【正文】 加速穩(wěn)定性試驗）中推薦的條件（75）。正如一個最近的研究報告所述，Venugopal和Singh（64）將這項試驗適用范圍擴展至可用于明膠原料的性能評價。這個試驗的目的就是預先確定幾種不同來源的明膠原料中的哪一種在用于生產時導致產品溶出度降低的可能性最小。由不同的原料制成的明膠片放在光照培養(yǎng)箱中，同時也放在不同濃度的甲醛溶液中。這兩種加速法的試驗結果是相同的。基于這些結果，有可能將不同來源的明膠原料按照它們發(fā)生交聯的潛在程度的大小進行系統(tǒng)化。就是說，每一種原料都被標明當其用于產品配方中時，能夠發(fā)生交聯問題的程度。用于檢測明膠交聯程度和特性的技術沒有幾項技術可用于測定加速試驗后的明膠片和配方或上市配方在其保存期內發(fā)生明膠交聯的特性和程度。在本節(jié)中將一一描述這些技術。C13 核磁共振（C13 NMR）這一技術可用于研究交聯發(fā)生的機理和部位（63，7678）。這一技術檢測與甲醛反應后賴氨酸賴氨酸、賴氨酸精氨酸、精氨酸精氨酸交聯中的氨基集團。Gold等人使用C13NMR確定了胰酶（一種存在于胃腸道中的蛋白水解酶）可使交聯的明膠去極化（76）。傅立葉變換近紅外光譜（FTNIR）這一技術非常先進，因為其檢測快速且對樣品無破壞。Gold等人報道怎樣用這一技術來監(jiān)測甲醛從填充在SEGCs的明膠殼內的PEG中逸出（61，62）。將膠囊中填入含不同濃度甲醛的PEG溶液，室溫放置48小時。然后倒出膠囊內容物，在NIR光譜儀上掃描膠囊殼，發(fā)現不同濃度甲醛產生的交聯數量與其NIR光譜存在線性關系。傅立葉變換紅外光譜（FTIR）Salsa等人報道了使用FTIR檢測與甲醛反應后的明膠交聯（79）。在甲醛水溶液與明膠反應的不同時間，其色譜圖記錄在溴化鉀的小球中。對檢驗結果的解析涉及到對主要成份的回歸分析。已確定交聯反應的發(fā)生以羥甲基賴氨酸的形成開始，隨后形成羥甲基精氨酸鏈，最后產生賴氨酸精氨酸交聯。紫外和熒光色譜Ofner等人報道了一種化學分析方法，使用2,4,6三硝基苯磺酸（TNBS）試劑產生一個UV發(fā)色團，在346nm處有吸收（14，60，80，81）。TNBS與明膠的主要氨基集團的反應確定了未交聯的氨基集團的量，從而揭示出ε氨基集團的損失量，即沉淀于交聯過程中的氨基集團。另一項近期研究報道了使用熒光檢測描述與戊二醛（82）反應的明膠的構型變化。核磁共振成像（MRI）MRI方法用于研究明膠交聯是最近由Rochest Institute of 。（紐約，Rochest ）小組得出結論：此項技術可用于分析交聯后明膠的構型和進入明膠水骨架內部的離子擴散。監(jiān)測溶解性和溶出度用于檢測明膠交聯的另外方法就是測定明膠片的溶解性和制劑的溶出度（64，83）。雖然這些測定并不能提供關于反應機理或反應部位的信息，也不能在分子水平上對交聯程度定量，但是它們可以給出一個大略的交聯程度大小的信息，因為溶解性或溶出度的減少與交聯的程度呈線性關系（64）。也在使用一些間接的方法測定處于未溶解狀態(tài)的明膠的量（如重量分析，蛋白質含量測定：包括與BCA發(fā)生顯色反應，然后在214nm處測UV吸收度。）（60，83）抑制明膠交聯的途徑在保護處方中含明膠的制劑使其在溶出性質上不發(fā)生變化方面進行了大量的努力。達到這一目的有許多方法，如使用添加劑和直接使用抑制劑（見表V）和控制濕度和光照（photostabilization）。