免疫檢驗(yàn)質(zhì)控-資料下載頁(yè)
2024-08-14 02:48本頁(yè)面
【正文】 ? 用變性 IgG預(yù)先封閉標(biāo)本中 RF ? 測(cè)抗原 ,可先加入還原劑如 2巰基乙醇去除RF ? 使用特異的雞抗體 IgY作為標(biāo)記或固相抗體 類風(fēng)濕因子干擾的排除 51 補(bǔ)體干擾 ? 固相抗體和標(biāo)記抗體的分子可因環(huán)境、 PH等因素改變而發(fā)生變構(gòu)，使其 Fc段的補(bǔ)體 C1q結(jié)合位點(diǎn)被暴露出來(lái)。這時(shí)如存在補(bǔ)體，它就成為一個(gè)中介物將固相抗體和標(biāo)記抗體二者交聯(lián)起來(lái)，從而出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。 ? 變構(gòu)的固相抗體、標(biāo)記抗體等也會(huì)因?yàn)榛罨a(bǔ)體的結(jié)合，封閉抗體的抗原表位結(jié)合能力，而引起假陰性結(jié)果或結(jié)果偏低。 52 補(bǔ)體干擾的排除 ? 56℃ 30min 加熱可使標(biāo)本中補(bǔ)體 C1q滅活 ? 使用特異的雞抗體 IgY作為標(biāo)記或固相抗體 53 異嗜性抗體的干擾 天然的異嗜性抗體（ IgG）可分為兩類 : ? 可結(jié)合于小鼠、大鼠、馬、牛和山羊 IgG的 Fab區(qū)域 ? 可結(jié)合于小鼠、馬、牛和 兔 IgG的 FC區(qū)表位，通過(guò)交聯(lián)固相和標(biāo)記的單抗或多抗而出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。 54 異嗜性抗體干擾的排除 ? 使用特異的兔 F(ab’)2片段 作為固相或標(biāo)記抗體 。 ? 在標(biāo)本或標(biāo)本稀釋液中加入過(guò)量的動(dòng)物 Ig， 封閉可能存在的異嗜性抗體 。 但加入量不足或亞類不同時(shí)無(wú)效 。 ? 使用靶特異的非 Ig親和蛋白 （ Affibody） 替代固相或標(biāo)記抗體之一 。 采用噬菌體展示技術(shù)展示來(lái)自單個(gè) 金黃色葡萄球菌 A蛋白 （ SPA） 聯(lián)合文庫(kù)的人 IgA結(jié)合親和蛋白 ， 用于IgA的測(cè)定 ， 不受異嗜性抗體的影響 。 ? 使用特異的雞抗體作為固相和測(cè)定抗體 。 55 抗鼠 Ig 抗體的干擾 ? 抗鼠抗體對(duì)使用鼠源性單克隆抗體的免疫測(cè)定可產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果， ? 排除： ? 使用特異的抗體 F(ab’)2片段作為固相或標(biāo)記抗體。 ? 在標(biāo)本或標(biāo)本稀釋液中加入過(guò)量的鼠 Ig，封閉可能存在的抗鼠抗體。 ? 使用特異的雞抗體 IgG作為固相和標(biāo)記抗體，因雞 IgG不與人抗鼠抗體反應(yīng)。 56 自身抗體干擾 ? 自身抗體如抗甲狀腺球蛋白、抗胰島素等，能與其相應(yīng)靶抗原結(jié)合形成復(fù)合物，在免疫測(cè)定方法中可干擾相應(yīng)抗原抗體的測(cè)定。 ? 為避免以上情況出現(xiàn)，可在測(cè)定前用理化方法將其解離 。 57 溶菌酶干擾 ? 溶菌酶有與等電點(diǎn)低的蛋白結(jié)合的特性 。 雙抗體夾心法 ELISA測(cè)定中 ， 溶菌酶可在包被的 IgG和標(biāo)記的 IgG（ 它們等電點(diǎn)為 5） 間形成橋接 ， 從而導(dǎo)致假陽(yáng)性 。 去除溶菌酶或?qū)⑵浞忾] ， Cu2+離子和卵白蛋白可有效地封閉溶菌酶 ， 防止其聯(lián)接 IgG。 58 冷凝集素 ? 冷凝集素綜合征是 IgM抗體引起的自體免疫性疾病，又叫“冷血凝集素病”或“冷凝集素病”。其特點(diǎn)是在較低的溫度下，這種抗體能作用于患者自己的 RBC，在體內(nèi)發(fā)生凝集，阻塞末梢微循環(huán)，發(fā)生手足紫紺癥或溶血在體外，抗體與抗原發(fā)生作用的最適宜溫度是 0℃ ～ 4℃ ，在 37℃ 或31℃ ～ 32℃ 以上的溫度，抗體與紅細(xì)胞抗原發(fā)生完全可逆的分解，癥狀迅速消失。 