【正文】 加速穩(wěn)定性試驗(yàn)）中推薦的條件（75）。正如一個(gè)最近的研究報(bào)告所述，Venugopal和Singh（64）將這項(xiàng)試驗(yàn)適用范圍擴(kuò)展至可用于明膠原料的性能評(píng)價(jià)。這個(gè)試驗(yàn)的目的就是預(yù)先確定幾種不同來(lái)源的明膠原料中的哪一種在用于生產(chǎn)時(shí)導(dǎo)致產(chǎn)品溶出度降低的可能性最小。由不同的原料制成的明膠片放在光照培養(yǎng)箱中，同時(shí)也放在不同濃度的甲醛溶液中。這兩種加速法的試驗(yàn)結(jié)果是相同的。基于這些結(jié)果，有可能將不同來(lái)源的明膠原料按照它們發(fā)生交聯(lián)的潛在程度的大小進(jìn)行系統(tǒng)化。就是說(shuō)，每一種原料都被標(biāo)明當(dāng)其用于產(chǎn)品配方中時(shí)，能夠發(fā)生交聯(lián)問(wèn)題的程度。用于檢測(cè)明膠交聯(lián)程度和特性的技術(shù)沒(méi)有幾項(xiàng)技術(shù)可用于測(cè)定加速試驗(yàn)后的明膠片和配方或上市配方在其保存期內(nèi)發(fā)生明膠交聯(lián)的特性和程度。在本節(jié)中將一一描述這些技術(shù)。C13 核磁共振（C13 NMR）這一技術(shù)可用于研究交聯(lián)發(fā)生的機(jī)理和部位（63，7678）。這一技術(shù)檢測(cè)與甲醛反應(yīng)后賴氨酸賴氨酸、賴氨酸精氨酸、精氨酸精氨酸交聯(lián)中的氨基集團(tuán)。Gold等人使用C13NMR確定了胰酶（一種存在于胃腸道中的蛋白水解酶）可使交聯(lián)的明膠去極化（76）。傅立葉變換近紅外光譜（FTNIR）這一技術(shù)非常先進(jìn)，因?yàn)槠錂z測(cè)快速且對(duì)樣品無(wú)破壞。Gold等人報(bào)道怎樣用這一技術(shù)來(lái)監(jiān)測(cè)甲醛從填充在SEGCs的明膠殼內(nèi)的PEG中逸出（61，62）。將膠囊中填入含不同濃度甲醛的PEG溶液，室溫放置48小時(shí)。然后倒出膠囊內(nèi)容物，在NIR光譜儀上掃描膠囊殼，發(fā)現(xiàn)不同濃度甲醛產(chǎn)生的交聯(lián)數(shù)量與其NIR光譜存在線性關(guān)系。傅立葉變換紅外光譜（FTIR）Salsa等人報(bào)道了使用FTIR檢測(cè)與甲醛反應(yīng)后的明膠交聯(lián)（79）。在甲醛水溶液與明膠反應(yīng)的不同時(shí)間，其色譜圖記錄在溴化鉀的小球中。對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的解析涉及到對(duì)主要成份的回歸分析。已確定交聯(lián)反應(yīng)的發(fā)生以羥甲基賴氨酸的形成開(kāi)始，隨后形成羥甲基精氨酸鏈，最后產(chǎn)生賴氨酸精氨酸交聯(lián)。紫外和熒光色譜Ofner等人報(bào)道了一種化學(xué)分析方法，使用2,4,6三硝基苯磺酸（TNBS）試劑產(chǎn)生一個(gè)UV發(fā)色團(tuán)，在346nm處有吸收（14，60，80，81）。TNBS與明膠的主要氨基集團(tuán)的反應(yīng)確定了未交聯(lián)的氨基集團(tuán)的量，從而揭示出ε氨基集團(tuán)的損失量，即沉淀于交聯(lián)過(guò)程中的氨基集團(tuán)。