)生交叉污染 4） .每個樣品要做三個復(fù)孔。 5） .放膜時要對準(zhǔn)位置，過多調(diào)整位置，易發(fā)生交叉污染。 6） .洗膜時注意，不要把細(xì)胞面與非細(xì)胞面弄反。 7） .不同趨化因子的趨化譜不同，用不同細(xì)胞做趨化反時， 應(yīng)選用不同孔徑的濾膜、不同的細(xì)胞濃度和不同的趨 化時間。 8） .做實驗前 要把小室洗凈、 晾干。 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH
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