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西南大學(xué)[1194]生活中的dna科學(xué)答案-資料下載頁

2025-07-14 14:36本頁面
  

【正文】 5什么是轉(zhuǎn)錄組和轉(zhuǎn)錄組學(xué)參考答案:轉(zhuǎn)錄組是特定組織或細胞在某一發(fā)育階段或功能狀態(tài)下轉(zhuǎn)錄出來的所有RNA的集合,是研究細胞表型和功能的一個重要手段。轉(zhuǎn)錄組學(xué)是一門在整體水平上研究細胞中基因轉(zhuǎn)錄的情況及轉(zhuǎn)錄調(diào)控規(guī)律的學(xué)科。簡而言之,轉(zhuǎn)錄組學(xué)是從RNA水平研究基因表達的情況。5簡述RTPCR技術(shù)的概念及其原理。參考答案:RTPCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。 5簡述探針的種類。參考答案:(1)cDNA探針:通過逆轉(zhuǎn)錄獲取cDNA后,將其克隆與適當?shù)妮d體,通過擴增重組質(zhì)粒使cDNA得到大量擴增。提取質(zhì)粒后分離純化作為探針使用。它是目前應(yīng)用最為廣泛的一類探針。(2)基因組探針:從基因組文庫里篩選到一個特定的基因或基因片段的克隆后,大量擴增純化,切取插入片段,分離純化為探針。(3)寡核苷酸探針:根據(jù)已知的核酸順序,采用DNA合成儀合成一定長度的寡核苷酸片段作為探針。(4)RNA探針:采用基因克隆和體外轉(zhuǎn)錄的方法可以得到RNA或反義RNA作為探針。5簡述突變類型及其遺傳效應(yīng)?參考答案:突變類型:A. 點突變:DNA大分子上一個堿基的變異。分為轉(zhuǎn)換和顛換。B. 缺失:一個堿基或一段核苷酸鏈從DNA大分子上消失。C. 插入:一個原來沒有的堿基或一段原來沒有的核苷酸鏈插入到DNA大分子中間。D. 倒位:DNA鏈內(nèi)重組,使其中一段方向倒置。突變的遺傳效應(yīng)::錯義突變、無義突變、同義突變、移碼突變:一是使原來的剪接位點消失;二是產(chǎn)生新的剪接位點。 60、簡述獲得目的基因常用的幾種方法。參考答案:(1)直接從染色體DNA中分離:僅適用于原核生物、葉綠體和線粒體基因的分離,較少采用。(2)人工合成:根據(jù)已知多肽鏈的氨基酸順序,利用遺傳密碼表推定其核苷酸順序再進行人工合成。適應(yīng)于編碼小分子多肽的基因。(3)從mRNA合成cDNA:采用一定的方法釣取特定基因的mRNA,再通過逆轉(zhuǎn)錄酶催化合成其互補DNA(cDNA),除去RNA鏈后,再用DNA聚合酶合成其互補DNA鏈,從而得到雙鏈DNA。這一方法通常可得到可表達的完整基因。(4)利用PCR合成:如已知目的基因兩端的序列,則可采用聚合酶鏈反應(yīng)(polymerasechain reaction,PCR)技術(shù),在體外合成目的基因。(5)從基因文庫中篩選:首先建立基因組或cDNA文庫,利用探針從文庫中篩選目的克隆。窗體底端
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