第三章酶的發(fā)酵生產-資料下載頁
2025-09-30 16:09本頁面
【正文】 表面張力有關？ ? 1 酶制劑發(fā)酵過程中產生的泡沫較多 ， 產生原因：強烈的通氣攪拌和培養(yǎng)基中天然蛋白質 原料含量較高 。 ? 2 造成危害： ① 阻礙 CO2的排除 ， 影響氧的溶解； ② 溢罐 ，導致浪費原料 ， 引起染菌； ③ 裝液量減少 ，降低發(fā)酵罐的利用率 。 ? 3 采取措施： ①減少泡沫形成（原料， 罐壓 大?。?，攪拌） ② 機械消泡 與化學消泡。 消泡劑：天然油脂；高碳醇脂肪酸和酯；聚醚；硅酮。 八、濕度 ? 固體發(fā)酵法：控制培養(yǎng)基的濕度和發(fā)酵室空氣中的相對濕度 。 九、發(fā)酵過程的中間補料 補料方案： ① 補糖 (碳源 )② 補氮源 ③ 補無機鹽和產酶促進劑 ④ 補全料和補水 。 ?淀粉酶：用 3倍濃度碳源的培養(yǎng)基補料 ，體積相當于基礎料的 1/2；從培養(yǎng) 12h開始 ， 每小時 1次 ， 分 30余次添加完畢 。 糖化酶：補氨水 ， C、 N源總濃度 3035% 酶活 25000～ 30000U/ml 第四節(jié) 酶發(fā)酵動力學 ? 酶發(fā)酵動力學：研究發(fā)酵過程中速率 及其影響因素的科學。 包括細胞生長動力學、反應基質消耗動力學和酶生成動力學等。 ? 重點探討 酶生成動力學 同步合成型 酶的合成與生長同步進行 。 米曲霉可由單寧誘導生成單寧酶 酶的生物合成可以誘導 ， 但不受分解代謝物阻遏和反應產物阻遏 。 這類酶所對應的 mRNA很不穩(wěn)定 。 dP/dt=αdX/dt qP=αμ 延續(xù)合成型 酶的合成伴隨著細胞的生長而開始 ， 但在細胞生長進入穩(wěn)定期后 ， 酶還可以延續(xù)合成較長的一段時間 。 酶的生物合成可以誘導 ， 但不受分解代謝物阻遏和反應產物阻遏 。 這類酶所對應的 mRNA相當穩(wěn)定 ， 在生長穩(wěn)定期以后相當長的一段時間內繼續(xù)用于酶的合成 。 dP/dt=αdX/dt＋ βX qP=αμ＋ β 中期合成型 酶合成在細胞生長一段時間以后才開始 ， 而在細胞進入穩(wěn)定期后 ， 酶的合成也隨著停止 。 酶的生物合成受到反饋阻遏 ， 而且其所對應的mRNA不穩(wěn)定 。 dP/dt=αdX/dt qP=αμ α＝ 0 存在阻遏物 α≠0 解除阻遏后 滯后合成型 只有當細胞生長進入穩(wěn)定期后 ， 酶開始合成并大量積累 。 酶的生物合成受分解代謝物阻遏作用 ， 這類酶所對應的 mRNA穩(wěn)定性高 。 dP/dt=βX qP=β 總結 ? mRNA的穩(wěn)定性 ， 培養(yǎng)基中誘導物 ， 反饋阻遏物 ， 分解代謝物的存在是影響酶生物合成模型的主要因素 。 ? mRNA穩(wěn)定性 代謝調節(jié) 產物生成模型 同步合成型 () 誘導 dP/dt=αdX/dt 延續(xù)合成型 (+) 誘導 dP/dt=αdX/dt＋ βX 中期合成型 () 反饋阻遏 dP/dt=αdX/dt （ 解除阻遏后 ） 滯后合成型 (+) 分解代謝物阻遏 dP/dt=βX 理論的應用 目的：提高產酶率和縮短發(fā)酵周期 最理想的合成模式：延續(xù)合成型 策略措施： ① 菌種選育：提高 mRNA的穩(wěn)定性 ， 解除分解代謝物阻遏和反饋阻遏 。 ② 發(fā)酵代謝調節(jié)：理想誘導物的添加 ， 解除反饋阻遏和分解代謝物阻遏 （ 難利用的碳氮源的使用 ，補料發(fā)酵 ） 。 ③ 降低產酶溫度 。 ? P啟動子包括兩個結合位點： RNA聚合酶結合位點 ， cAMP－ CRP復合物結合位點 安慰性誘導物 ? 能夠發(fā)揮誘導作用的基質的結構類似物。例如異丙基巰基 ?D半乳糖苷、巰甲基 ?D半乳糖苷、鄰硝基苯 ?D半乳糖苷，是 ?半乳糖苷酶的安慰性誘導物。 回轉式發(fā)酵制曲機 通風制曲池 ? 如合成 n個肽鍵的酶蛋白多肽鏈 ， 就需要消耗 (4n+3)個 ATP的高能磷酸鍵 ? 激活，起動，延長，終止，折疊和加工 ? 激活，延長，移位 籠式通氣攪拌生物反應器 凝乳酶作用原理
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