細(xì)胞工程的操作水平和目的-資料下載頁
2025-09-11 21:36本頁面
【正文】 __技術(shù)。 (2)制備單克隆抗體過程中，給小鼠注射的 HCG相當(dāng)于 ________，使小鼠產(chǎn)生能分泌相應(yīng) ________的淋巴細(xì)胞，此過程屬于特異性免疫中的 ________免疫。 (3)在細(xì)胞內(nèi) DNA合成一般有兩條途徑，主要途徑是在細(xì)胞 內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸，進(jìn)而合成 DNA，而氨基喋呤可以阻斷此途徑。另一輔助途徑是在次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情況下，經(jīng)酶催化作用合成 DNA，而骨髓瘤細(xì)胞的 DNA合成沒有此輔助途徑。 ① 利用 DNA合成途徑不同的特點(diǎn)配制的 HAT培養(yǎng)基含有多種成分，其中添加的 ________成分具有篩選雜交瘤細(xì)胞的作用。 ② 最終篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是_____________________________________________。 (4)此過程生產(chǎn)的單克隆抗體可以與 _______________________________________________ 特異性結(jié)合，從而診斷早孕。 解析： 制備單克隆抗體要用到動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物細(xì)胞融合技術(shù)。給小鼠注射的 HCG相當(dāng)于抗原，小鼠經(jīng)過體液免疫從而產(chǎn)生分泌相應(yīng)抗體的 B淋巴細(xì)胞。在培養(yǎng)基中加入氨基喋呤可阻斷細(xì)胞內(nèi)由糖和氨基酸合成核苷酸進(jìn)而合成DNA的過程，從而抑制 DNA通過此途徑進(jìn)行復(fù)制，因此用此種培養(yǎng)基進(jìn)行篩選時(shí)，培養(yǎng)基中的骨髓瘤細(xì)胞的 DNA復(fù)制過程被阻斷，不能生長，而受抗原刺激后的淋巴細(xì)胞也不能增殖，則篩選出來的就都是雜交瘤細(xì)胞。 [答案 ] (1)動物細(xì)胞培養(yǎng) 動物細(xì)胞融合 (2)抗原 抗體 體液 (3)① 氨基喋呤 ② 能無限增殖并分泌特異性抗體 (必須答全 ) (4)人絨毛膜促性腺激素 (或 HCG) [鏈一串 ] 1．植物體細(xì)胞雜交和動物細(xì)胞融合的比較 植物體細(xì)胞雜交 動物細(xì)胞融合 細(xì)胞融 合原理 細(xì)胞膜的流動性、植物細(xì)胞的全能性 細(xì)胞膜的流動性 細(xì)胞融 合方法 用纖維素酶、果膠酶去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合 用胰蛋白酶或膠原蛋白酶使細(xì)胞分散后，誘導(dǎo)細(xì)胞融合 植物體細(xì)胞雜交 動物細(xì)胞融合 誘導(dǎo) 手段 離心、電刺激、振動、顯微操作、聚乙二醇等誘導(dǎo) 與植物體細(xì)胞雜交相比，還可用滅活的病毒誘導(dǎo) 結(jié)果 獲得雜種植株 獲得雜種細(xì)胞，以生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品 用途 克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，擴(kuò)展雜交親本范圍，培育新品種 制備單克隆抗體、病毒疫苗、干擾素等 植物體細(xì)胞雜交 動物細(xì)胞融合 相同點(diǎn) ① 兩者在融合過程中都會發(fā)生多種融合方式，如 A—A， B—B， A—B，因此要進(jìn)行篩選 ② 兩者都要用到細(xì)胞融合和細(xì)胞培養(yǎng)兩種技術(shù)手段 2．細(xì)胞融合兩次篩選的目的及方法 (1)在特定的選擇性培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞 (B淋巴細(xì)胞 和骨髓瘤細(xì)胞 )和融合的具有同種核的細(xì)胞 (BB融合細(xì)胞、瘤瘤融合細(xì)胞 )都會死亡，只有融合的雜種細(xì)胞 (雜交瘤細(xì)胞 )才能生長。這種雜種細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生單一的特異性抗體。 (2)經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞并非都是能分泌所需抗體的細(xì) 胞 (很多種雜交瘤細(xì)胞 )，需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選后可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。 [關(guān)鍵一點(diǎn) ] 抗體是由 B淋巴細(xì)胞分泌的，每一種 B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體，要想得到大量的單一抗體，必須將同一種 B淋巴細(xì)胞大量克隆，但在體外培養(yǎng)的條件下，一個(gè) B淋巴細(xì)胞不能無限增殖，而骨髓瘤細(xì)胞可以在體外無限增殖，因此，通過細(xì)胞融合可得到既能分泌特異性抗體、又能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞。 A． ① 表示 B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠的脾臟 中提取的 B． ④ 中的篩選是通過抗原、抗體反應(yīng)進(jìn)行的 C． ② 促進(jìn)細(xì)胞融合的過程可以利用聚乙二醇作介導(dǎo) D． ⑤ 可以無限增殖 6． (2022廣州模擬 )根據(jù)單克隆抗體制備流程示意圖判斷 以下選項(xiàng)中正確的是 ( ) 解析： A項(xiàng)不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性； B項(xiàng)中選擇培養(yǎng)基是按用途劃分的； D項(xiàng)中融合的細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中也含有 DNA分子。 答案： C
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