利用基因重組技術(shù)生產(chǎn)制備人生長(zhǎng)激素-資料下載頁(yè)
2024-11-07 22:21本頁(yè)面
【導(dǎo)讀】由191個(gè)氨基酸組成的多肽，其基本功能是能促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成、促進(jìn)骨骺。生長(zhǎng)發(fā)育，即促進(jìn)生長(zhǎng)及與其他激素共同控制新陳代謝。生長(zhǎng)激素是刺激線性或?？v向生長(zhǎng)的主要激素，在矮小癥治療方面表現(xiàn)為促進(jìn)肌肉組織增加，身高增長(zhǎng)，GH尚有加速傷口愈合,刺激成纖維細(xì)胞分裂和膠原形成。激巨噬細(xì)胞分化成熟,加強(qiáng)抗感染能力。大手術(shù)和燒傷病人均處于高度應(yīng)激狀態(tài),在一般常規(guī)給予葡萄糖、脂。應(yīng)用GH后免疫球蛋白含量較術(shù)前稍有提高,而且傷口感染率低。病人中應(yīng)用除蛋白質(zhì)合成升高外,尚見(jiàn)到游離脂肪酸濃度增高。此外，hGH還可應(yīng)用于短小腸綜合征,改善肌體對(duì)腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物的耐受性,后經(jīng)各國(guó)不斷改進(jìn)產(chǎn)品。為有效降低somatrem用藥導(dǎo)。素完全一致的基因重組人生長(zhǎng)激素。素抗體卻幾乎不再出現(xiàn)?，F(xiàn)它們已在世界各國(guó)銷售，而目前臨床所用的最主要的?；蛘咄ㄟ^(guò)探明目的基因所含的遺傳密碼及其排列順序。冰浴降溫，得重組質(zhì)粒pSMGH混合物。
【正文】 ℃下加冷乙醇， 5℃放置過(guò)夜，次日傾出上清液，下層懸浮液于 4000r/min離心 10min，收集沉淀，沉淀用 3 倍體積（㎏ /L）丙酮洗滌 3 次，真空干燥。按每克干粉用 50 mL ℃下攪拌抽提 2h，立即用 5mol/LHCl溶液調(diào) pH 至 ， 4000r/min 離心 10min，除去沉淀，上層液濾清，超濾濃縮得 hGH 抽提液 （六） GH 精制純化和凍干 取 SephadexG100 柱，用 ,，然后將上述 hGH 溶液上柱進(jìn)行凝膠過(guò)濾層析，再用平衡緩沖液以同樣流速洗滌和洗脫，按體積分部收集，合并含 hGH 洗脫液。另取 DEAESepharose 柱，用 、。另將上述含 hGH 的洗脫液用 5mol/LHCl 溶液調(diào)至 、然后上樣 DEAESepharose 柱進(jìn)行離子交換層析，先用平衡緩沖液洗柱，再用含 ,的 ,，并按體積分部收集，合并含hGH 洗脫液。用分子質(zhì)量截留值 10000D 的超濾膜超濾洗滌脫鹽并濃縮，然后用1mol/L 醋酸調(diào) pH 至 。另將 CMC（ CM23）柱用含 1%正丁醇的 ， 醋酸銨緩沖液平衡后，將含 hGH 的 溶液上柱進(jìn)行離子交換層析，并用,，再用含 1mol/LNaCl 的醋酸緩沖液以同樣速度進(jìn)行梯度洗脫，并按體積分部收集，合并含 hGH 的洗脫液，用分子質(zhì)量截留值 10000D 的超濾膜超濾濃縮和洗滌，得 hGH精品，分裝、凍干后即得 hGH 成品 [4]。 得到的原料藥半成品可以在 20℃ 下長(zhǎng)期存放。 綜上所述 ， 過(guò)去 rhGH 僅用于對(duì)兒童的促生長(zhǎng)。 而且 垂體來(lái)源困難，價(jià) 格昂貴。 使生長(zhǎng)激素的治療應(yīng)用和研究深受限制。 隨著基因工程重組人生長(zhǎng) ( rhGH) 的開(kāi)發(fā)應(yīng)用 ,使 rhGH 在治療上有突破進(jìn)展 , 其效應(yīng)可作用于全身各系統(tǒng)的靶組織。 雖然基因重組技術(shù)生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素生產(chǎn)過(guò)程較繁 ，但還是在 臨床應(yīng)用 方面有良好的應(yīng)用前景。 參考文獻(xiàn) [1]楊萍 ,孟繁波 ,何敏等 。 人重組生長(zhǎng)激素治療充血性心力衰竭 [J ] .吉林大學(xué)學(xué)報(bào) (醫(yī)學(xué)版 ) ,2020 ,28 (6) :642～ 643。 [2]柴家科 ,郝岱峰 ,吳焱秋 . 嚴(yán)重?zé)齻颊咝g(shù)后應(yīng)用重組人生長(zhǎng)激素的代謝 [J] . 中華外科雜志 ,2020 ,40 (2) :107～ 111. [3]佚名 無(wú)組織上傳 。 2020 .08。 [4]王小利， 李宏高等 ， 生物制藥技術(shù) ， 科學(xué)出版社， 2020 136139
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