動物染色體工程hxy-資料下載頁
2025-09-11 20:38本頁面
【正文】 DNA ，而且在 構(gòu)建基因組文庫 時需要較少的克隆。 (2)用 YAC克隆構(gòu)建的物理圖譜在復(fù)雜的生物 基因組分析和 DNA測序 中發(fā)揮著重要作用。目前，用 YAC提供大片段DNA構(gòu)建染色體圖譜的技術(shù)已在人類、植物、昆蟲、鳥類、兩棲類等動物中得到廣泛應(yīng)用，相比于早期的 DNA片段載體， YAC是容納大片段外源 DNA的首選載體。 (3)在 基因功能研究 中，基因嵌入及轉(zhuǎn)基因技術(shù)都采用了 YAC克隆系統(tǒng)。通過 YAC嵌入的基因不僅片段長，而且嵌入的基因更適于體內(nèi)表達(dá)，并有利于基因保持其固有的空間構(gòu)象和功能的發(fā)揮。 YAC的缺點(diǎn)： ? 插入片段大，穩(wěn)定性較差，不易操作 ? 插入的大片段常發(fā)生缺失，使文庫不完整 ? YAC與酵母天然染色體分子結(jié)構(gòu)相似分離時難與天然染色體分開 ? 文庫中的嵌合現(xiàn)象嚴(yán)重 ? 因插入片段大，往往發(fā)生序列重排，造成序列錯亂。 細(xì)菌人工染色體（ BAC） 新一代 BAC載體為 環(huán)狀質(zhì)粒 ，主要結(jié)構(gòu)有： ? F因子的 parA， parB， parC基因 保證低拷貝的 BAC質(zhì)粒在大腸桿菌分裂時均勻分配到子代細(xì)胞。 ? 起始 oriS基因 嚴(yán)密控制，決定低拷貝數(shù)和復(fù)制起始 ? 解旋酶基因－ repC 易于 DNA復(fù)制和決定復(fù)制方向 ? 選擇標(biāo)志基因 Cmr 氯霉素抗性基因 ? lacZ基因 顏色鑒別重組子，外源基因插入其中 ? loxP和 cosN位點(diǎn) 易于克隆 DNA回收和操作 ? BAC的特點(diǎn)： – 宿主中只有 12個拷貝 – 插入片段不易變化，穩(wěn)定遺傳 – 避免嵌合現(xiàn)象 – 轉(zhuǎn)化效率高 – 主要用于 300bp一下 DNA克隆 60 哺乳類人工染色體（ MAC） ? 以哺乳動物細(xì)胞為宿主的人工染色體。 61 YAC和 MAC應(yīng)用于基因治療領(lǐng)域是一種理想的基因轉(zhuǎn)移新載體，有以下優(yōu)點(diǎn) ： 1）．可攜帶的外源基因容量大，包裝容量可達(dá) 500～600kb，可以滿足幾乎所有的單個基因的基因組 DNA的需要。 2）．可以攜帶較長片段的基因表達(dá)調(diào)控順序，能夠較好地調(diào)節(jié)基因表達(dá)水平以及基因的靶向表達(dá)。 3）．外源基因存在于人工染色體中，可以不整合到細(xì)胞基因組中，因而不會激活原癌基因或使其它有功能基因失活，而且理論上能夠在細(xì)胞中較穩(wěn)定地存在。 人工染色體的應(yīng)用 ?物理圖譜和定位克隆 ?基因功能鑒定和轉(zhuǎn)基因的研究 ?染色體結(jié)構(gòu)和功能關(guān)系研究 ?基因治療 63 第三篇 植物細(xì)胞工程 64 植物組織培養(yǎng) 根、芽 完整植株 脫分化 細(xì)胞分裂素 生長素 再分化 離體的植物器官、組織或細(xì)胞 愈傷組織 65 植物細(xì)胞工程的主要技術(shù)： ? 植物組織培養(yǎng) ? 植物的快速繁殖 ? 體外單倍體誘導(dǎo)與單倍體育種 ? 植物胚胎培養(yǎng) ? 體細(xì)胞胚胎發(fā)生與人工種子 ? 植物原生質(zhì)體融合技術(shù) ? 植物染色體工程 ? 植物轉(zhuǎn)基因技術(shù) 66 思考題 ?簡介動物染色體倍性改造的主要方法。 ?何謂雌核發(fā)育？如何人工誘導(dǎo)雌核發(fā)育？ ?何謂人工染色體？有何應(yīng)用價值？ ?請 簡介魚類三倍體育種的方法和意義 。 67
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