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dna的結(jié)構(gòu)與功能-資料下載頁

2025-08-05 01:19本頁面

　　

【正文】 19 ? 解鏈曲線（ melting curve） ? 解鏈溫度（溶解溫度， Tm）在解鏈過程中， UV吸收值的變化達(dá)到最大變化值一半時(shí)對(duì)應(yīng)的溫度，此溫度時(shí)，50%DNA雙鏈打開。 ? Tm值不 DNA均一性和長短、堿基 GC含量、溶液離子強(qiáng)度、相關(guān)， GC含量越高， Tm值越高。 20 ? Tm值的計(jì)算及應(yīng)用 Tm=+ (G+C)/(G+C+A+T) 100% 小于 20bp的寡核苷酸片段 Tm=4（ G+C） +2（ A+T) PCR退火溫度比 Tm值低 4~6℃ 21 ? DNA的復(fù)性 ? 定義： DNA回復(fù)成雙鏈結(jié)構(gòu)，稱為復(fù)性。 ? 影響復(fù)性的因素：樣品的性質(zhì)、 DNA片段的大小、 DNA濃度、溫度、離子強(qiáng)度等。 ? 復(fù)性后理化性質(zhì)的改變 : 粘度增大；比旋光度變大； OD260下降（低色效應(yīng)） 22 熱變性經(jīng)冷卻后即可復(fù)性，稱為退火。高于 Tm值 5℃ 復(fù)性也稱退火緩慢冷卻迅速冷卻23 謝謝

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