【正文】 L蔗糖。培養(yǎng)溫度在25℃，光照長(zhǎng)度12h/ d，光照強(qiáng)度10000LX。 生根培養(yǎng) 花粉綠苗長(zhǎng)到4～5cm高時(shí)，在超凈工作臺(tái)上將其轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，7～15天后促進(jìn)根系發(fā)達(dá)。生根培養(yǎng)基采用MS+KT +NAA ， 80g/L蔗糖，培養(yǎng)溫度在25℃，光照長(zhǎng)度12h/ d，光照強(qiáng)度10000LX。 壯苗培養(yǎng)和移栽根系發(fā)達(dá)的小麥苗同轉(zhuǎn)生根培養(yǎng)基方法相同再轉(zhuǎn)入壯苗培養(yǎng)基中。壯苗培養(yǎng)基用1/2MS+KT +NAA +，80mg/L蔗糖，培養(yǎng)溫度在25℃，光照長(zhǎng)度14h/ d，光照強(qiáng)度10000LX。在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2～3天苗見長(zhǎng)后移入春化培養(yǎng)箱，溫度8℃，進(jìn)行春化培養(yǎng)35天。10月下旬移栽到田間。幼苗移栽時(shí), 需提前3～5天打開培養(yǎng)瓶的蓋子, 置于室溫下煉苗, 移栽時(shí)需洗去培養(yǎng)基，覆蓋塑料膜保溫、保濕[7]。 白化苗培養(yǎng)在C17培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，以培養(yǎng)基中不添加活性炭的為對(duì)照，觀察白化苗變化。 小麥單倍體加倍 把移栽的單倍體幼苗置于溫棚中進(jìn)行自然加倍； 統(tǒng)計(jì)方法主要指標(biāo)計(jì)算方法如下：花粉愈傷組織誘導(dǎo)率（簡(jiǎn)稱出愈率）（%）=花粉愈傷組織總數(shù)/接種花藥總數(shù)100；綠（或白）苗分化率（%）=分化綠（或白）苗數(shù)/花粉愈傷組織數(shù)100；綠苗誘導(dǎo)率（%）=分化綠苗數(shù)/接種花藥數(shù)100。這里出愈率代表花粉脫分化能力，分化率代表愈傷組織的分化能力，綠苗誘導(dǎo)率代表花粉綠苗的產(chǎn)量[8]。另外，在分化綠苗的愈傷組織中，愈傷組織分化出的白、綠嵌合苗，這一部分愈傷組織計(jì)算到分化綠苗的愈傷組織數(shù)里。 小麥花藥出愈率試驗(yàn)共接種38313枚花藥，培養(yǎng)出愈傷組織5462塊，%，5個(gè)組合出愈情況見表1。其中以12（620）%，12（238）%。表1 5個(gè)組合小麥花藥出愈率Table 1 5 binations of Wheat Anther Callus Induction組合名稱Group name接種花藥數(shù)Number of inoculated anthers愈傷組織塊數(shù)Numbers of callus出愈率Increasing the rate of12（233）5436817%12（238）152822005%12（620）69231089%12（664）5198705%12（667）5474846% 小麥花藥愈傷組織幼苗分化率和幼苗誘導(dǎo)率 表2 5個(gè)組合小麥花藥培養(yǎng)綠苗分化率和綠苗誘導(dǎo)率Table 2 5 binations of green plantlet differentiation rate of wheat anther culture and Plantlet induction frequency 組合名稱Group name分化綠苗數(shù)Green seedling differentiation綠苗分化率Green plantlet differentiation rate綠苗誘導(dǎo)率Green plantlet induction rate12（233）69%%12（238）324%%12（620）272%%12（664）92%%12（667）136%%試驗(yàn)共獲得893株綠苗，%%，（表2），以12（620）組合花藥愈傷組織幼苗分化率和綠苗誘導(dǎo)率最高，%%，12（233）組合最低，%%。不同組合花藥愈傷組織幼苗分化率差異明顯。 