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微生物題庫(kù)及答案-資料下載頁(yè)

2025-08-05 06:33本頁(yè)面
  

【正文】 、培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)要素的含量間一般遵循何種規(guī)律?其中的原因是什么?由于微生物細(xì)胞內(nèi)各種成分間的比例是穩(wěn)定的,因此,設(shè)計(jì)微生物培養(yǎng)基時(shí),考慮微生物細(xì)胞組成元素的比例有重要的意義。培養(yǎng)基中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之間的濃度配比直接影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和(或)代謝產(chǎn)物的形成和積累,其中碳氮比(C/N)的影響較大。在大多數(shù)化能異養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中,除水分外,碳源的含量最高,其次是氮源、大量元素和生長(zhǎng)因子,它們之間大體上存在著10倍序列的遞減趨勢(shì),即:要素:含量:H2O >(~101)C源+能源 > (~102)N源 >(~103 )K、Mg> (~105 )P、S>(~104 )生長(zhǎng)因子(~106 )試述革蘭氏染色的步驟及機(jī)理。革蘭氏染色的步驟: 結(jié)晶紫初染、碘液媒染、 95 %乙醇脫色、紅色染料復(fù)染 4 步;革蘭氏染色的機(jī)制: 革蘭氏染色結(jié)果的差異主要基于細(xì)菌細(xì)胞壁的構(gòu)造和化學(xué)組分不同。通過(guò)初染和媒染,在細(xì)菌細(xì)胞膜或原生質(zhì)體上染上了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的大分子復(fù)合物。 G + 細(xì)菌由于細(xì)胞壁較厚、肽聚糖含量較高和交聯(lián)緊密,故用乙醇洗脫時(shí),肽聚糖層網(wǎng)孔會(huì)因脫水而明顯收縮,再加上的 G + 細(xì)菌細(xì)胞壁基本上不含類(lèi)脂,故乙醇處理不能在壁上溶出縫隙,因此,結(jié)晶紫與碘復(fù)合物仍牢牢阻留在其細(xì)胞壁內(nèi),使其呈現(xiàn)藍(lán)紫色。 G 細(xì)菌因其細(xì)胞壁薄、肽聚糖含量低和交聯(lián)松散,故遇乙醇后,肽聚糖層網(wǎng)孔不易收縮,加上它的類(lèi)脂含量高,所以當(dāng)乙醇將類(lèi)脂溶解后,在細(xì)胞壁上就會(huì)出現(xiàn)較大的縫,這樣結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物就極易被溶出細(xì)胞壁。因此,通過(guò)乙醇脫色,細(xì)胞又呈現(xiàn)無(wú)色。這時(shí),再經(jīng)番紅等紅色染料復(fù)染,就使 G 細(xì)菌獲得了新的顏色 —— 紅色,而 G + 細(xì)菌則仍呈藍(lán)紫色(實(shí)為紫中帶紅)。1什么是溶源菌?它有何特點(diǎn)?如何檢出溶源菌?在染色體組上整合有溫和噬菌體并能進(jìn)行正常生長(zhǎng)繁殖的宿主稱(chēng)為溶源菌。特點(diǎn):能“收養(yǎng)”溫和噬菌體并能與其長(zhǎng)期共存,通常不呈現(xiàn)對(duì)宿主細(xì)胞有害的影響;常以較低頻率(103-105)進(jìn)行自發(fā)裂解(能使位于宿主基因組上的整合態(tài)前噬菌體從染色體上解離出來(lái)),使前噬菌體由整合態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)態(tài)(脫離宿主核基因組而處于積極復(fù)制、合成和裝配的狀態(tài));溶源菌對(duì)同種或關(guān)系密切與的噬菌體具有免疫性(免遭其再侵染指特性);溶源菌也會(huì)失去前噬菌體而復(fù)愈為正常菌株。檢測(cè)某一菌株是否屬于溶源菌,可利用溶源菌所攜帶的前噬菌體的低頻裂解性,與其相對(duì)應(yīng)敏感菌株以適當(dāng)比例混合,然后與瓊脂培養(yǎng)基混合后倒平板,經(jīng)培養(yǎng)后形成特殊菌落(中央有溶源菌的小菌落,四周有透明圈圍著)。 1什么是細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線(xiàn)?生長(zhǎng)曲線(xiàn)對(duì)微生物發(fā)酵生產(chǎn)有何指導(dǎo)意義?