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干細胞標記物-資料下載頁

2025-08-15 21:28本頁面
  

【正文】 hanced green fluorescent protein, EGFP)和紅色熒光蛋白 (red fluorescentprotein, RFP)。 活體示蹤干細胞常用的細胞標記物質(zhì)及其在影像學(xué)的應(yīng)用 1. 核醫(yī)學(xué)分子顯像技術(shù)活體示蹤干細胞 : SPECT (single photon emission puted tomography, SPECT) PET (positronem issiontom ography, PET)。 (1)代謝顯像: 18F 標記的氟脫氧葡萄糖 (18FFDG), 11C蛋氨酸和 11C乙酸鹽, 18FFDG, 18Fluorodopa(18FD)。 (2)抗體顯像。放射免疫顯像的核素有 99mTc, 111In 和 131I (3)受體顯像: 多巴胺、乙酰膽堿, 氨基丁酸 /苯二氮 ,5羥色胺和阿片受體。 轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 (transferrin receptor, TfR) (4)基因表達顯像 報告基因表達顯像:又稱轉(zhuǎn)基因表達顯像,將能夠表達可測表型 (酶、受體, 轉(zhuǎn)運體等 ) 的特定核苷酸序列 (報告基因 )與靶基因偶聯(lián),通過測定表型蛋白間接 反映靶基因的表達。 反義顯像:是通過螯合劑將金屬核素 (99mTc、 111In等 )與反義寡核苷酸連接 (RASON),在細胞內(nèi)與靶基因的 m RNA 互補結(jié)合顯像,以反映目標 DNA 轉(zhuǎn)錄情況。 2. 磁共振成像 (M RI)活體示蹤干細胞 能夠用于干細胞標記研究的 M R 造影增強劑主要有兩類: (1) 釓 (gadolinium )類: (2)氧化鐵 (iron oxides)類:主要是磁性納米材料超順磁性氧化鐵 (superparam agiciron oxide, SPIO)和超小順磁性氧化鐵 (ultrasm allparam agic iron oxide particles, USPIO) 細胞的標志物的研究方法實例 CD34 1984年, Cividin等用人髓系白血病細胞 kG1a 制備了單抗 My10,能與大多數(shù)骨髓來源的造血干祖細胞膜上分子量為 105120KD膜蛋白特異結(jié)合 Tindle等又制備出另一株 CD34單抗 ,并證實了Cividin的發(fā)現(xiàn) 1986年第三界國際人類白血病細胞分化抗原協(xié)會將其命名為 CD34 CD34單克隆抗體檢測的抗原即為 CD34分子 CD34抗原被認為是造血干細胞 (HSCs) 的標志物 Osawa等人首先證明小鼠 HSCs可以是 CD34陰性 1 羊胎干細胞移殖模型 人 CD34+Lin細胞 ( 106) 受孕 5560天的羊胎 CD34+CD45+細胞 60d CD34+CD45+細胞 (重復(fù)移殖) 10M CD34+細胞 (109) 干細胞重建造血試驗 CD34+細胞 8只 5周齡羊胎( ( 105細胞 /只 ) 5W 收集 CD34+細胞 ( 106) CD34細胞 ( 105) CD34+細胞 ( 105) 3只羊胎 3只羊胎 15M 15M CD45+細胞 ( 106) CD45+細胞 (2 108) CD34+細胞 (105), CD34細胞 (3 105) CD34+細胞 ,CD34細胞 CD34+CD38細胞:可長期重建造血( 6M) CD34+CD38+細胞:短期造血( 6M) 干細胞的基因印記 普林斯頓大學(xué)的 Ihor Lemischka 多種重要的干細胞,包括胚胎干細胞、造血干細胞和神經(jīng)干細胞等,它們共有的 283個基因。人類和實驗鼠的造血干細胞兩者共有的 322個活躍基因。 哈佛大學(xué)的 Miguel RamalhoSantos等報告了一項類似研究的類似發(fā)現(xiàn)。他們同樣將多種干細胞進行比較,發(fā)現(xiàn)了 200多個共有的基因。 抗體庫技術(shù) 干細胞 免疫小鼠 構(gòu)建抗干細胞表面分子的 噬菌體展示 scFv文庫 篩選并鑒定 抗干細胞表面分子的 噬菌體展示 scFv抗體 篩選 cDNA表達 文庫并鑒定 干細胞表面分子的 cDNA 干細胞標記應(yīng)用實例 Fig. 1 The isolated CD133+ cells generated neurospheres. Phase contrast images of growing spheres at day 7 ( 200) Fig. 2 The CD133+ fraction were incubated with BrdU for 12h and stained with antibody against BrdU ( 400) Fig. 3 Neurospheres derived from CD133+ cells were plated on an adhesive coverslip in presence of mitotic factors (20ng/ml EGF, 20ng/ml bFGF). The cells were stained with antibody against nestin (green), and nuclei were counterstained with PI (red). (引自徐群淵等) CD133分離神經(jīng)干細胞
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