本綜合征可以是特發(fā)性的或繼發(fā)于淋巴組織系統(tǒng)的惡性腫瘤如多發(fā)性骨髓瘤或支原體屬肺炎及傳染性單核細(xì)胞增多癥等病毒感染。 ? 病例 某女， 42歲，冬天住院，抽血標(biāo)本（ EDTA抗凝）似豆腐渣樣，放 37176。 C渣樣消失，低溫時(shí)復(fù)出現(xiàn)，雷諾氏癥狀陽(yáng)性（鏡下 WBC粘成團(tuán)，手指上有青斑紫斑，放 37176。 C斑點(diǎn)馬上消失，拿出 1分鐘復(fù)現(xiàn)斑塊）。該類病人標(biāo)本合血時(shí)要放 37176。 C下觀察。其冷抗體陽(yáng)性， WBC、 RBC、 Pt顯著下降。 59 四、外源性干擾因素 ? 溶血、細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、凝固不全、反復(fù)凍融 60 標(biāo)本溶血影響 ? 血紅蛋白類似過(guò)氧化物的活性 ， 使反應(yīng)顯色 ? 取材時(shí)注意避免標(biāo)本出現(xiàn)嚴(yán)重溶血 。 ? 排除：在接受標(biāo)本時(shí)對(duì)溶血標(biāo)本拒收 ， 對(duì)難獲得的標(biāo)本或特殊情況在結(jié)果報(bào)告單上注明“ 溶血 ” 提示醫(yī)生 。 61 標(biāo)本被細(xì)菌污染影響 ? 細(xì)菌的生長(zhǎng)，其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用 ? 細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的 β 半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾。 ? 排除：盡量用新鮮標(biāo)本并及時(shí)檢測(cè)，不能及時(shí)做時(shí)低溫保存。 62 標(biāo)本貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)影響 ? 標(biāo)本在 2~8℃ 下保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)， IgG可聚合成多聚體，在間接法免疫測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深、甚至造成假陽(yáng)性。 ? 排除：血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作分離，則可以在 2～ 8℃ 下保存一周，如為有菌操作，則建議冰凍保存。樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存，應(yīng)在－70℃ 以下。 63 標(biāo)本凝固不全影響 ? 血液采集后 ， 離心分離血清沒有完全凝固 ， 離出的 “ 血清 ” 并非為完全的血清 ， 其中仍殘留部分纖維蛋白原 ， 易造成假陽(yáng)性結(jié)果 ? 排除：血液標(biāo)本采集后 ， 應(yīng)使其充分凝固后再分離血清 ， 或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?。 64 冰凍保存標(biāo)本避免反復(fù)凍融影響 ? 反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假陰性結(jié)果。 ? 排除：避免反復(fù)凍融標(biāo)本。 65 1. 與質(zhì)量保證相關(guān)的定義有哪些，各自的含義是 什么？ 2. 定性免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制要求是什么？ 3. 室間質(zhì)量評(píng)價(jià)的概念及意義。 4. 臨床免疫學(xué)檢測(cè)中常見的干擾因素有哪些？ 5. 實(shí)驗(yàn)方法診斷效率評(píng)價(jià)的指標(biāo)有哪些？各自的 含義是什么 ？ 思考題
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