(B卷)細(xì)菌接種到適當(dāng)?shù)囊后w培養(yǎng)基后,以時(shí)間為橫坐標(biāo),以菌數(shù)為縱坐標(biāo),根據(jù)不同培養(yǎng)時(shí)間時(shí)細(xì)菌數(shù)量的變化,可以作出一條反映細(xì)菌在整個(gè)培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線(xiàn),這種曲線(xiàn)稱(chēng)為生長(zhǎng)曲線(xiàn)稱(chēng)為生長(zhǎng)曲線(xiàn)。一條典型的生長(zhǎng)曲線(xiàn)至少可以分為遲緩期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期等四個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期。 遲緩期:細(xì)菌的數(shù)量維持恒定。在工業(yè)發(fā)酵和科研中遲緩期會(huì)增加生產(chǎn)周期而產(chǎn)生不利的影響,因此應(yīng)該采取一定的措施:①通過(guò)遺傳學(xué)方法遲緩期縮短;②利用對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞作為“種子”; ③接種前后培養(yǎng)基組成不要相差太大;④適當(dāng)擴(kuò)大接種量等方式縮短遲緩期。對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期:細(xì)菌數(shù)量呈對(duì)數(shù)增加,細(xì)菌生長(zhǎng)是平衡生長(zhǎng)。對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)菌的代謝活性、酶活性高而穩(wěn)定,大小比較一致,生活力強(qiáng),因而它廣泛地在生產(chǎn)上用作“種子”和在科研上作為理想的實(shí)驗(yàn)材料。穩(wěn)定生長(zhǎng)期:由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗,代謝產(chǎn)物積累和pH等環(huán)境變化,逐步不適宜于細(xì)菌生長(zhǎng),細(xì)菌分裂增加的數(shù)量等于細(xì)菌死亡數(shù)量。穩(wěn)定生長(zhǎng)期的活細(xì)菌數(shù)最高并維持穩(wěn)定。如果及時(shí)采取措施,補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或取走代謝產(chǎn)物或改善培養(yǎng)條件,如對(duì)好氧菌進(jìn)行通氣、攪拌或振蕩等可以延長(zhǎng)穩(wěn)定生長(zhǎng)期,獲得更多的菌體物質(zhì)或代謝產(chǎn)物。衰亡期:細(xì)菌死亡速率逐步增加和活細(xì)菌逐步減少。細(xì)菌衰老并出現(xiàn)自溶。1菌種為何會(huì)衰退? 如何初步判斷一個(gè)菌種是否衰退?如何防止菌種衰退?如何復(fù)壯?衰退原因:基因自發(fā)突變。具體表現(xiàn)有:原有形態(tài)性狀變得不典型了,生長(zhǎng)速度變慢,代謝產(chǎn)物生產(chǎn)能力下降,致病菌對(duì)宿主侵染能力下降,對(duì)外界不良條件的抵抗能力下降。防止菌種衰退:1)控制傳代次數(shù);2)創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件;3)利用不易衰退的細(xì)胞接種;4)采用有效的菌種保藏方法。 復(fù)壯:純種分離、利用寄主復(fù)壯、淘汰衰退的個(gè)體。 1舉例說(shuō)明微生物與環(huán)境間的關(guān)系。1)互生:較松散聯(lián)合,可以是一方得利,或雙方有利。如好氧性自生固氮菌與纖維素分解菌、人腸道中正常菌群與人、工業(yè)發(fā)酵中的混菌培養(yǎng)。2)共生:緊密結(jié)合在一起,高度發(fā)展時(shí),形成特殊共住體,生理上有分工,組織、形態(tài)上產(chǎn)生新結(jié)構(gòu)。如地衣、根瘤菌與豆科植物、菌根菌與植物、白蟻腸道中的細(xì)菌、瘤胃微生物與反芻動(dòng)物。 3)寄生:一種生物生活在另一種生物表面或體內(nèi),從后者獲得營(yíng)養(yǎng)。如噬菌體與細(xì)菌、蛭弧菌與假單胞菌、植物病原微生物、動(dòng)物病原微生物。 4)拮抗:一種生物產(chǎn)生不利于另一種生物生存的代謝物質(zhì)或改變環(huán)境條件,抑制甚至殺死另一種生物的現(xiàn)象。如泡菜中的乳酸菌和腐敗菌、產(chǎn)抗生素微生物和其它微生物。 5)捕食:一種生物直接吞食另一種生物。如原生動(dòng)物捕食細(xì)菌和藻類(lèi)、捕食性真菌捕食土壤線(xiàn)蟲(chóng)。
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