另一項(xiàng)近期研究報(bào)道了使用熒光檢測(cè)描述與戊二醛（82）反應(yīng)的明膠的構(gòu)型變化。核磁共振成像（MRI）MRI方法用于研究明膠交聯(lián)是最近由Rochest Institute of 。（紐約，Rochest ）小組得出結(jié)論：此項(xiàng)技術(shù)可用于分析交聯(lián)后明膠的構(gòu)型和進(jìn)入明膠水骨架內(nèi)部的離子擴(kuò)散。監(jiān)測(cè)溶解性和溶出度用于檢測(cè)明膠交聯(lián)的另外方法就是測(cè)定明膠片的溶解性和制劑的溶出度（64，83）。雖然這些測(cè)定并不能提供關(guān)于反應(yīng)機(jī)理或反應(yīng)部位的信息，也不能在分子水平上對(duì)交聯(lián)程度定量，但是它們可以給出一個(gè)大略的交聯(lián)程度大小的信息，因?yàn)槿芙庑曰蛉艹龆鹊臏p少與交聯(lián)的程度呈線性關(guān)系（64）。也在使用一些間接的方法測(cè)定處于未溶解狀態(tài)的明膠的量（如重量分析，蛋白質(zhì)含量測(cè)定：包括與BCA發(fā)生顯色反應(yīng)，然后在214nm處測(cè)UV吸收度。）（60，83）抑制明膠交聯(lián)的途徑在保護(hù)處方中含明膠的制劑使其在溶出性質(zhì)上不發(fā)生變化方面進(jìn)行了大量的努力。達(dá)到這一目的有許多方法，如使用添加劑和直接使用抑制劑（見(jiàn)表V）和控制濕度和光照（photostabilization）。表Ⅴ 抑制明膠交聯(lián)的試劑抑制劑制劑觀察到的結(jié)果參考文獻(xiàn)鹽酸半咔唑，鹽酸羥胺，吡啶，哌啶，甘油，對(duì)氨基苯甲酸未說(shuō)明交聯(lián)抑制劑85山梨醇作為增塑劑明膠薄片（B型膠）溶出度增加91鹽酸半咔唑（1%）L組氨酸（1%）檸檬酸（1%）減少交聯(lián)減少交聯(lián)減少交聯(lián)氨基乙酸（%w/w）配方溶出度有改善，但不能阻止明膠交聯(lián)86檸檬酸（%w/w）溶出度有改善，但不能阻止明膠交聯(lián)氨基乙酸（%w/w）和檸檬酸（%w/w）阻止明膠交聯(lián)使用B型膠有文獻(xiàn)指出B型膠比A型膠少交聯(lián)，但不幸的是未見(jiàn)詳細(xì)的研究報(bào)道（84）。因此可以做一些試驗(yàn)來(lái)進(jìn)行使用B型膠開(kāi)發(fā)更加穩(wěn)定的藥物處方的評(píng)價(jià)（84）。采取保護(hù)措施阻止醛類釋放或阻止醛類形成化合物如賴氨酸、苯胺、谷氨酰胺（glutamine），鹽酸羥胺（hydroxylamine hydrochloride）、對(duì)氨基苯甲酸、氨基乙酸和其它官能基團(tuán)如羰基清除劑，可阻止醛類與明膠的反應(yīng)從而抑制交聯(lián)（85）。甚至有報(bào)道說(shuō)如果原來(lái)存在于膠囊中的甲醛通過(guò)使用一種氨基酸——氨基乙酸（glycine）被清除后，這種氨基酸還可阻止或減少甲醛的進(jìn)一步產(chǎn)生（86）。另一種方法是阻止醛類的形成，通過(guò)調(diào)pH值來(lái)控制膠囊內(nèi)容物的降解。方法是使用羧酸如苯甲酸、富馬酸、馬來(lái)酸、檸檬酸，都對(duì)達(dá)到目的非常有效。