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植物組織培養(yǎng)的一些注意事項(xiàng)-資料下載頁

2025-06-30 05:38本頁面
  

【正文】 長素下實(shí)現(xiàn)。2) 、影響試管內(nèi)生根的因素 (1) 、植物材料 不同植物、不同基因型、同一植株不同部位和不同年齡對分化根都有決定性因素。若試管里不生根不要完全從培養(yǎng)中去找原因,也應(yīng)在取材時考慮。不同植物的一般生根規(guī)律是:木本比草本難,成年樹比幼年樹難,喬木比灌木難。(2) 、基本培養(yǎng)基 大多數(shù)使用低濃度的MS培養(yǎng)基,其中不少使用1/2MS或1/3MS培養(yǎng)基。大量元素中有人認(rèn)為NH4+多可能不利于發(fā)根,生根需要P和K元素,但不宜太多;而Ca2+多數(shù)報(bào)道有利于根的形成于生長。微量元素對生根有利的是B和Fe。生根通常用1%~3%的蔗糖。(3) 植物生長調(diào)節(jié)劑 據(jù)報(bào)道單用一種生長素的占51..5%,%。a、愈傷組織分化根時使用NAA最多,~。使用IAA+~~。b、而胚軸、莖段、插枝、花梗等分化根時,使用IBA居首位??梢娚囵B(yǎng)多數(shù)使用生長素,大多以IAA、IBA、NAA單獨(dú)用或配合使用,或與低濃度激動素配合使用。NAA與細(xì)胞分裂素配合時摩爾比在(20~30):1為好。一般赤霉素、細(xì)胞分裂素、乙烯通常不利于發(fā)根,如與生長素配合,一般濃度宜低于生長素,ABA可能有助于發(fā)根,植物生長延緩劑多效唑(MET)對不定根的形成也有良好作用,~。(4) 、使用方法 將生根材料先在一定濃度植物生長調(diào)節(jié)劑中浸泡或培養(yǎng)一段時間,然后轉(zhuǎn)入無植物生長調(diào)節(jié)劑培養(yǎng)基中培養(yǎng),能顯著提高生根率。(5) 、其他物質(zhì) 間苯三酚、脯氨酸、核黃素、活性炭等等。(6) 、繼代培養(yǎng) 新梢生根能力隨繼代時間增長而能力增加,植物在培養(yǎng)初期不易生根。從試管苗長成的植株上去枝條比在一般植株上取的更易生根。(7) 、光照強(qiáng)度和光照時間對生根的影響十分復(fù)雜,結(jié)果不一。(8) 、pH值 ~。(9) 、溫度 16186。C ~25186。C。 試管外生根有些植物種類在試管內(nèi)難以生根,或有根但與莖維管束不相通,或根與莖聯(lián)系差,或有根無根毛,或吸收功能極弱不易成活,此時可采用試管外生根的方法,把生根和馴化過程聯(lián)系起來,即可大幅度降低成本,又可提高移栽成活率。試管外生根有三種方法:(1) 、在試管內(nèi)誘導(dǎo)根源基再移栽 (2) 、在生根小室進(jìn)行生根和煉苗 做一個生根小室,不用瓊脂和蔗糖,而用透氣又保濕的基質(zhì)如泥炭、蛭石、珍珠巖、苔蘚等,并要控制溫度、光照、采用人工噴霧,霧滴要細(xì)。(3) 、盆插和瓶插生根法 用罐頭瓶或盆內(nèi)裝有泥炭或腐殖土與細(xì)沙,每瓶插入20株或30株無根苗,~,加入1//2MS+~,,在一定溫度、光照及濕度下培養(yǎng),容易生根且成活率高而穩(wěn)定。有些植物可以把試管繁殖的嫩枝當(dāng)做微型插條,直接入土生根,也能成活。