【正文】 兩個車間各取一批成品進(jìn)行了光照降解試驗，用鋁箔包裝作為暗對照，分別在第0、5和10天取樣檢測。檢測結(jié)果見附件4。在4500LX光照10天，兩個車間的性狀、可見異物均符合規(guī)定，未發(fā)生顯著變化。表 17 光照試驗的比較結(jié)果車間試驗樣品酸堿度相關(guān)蛋白質(zhì)高分子蛋白質(zhì)含量測定原車間試驗品177。%177。%%177。%%177。%暗對照177。%177。%%177。%%177。%新車間試驗品177。%177。%%177。%%177。%暗對照177。%177。%%177。%%177。%和暗對照相比，兩個車間的酸堿度、高分子蛋白質(zhì)、含量均未發(fā)生顯著變化，相關(guān)蛋白有少許增長，兩個車間產(chǎn)品沒有顯著差異。 加速穩(wěn)定性成品6個月的加速穩(wěn)定性考察結(jié)果和老車間歷史數(shù)據(jù)進(jìn)行了比較（見圖 8），可以得出如下結(jié)果：1) 性狀：所有批次在考察過程中均為無色澄清液體；鑒別、無菌、酸堿度及細(xì)菌內(nèi)毒素等指標(biāo)均符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。2) 相關(guān)蛋白含量均符合規(guī)定，兩個車間相關(guān)蛋白的增長速率一致。3) 高分子蛋白質(zhì)在加速條件下，兩車間增長速率一致。4) 蛋白含量的變化趨勢一致。圖 8兩個車間加速穩(wěn)定性試驗比較 長期穩(wěn)定性成品6個月的長期穩(wěn)定性考察結(jié)果和老車間歷史數(shù)據(jù)進(jìn)行了比較，可以得出如下結(jié)果：1) 性狀：所有批次在考察過程中均為無色澄清液體；鑒別、無菌、酸堿度及細(xì)菌內(nèi)毒素等指標(biāo)均符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。2) 相關(guān)蛋白含量均符合規(guī)定，兩個車間相關(guān)蛋白的增長速率一致。3) 兩車間高分子蛋白質(zhì)在6個月考察期基本穩(wěn)定。4) 兩車間在6個月的考察期蛋白含量穩(wěn)定。5) 表 18 兩個車間成品6個月長期穩(wěn)定性數(shù)據(jù)比較車間批次相關(guān)蛋白質(zhì)高分子蛋白質(zhì)含量 (標(biāo)示量%)均值SD均值SD均值SD原車間1%%%%%%2%%%%%%3%%%%%%新車間1%%%%%%2%%%%%%3%%%%%% 半成品的對比研究結(jié)果（4IU）規(guī)格的3批工藝驗證半成品和制劑I車間相應(yīng)時間的3批同規(guī)格半成品（附件2）。兩個車間半成品的質(zhì)量均符合半成品的質(zhì)量要求，并且沒有顯著性差異。半成品的穩(wěn)定性研究結(jié)果顯示新車間半成品和老車間半成品穩(wěn)定性一致：在穩(wěn)定性研究時間內(nèi)，性狀和內(nèi)毒素均沒有變化，單位時間內(nèi)酸堿度、高分子蛋白質(zhì)、相關(guān)蛋白質(zhì)的變化相同。兩個車間的半成品均非常穩(wěn)定，即使放置延長至16個小時，半成品的酸堿度、高分子蛋白質(zhì)、相關(guān)蛋白質(zhì)產(chǎn)生微量變化，均能符合半成品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，兩個車間的半成品沒有顯著差異。第6章 可比性研究討論本文討論的注射用重組人生長激素是在原址增建車間，屬于變更場地，變更場地前后產(chǎn)品進(jìn)行的可比性證明通常包括一系列連續(xù)過程，最開始是產(chǎn)品質(zhì)量研究（部分研究或全面研究），必要時，還需要通過非臨床研究、臨床研究和/或藥物警戒研究加以支持。通過上面的比較研究可以發(fā)現(xiàn)，從產(chǎn)品的理化以及生物學(xué)活性檢測可以證明兩個車間的注射用重組人生長激素產(chǎn)品質(zhì)量沒有差異，不會對產(chǎn)品的安全性和有效性產(chǎn)生不利影響。通過全面的工藝驗證和比較，未發(fā)現(xiàn)兩個車間有顯著的差異。體內(nèi)生物活性檢測表明產(chǎn)品的活性也沒有顯著差異，因此認(rèn)為新車間的產(chǎn)品是安全、純凈、有效的，未改變體內(nèi)生物學(xué)活性。在注射用重組人生長激素的比較研究中最重要的是對原來的產(chǎn)品工藝進(jìn)行詳細(xì)分析，分析變更的來源和潛在影響的評估。廠房的變更應(yīng)不改變產(chǎn)品關(guān)鍵質(zhì)量屬性和關(guān)鍵工藝參數(shù)。廠房的設(shè)計可以滿足工藝要求，減少或消除產(chǎn)品質(zhì)量產(chǎn)生影響的因素。本次對于注射用重組人生長激素證明前后產(chǎn)品質(zhì)量沒有差異，是基于以下幾個前提：l 重組人生長激素的理化性質(zhì)以及體外/體內(nèi)生物活性都已采用先進(jìn)的方法進(jìn)行了明確表征。