小麥DH獲得量及加倍率表3 5個(gè)組合小麥DH獲得量及加倍率Table 3 5 binations of wheat DH and the double rate 組合名稱Group name分化綠苗數(shù)Green seedling differentiationDH數(shù)Number of DH加倍率The double rate12（233）6928%12（238）324169%12（620）27286%12（664）9225%12（667）13635%試驗(yàn)共獲得DH量為343株，%，其中以12（238）%，12（667）%。 活性碳對(duì)小麥花藥培養(yǎng)白化苗的影響，共培養(yǎng)白化苗75株，以培養(yǎng)基中不添加活性炭的為對(duì)照，培養(yǎng)25天后，添加活性炭的有3株轉(zhuǎn)為綠苗，轉(zhuǎn)化綠苗率為4%。不添加活性炭的無白苗轉(zhuǎn)綠。3 討論 試驗(yàn)共獲得893株綠苗，12（238）組合綠苗最多，324株，12（233）組合綠苗最少，69株,%，%%，與宋運(yùn)賢等[9]研究相比，出愈率、%、%，與葉興國(guó)等[10]研究相比，%。 葉興國(guó)等研究認(rèn)為，一些小麥基因型花藥具有較高的愈傷組織誘導(dǎo)率。本研究結(jié)果也顯示，12（620）無論是出愈率、綠苗分化率和綠苗誘導(dǎo)率均較高，%、%%，是花藥培養(yǎng)的優(yōu)良組合，而12（233）組合出愈率比較高，但幼苗分化率低，不是花藥培養(yǎng)優(yōu)良的組合。 李景琦等認(rèn)為，小麥花粉植株的白化現(xiàn)象是不逆的[11]，本實(shí)驗(yàn)通過在培養(yǎng)基中添加活性炭，改善培養(yǎng)條件，使部分白化苗轉(zhuǎn)為綠苗，因此，白化苗不可逆值得商榷，添加活性炭的適宜時(shí)期和適宜的添加量及作用機(jī)理等有待進(jìn)一步探討。 單倍體植株的加倍問題，仍然是花培中需要繼續(xù)探討和有待進(jìn)一步解決的問題。采用秋水仙素加倍固然高一些，但是操作過程導(dǎo)致死苗傷苗現(xiàn)象難以避免。所以在花粉培養(yǎng)中單倍體植株的自然加倍，仍然是很多組培工作者尚在采用的方法。然而自然加倍率只有40%~50%[12]，其中肯定有相當(dāng)數(shù)量的優(yōu)良單倍體植株不能得到利用。%，受材料和環(huán)境因素個(gè)別材料自然加倍率低。參考文獻(xiàn)：[1]葛臺(tái)明，余毓君，小麥花藥培養(yǎng)的基因型和培養(yǎng)基效應(yīng)研究，華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1996年10月第15卷第5期[2] 王茂良, . 北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào). 2010 年10 月第25卷 第3 期[3] 徐云碧，朱立煌. 分子數(shù)量遺傳學(xué)[M]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1994.[4] 康明輝，海燕. 利用花藥培養(yǎng)構(gòu)建小麥DH 群體[J]. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007（12）：55 56.[5] 胡冬梅，影響小麥花藥愈傷組織誘導(dǎo)和植株再生的因素，青海農(nóng)林科技，2000年第4期[6]張超美，張?jiān)佘娋瑥埿又?，李梅，提高小麥花藥培養(yǎng)花粉植株誘導(dǎo)率的途徑，湖北農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，1995年04期[7] 景蕊蓮，昌小平，賈繼贈(zèng)，胡榮海，用花藥培養(yǎng)創(chuàng)建小麥加倍單倍體作圖群體，生物技術(shù)9（3）：48，1999[8] 歐陽俊聞, 周淑明 ,賈雙娥 .小麥花藥培養(yǎng)對(duì)培養(yǎng)溫度的反應(yīng),遺傳，5(5): 1416 1983[9] 宋運(yùn)賢，周素英，杜雪玲，花姝潔，魏平民， .2012年5月 第40卷 第5期[10] 葉興國(guó), 徐惠君 ,杜麗璞 , 1996（4）[11] 李景琦，王成社，鄒淑芳，小麥花藥培養(yǎng)中白化苗的發(fā)生和調(diào)控措施，西安聯(lián)合大學(xué)學(xué)報(bào)，2002年第5卷第2期[12] 吳彩鳳，鄧景陽，小麥單倍體植株幼穗離體培養(yǎng)自然加倍成功，農(nóng)業(yè)科技通訊