實(shí)驗(yàn)表明氨基酸和緩沖液合用可顯著阻止薄膜的形成。典型的例子就是氨基乙酸與檸檬酸合用。直接使用抑制劑有些化合物達(dá)到直接抑制劑的作用，同時(shí)也發(fā)現(xiàn)它們有助于保護(hù)處方中含明膠的藥物制劑的溶出特性不發(fā)生變化。典型的例子有：鹽酸半咔唑（semicarbazole hydrochloride），鹽酸羥胺（piperazide hydrate）、吡啶、哌啶、甘油和對(duì)氨基苯甲酸（85，86）。控制濕度當(dāng)膠囊封存于PVC泡眼鋁塑包裝中時(shí)，因?yàn)殇X塑包裝隔絕濕度的能力非常小，所以膠囊的溶出特性會(huì)更加嚴(yán)重的受到影響。克服這種影響的最好方法是使用水分不能滲透的包裝系統(tǒng)。另外一個(gè)方法就是向硬膠囊填充內(nèi)容物中添加崩解劑。含有≥10%崩解劑的膠囊處方可以耐受高濕的貯存環(huán)境，推測(cè)其原因可能是膠囊內(nèi)容物的多孔性增加（87）。光穩(wěn)定化（photostabilization）Thoma報(bào)道了兩種使膠囊見(jiàn)光穩(wěn)定的方法：給明膠殼或內(nèi)容物染色；控制明膠殼的厚度，顆粒或粉末的大小和內(nèi)核的大小和高度（88）。已經(jīng)查明TiO2，氧化鐵和色素能夠?qū)庹找鸬慕宦?lián)起到很好的保護(hù)作用。％的姜黃素可使內(nèi)容物的半衰期升高3倍或更多。一些色素如FD＆C5號(hào)黃，1號(hào)藍(lán)和3號(hào)紅也能夠保護(hù)劑型不受光照的破壞。人造的氧化鐵也可達(dá)同樣效果，他可吸收波長(zhǎng)＜400nm的光，但是鐵的含量不可過(guò)多（不大于15ppm），因?yàn)闀?huì)導(dǎo)致軟膠囊掉色（45）。結(jié)論在過(guò)去的幾十年中，人們對(duì)外層含明膠的劑型溶出度降低的問(wèn)題已有了一個(gè)全面的看法。使人振奮的是涉及體內(nèi)生物利用度時(shí)，這一問(wèn)題并不是十分嚴(yán)重，除非制劑“收縮”嚴(yán)重或藥物有很窄的吸收窗（window of absorption）（46）。USP中的雙級(jí)溶出檢驗(yàn)法是一種很受歡迎的方法，因?yàn)樗梢詫⑸a(chǎn)廠家從失敗的溶出試驗(yàn)中挽救出來(lái)。不幸的是，雙級(jí)溶出檢驗(yàn)方法仍未被列入其他的藥典中。因此，如果按照USP以外的藥典制備的含明膠的制劑在標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的溶出試驗(yàn)失敗后可按USP重做。在這一內(nèi)容方面，世界上其余的藥典制定機(jī)構(gòu)一定要了解這個(gè)問(wèn)題當(dāng)前的發(fā)展情況，對(duì)明膠制劑的溶出檢測(cè)方法進(jìn)行必要的修改。按照他們制訂的標(biāo)準(zhǔn)，藥品生產(chǎn)廠家會(huì)把他們的興趣集中在挑選明膠原料方面，而很少將精力投入到交聯(lián)特性方面，這一過(guò)程可以很容易的用近來(lái)提出的試驗(yàn)?zāi)M的（64）?；蛘?，使用抑制劑（見(jiàn)表V）和其它方法諸如使用無(wú)醛的輔料使制劑穩(wěn)定。從最近報(bào)道的快速試驗(yàn)方法來(lái)研究配方交聯(lián)的可能性大小也是有幫助的。24