重組人生長激素是大腸桿菌表達(dá)產(chǎn)品，沒有糖基化等后翻譯結(jié)構(gòu)，它的一級、二級和三級結(jié)構(gòu)均有報道，采用目前國際上通用的一些檢測手段可以對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行確證，并可以和原產(chǎn)品進(jìn)行比較；其生物活性采用去腦垂體大鼠體重和脛骨法進(jìn)行檢測，是比較成熟和認(rèn)可的通行方法。產(chǎn)品的其他理化性質(zhì)也均有合適的方法進(jìn)行表征。l 重組人生長激素的菌種庫沒有變化。生物制品的起始物料對工藝雜質(zhì)和過程雜質(zhì)的類型產(chǎn)生影響，由于來源于同一個起始物料，因此降低了未知雜質(zhì)引入的可能?？梢酝ㄟ^比較新老車間過程中間體的質(zhì)量，來判斷工藝是否發(fā)生了不利于產(chǎn)品質(zhì)量的變化。l 在原址進(jìn)行擴(kuò)建，檢測、采購和倉儲沒有變化，在原有的質(zhì)量體系下，不涉及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢測方法的轉(zhuǎn)移，兩者分析數(shù)據(jù)在同一個實驗室的標(biāo)準(zhǔn)下得到的，避免了檢測實驗室不同而造成數(shù)據(jù)的偏差。本文比較用新車間20批原液和老車間進(jìn)行了質(zhì)量屬性的比較，比較了3批原液的穩(wěn)定性，證明兩者質(zhì)量的一致性。成品僅用3批新車間進(jìn)行了比較。藥品生產(chǎn)是一個持續(xù)的過程，對于新車間隨著生產(chǎn)的進(jìn)行需要更多批次的比較，證明目前的工藝是可以穩(wěn)定的得到符合規(guī)定的產(chǎn)品。本文以注射用重組人生長激素為例對變更場地的可比研究進(jìn)行了探討，通過合理的可比性研究設(shè)計和研究結(jié)果可以證明新車間產(chǎn)品和原產(chǎn)品的可比性，車間也通過了新版GMP的認(rèn)證。這為國內(nèi)廠房變更提供了一個思路，在保持關(guān)鍵工藝參數(shù)和關(guān)鍵質(zhì)量屬性不變的情況下進(jìn)行變更，通過變更前后工藝的比較可以證明兩者具有可比性。第7章 結(jié)論由于市場對于產(chǎn)品需求增大經(jīng)常導(dǎo)致了廠房變更。用生產(chǎn)注射用重組人生長激素廠房變更為案例清楚表明：如果設(shè)計合理，在符合cGMP原則的理念的指導(dǎo)下，通過產(chǎn)品質(zhì)量放行標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行嚴(yán)格的比較學(xué)研究證明了在中國廠房變更的可實現(xiàn)性。參考文獻(xiàn)[1] Jeannine S. Strobl, Micheal J. Thomas, Human Growth Hormone, Pharmacological Reviews, 1994, 46(1): 134[2] H. Cushing, Partial hypophysectomy for acromegaly with remarks on the function of the hypophysis. Ann. Surg., 1909, 50: 10031017[3] H. Cushing, The hypophysis cerebri: clinical aspects of hyperpituitarism and of hypopituitarism. JAMA,1909, 53: 249255[4] H. Cushing, The function of the pituitary body. Am. J. Med. Sci., 1910, 139:437484[5] Evans, H. M., and Long, J. A., The effect of the anterior lobe administered intraperitoneally upon growth, maturity and oestrus cycles of the rat. Anat. Rec., 1921, 21: 62—65[6] Smith, P. E., The disabilities caused by hypophysectomy and their repair. JAMA, 1927, 88: 158161[7] Cuthbertson, D. P., Shaw, G. B., and Young, F. G., The anterior pituitary gland and protein metabolism. II. The influence of anterior pituitary extract on the metabolic response of the rat to injury. J. Endocrinol., 1941, 2:468474[8] Cuthbertson, D. P., Webster, T. A., and Young, F. G., The anterior pituitary gland and protein metabolism. I. The nitrogenretaining activity of anterior lobe extracts. J. Endocrinol., 1941, 2:459467[9] Li, C. H., and