(二)、試管苗的移栽A、試管苗移栽后易于死亡的原因試管苗一般在高濕、弱光、恒溫下異氧條件下培養(yǎng),出瓶后若不保濕極易失水而萎蔫死亡。從形態(tài)解剖和生理功能兩方面分析其原因如下: 形態(tài)解剖方面:(1) 、根 無根、根與輸導(dǎo)系統(tǒng)不想一通、根無根毛或毛少。(2) 、葉 在高濕、弱光和異氧條件下,葉表保護(hù)組織不發(fā)達(dá),易于失水萎蔫。這是因?yàn)椋喝~表角質(zhì)層、蠟質(zhì)不發(fā)達(dá)或無、葉無表皮毛或無、葉解剖結(jié)構(gòu)稀疏易失水、葉片存在排水孔。 生理功能方面 (1) 、根無吸收功能或極低:試管苗根系吸收功能極低,僅為沙培苗的1/18,溫室苗的1/39,低濕度下葉片大量失水,而根系又不能有效地吸收補(bǔ)充,故極易萎蔫、干枯。(2) 、葉片極易散失水分:試管苗葉片無保護(hù)組織,加之細(xì)胞間隙大,氣孔開張大,移入低濕環(huán)境中失水極快。(3) 、試管苗氣孔不能關(guān)閉,開口過大,與溫室和大田生長的小植株氣孔結(jié)構(gòu)明顯不同,這是主要原因。另外試管苗葉片缺乏角質(zhì)和蠟質(zhì),葉片蒸騰較大。(4) 、試管苗葉光合作用能力極低:試管苗生活在含糖培養(yǎng)基中,光和氣體交換受阻,因此光合作用能力弱。B、提高試管苗移栽成活率的技術(shù)和措施 培育瓶生壯苗 凡生活能力強(qiáng)、小苗健壯有較發(fā)達(dá)根系的試管苗易于移栽和成活,倍性混亂和單倍體小苗、生長不良小苗、弱苗、老化苗、發(fā)黃苗及玻璃化苗則移栽成活率低或不易移栽成活。因此,培育壯苗是移栽能否成活的首要基礎(chǔ)。在培養(yǎng)基中加入多效唑(MET)、BCCC等植物延緩劑是培育壯苗的一種有效途徑。多效唑處理后的小苗?高度降低,從而使其矮壯?發(fā)根快,根數(shù)多,從而大大增加了根系吸收養(yǎng)料的能力?葉色濃綠,葉綠素含量增加,從而加強(qiáng)了其移栽后的自養(yǎng)能力。 促進(jìn)試管苗根系發(fā)展及功能的恢復(fù)(見前) 促進(jìn)莖葉保護(hù)組織的發(fā)生和氣孔功能的恢復(fù) 一般移栽試管苗時,開始時打開瓶口,逐漸降低濕度,并逐漸增加光照,進(jìn)行馴化,是新葉逐漸形成蠟質(zhì),產(chǎn)生表皮毛,降低氣孔口開度,逐漸恢復(fù)氣孔功能,減少水分散失,促進(jìn)新根發(fā)生,以適應(yīng)環(huán)境。一般情況下初始光照應(yīng)為日光的1/10,其后每3天增加10%,經(jīng)過1030d煉苗即可栽入大田,但一定要避免中午的強(qiáng)光。濕度按開始3d飽和濕度,其后每23d降低5%8%,直到與大氣相同。 嫁接 有些試管苗試管內(nèi)難生根或生根苗不能在生產(chǎn)上應(yīng)用,必須進(jìn)行嫁接,以解決生根和異砧結(jié)合問題。(1)、試管內(nèi)嫁接:難度較大,技術(shù)要求高,成活率低。(2)、試管外嫁接:九、植物組織培養(yǎng)商業(yè)性生產(chǎn)因注意的問題(一)、遺傳穩(wěn)定性問題(二)、玻璃化問題★(三)、污染問題(四)、市場和經(jīng)營問題~~~~~~17 / 17
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