表Ⅴ 抑制明膠交聯的試劑抑制劑制劑觀察到的結果參考文獻鹽酸半咔唑，鹽酸羥胺，吡啶，哌啶，甘油，對氨基苯甲酸未說明交聯抑制劑85山梨醇作為增塑劑明膠薄片（B型膠）溶出度增加91鹽酸半咔唑（1%）L組氨酸（1%）檸檬酸（1%）減少交聯減少交聯減少交聯氨基乙酸（%w/w）配方溶出度有改善，但不能阻止明膠交聯86檸檬酸（%w/w）溶出度有改善，但不能阻止明膠交聯氨基乙酸（%w/w）和檸檬酸（%w/w）阻止明膠交聯使用B型膠有文獻指出B型膠比A型膠少交聯，但不幸的是未見詳細的研究報道（84）。因此可以做一些試驗來進行使用B型膠開發(fā)更加穩(wěn)定的藥物處方的評價（84）。采取保護措施阻止醛類釋放或阻止醛類形成化合物如賴氨酸、苯胺、谷氨酰胺（glutamine），鹽酸羥胺（hydroxylamine hydrochloride）、對氨基苯甲酸、氨基乙酸和其它官能基團如羰基清除劑，可阻止醛類與明膠的反應從而抑制交聯（85）。甚至有報道說如果原來存在于膠囊中的甲醛通過使用一種氨基酸——氨基乙酸（glycine）被清除后，這種氨基酸還可阻止或減少甲醛的進一步產生（86）。另一種方法是阻止醛類的形成，通過調pH值來控制膠囊內容物的降解。方法是使用羧酸如苯甲酸、富馬酸、馬來酸、檸檬酸，都對達到目的非常有效。實驗表明氨基酸和緩沖液合用可顯著阻止薄膜的形成。典型的例子就是氨基乙酸與檸檬酸合用。直接使用抑制劑有些化合物達到直接抑制劑的作用，同時也發(fā)現它們有助于保護處方中含明膠的藥物制劑的溶出特性不發(fā)生變化。典型的例子有：鹽酸半咔唑（semicarbazole hydrochloride），鹽酸羥胺（piperazide hydrate）、吡啶、哌啶、甘油和對氨基苯甲酸（85，86）?？刂茲穸犬斈z囊封存于PVC泡眼鋁塑包裝中時，因為鋁塑包裝隔絕濕度的能力非常小，所以膠囊的溶出特性會更加嚴重的受到影響?？朔@種影響的最好方法是使用水分不能滲透的包裝系統(tǒng)。另外一個方法就是向硬膠囊填充內容物中添加崩解劑。含有≥10%崩解劑的膠囊處方可以耐受高濕的貯存環(huán)境，推測其原因可能是膠囊內容物的多孔性增加（87）。光穩(wěn)定化（photostabilization）Thoma報道了兩種使膠囊見光穩(wěn)定的方法：給明膠殼或內容物染色；控制明膠殼的厚度，顆?；蚍勰┑拇笮『蛢群说拇笮『透叨龋?8）。已經查明TiO2，氧化鐵和色素能夠對光照引起的交聯起到很好的保護作用。％的姜黃素可使內容物的半衰期升高3倍或更多。一些色素如FD＆C5號黃，1號藍和3號紅也能夠保護劑型不受光照的破壞。人造的氧化鐵也可達同樣效果，他可吸收波長＜400nm的光，但是鐵的含量不可過多（不大于15ppm），因為會導致軟膠囊掉色（45）。結論在過去的幾十年中，人們對外層含明膠的劑型溶出度降低的問題已有了一個全面的看法。使人振奮的是涉及體內生物利用度時，這一問題并不是十分嚴重，除非制劑“收縮”嚴重或藥物有很窄的吸收窗（window of absorption）（46）。USP中的雙級溶出檢驗法是一種很受歡迎的方法，因為它可以將生產廠家從失敗的溶出試驗中挽救出來。不幸的是，雙級溶出檢驗方法仍未被列入其他的藥典中。因此，如果按照USP以外的藥典制備的含明膠的制劑在標準規(guī)定的溶出試驗失敗后可按USP重做。在這一內容方面，世界上其余的藥典制定機構一定要了解這個問題當前的發(fā)展情況，對明膠制劑的溶出檢測方法進行必要的修改。按照他們制訂的標準，藥品生產廠家會把他們的興趣集中在挑選明膠原料方面，而很少將精力投入到交聯特性方面，這一過程可以很容易的用近來提出的試驗模擬的（64）?；蛘撸褂靡种苿ㄒ姳鞻）和其它方法諸如使用無醛的輔料使制劑穩(wěn)定。從最近報道的快速試驗方法來研究配方交聯的可能性大小也是有幫助的。24