Evans, H. M., The isolation of pituitary growth hormone. Science, 1944, 99: 183184[10]Bennet, L. L., Weinberger, H., Escamilla, R., Margen, S., Li, C. H., and Evans, H. M., Failure of hypophyseal growth hormone to promote nitrogen storage in a girl with hypophyseal dwarfism. J. Clin. Endocrinol., 1950, 10: 492495[11]Li, C. H., and Papkoff, H., Preparation and properties of growth hormone from human and monkey pituitary glands. Science, 1956, 124:12931294[12]Li, C. H., Properties of and structural investigations on growth hormone isolated from bovine, monkey and human pituitary glands. Fed. Proc., 1957, 16: 775783[13]Raben, M. S., Preparation of growth hormone from pituitaries of man and monkey. Science, 1957, 125:883884[14]Li, C. H., Properties of and structural investigations on growth hormone isolated from bovine, monkey and human pituitary glands. Fed. Proc., 1957, 16: 775783[15]Raben, M. S., Treatment of a pituitary dwarf with human growth hormone. J. Clin. Endocrinol. Metab., 1958, 18:901903[16]Frasier, S. D., Human pituitary growth hormone (hGH) therapy in growth hormone deficiency. Endocr. Rev., 1983, 4:155170[17]Martial, J. A., Hallewell, R. A., and Baxter, J. D., Human growth hormone: plementary DNA cloning and expression in bacteria. Science, 1979, 205:602607[18]Brow, P., Gajdusek, C., Gibb, ., and Asher, ., Potential epidemic of CreutzfeldtJakob disease from human growth hormone therapy. N. Engl. J. Med., 1985, 313:728731[19]Leung, ., Spencer, ., Cachianes, G., Hammonds, ., Collins, C., Henzel, ., Barnard, R., Waters, . and Wood, ., Gwowht hormone recptor and serum binding protein purification, cloning and expression. Natrure. 1987, 330:537543[20]Walls, M., Growth hormone receptor cloned. Nature, 1987, 330:521522[21]De Vos, ., Ultsch, M., and Kossiakoff, ., Human growth hormone and extracellular domain of its receptor crystal structure of the plex. Science, 1992, 255:306312[22]Cunningham, ., and Wells, ., Higheresolution epitope mapping of hGHreceptor interactions by alaninescanning mutagenesis. Science, 1989, 244:10811085[23]Hirt, H., Kimelman, J., Birnbaum, M. J., Chen, ., Seeburg, ., Eberhardt, ., and Barta, A., The human growth hormone gene locus: structure, evolution, and allelic variations. DNA, 1987, 6:5970[24]Akinci, A., Kanaka, C., Eble, A., Aka