馬鈴薯m病毒重組cp抗血清的制備畢業(yè)論文-資料下載頁
2025-06-26 08:51本頁面
【正文】 靠。4）安全性高。全過程不涉及病毒粒子，沒有造成病毒擴散的隱患。5）制備的抗血清效價高。6）花費低。本研究實現(xiàn)了PVMCP基因的高效原核表達(dá)；優(yōu)化了PVM重組CP純化體系。創(chuàng)新點在于利用重組CP制備出了高效價抗血清，且制備的抗血清可以用于馬鈴薯M病毒的ELISA檢測。目前，未見重組CP抗血清用于PVM檢測的報道。 馬鈴薯病毒抗血清的生產(chǎn)與應(yīng)用在我國，馬鈴薯病毒抗血清的制備工作時斷時續(xù)，制備出的抗血清都滿足不了科研的需要。脫毒種薯生產(chǎn)應(yīng)用中，主要采用進(jìn)口抗血清或試劑盒對馬鈴薯病毒進(jìn)行檢測。應(yīng)用馬鈴薯病毒進(jìn)口檢測產(chǎn)品，不僅價格高，限制了應(yīng)用。在實際檢測中會發(fā)現(xiàn)必須不能及時獲得相關(guān)產(chǎn)品也是一種限制。另外，檢測實際也有保質(zhì)期，檢測試劑或試劑盒存放時間長了，其質(zhì)量也會受影響，抗血清的效價會變低。實現(xiàn)主要馬鈴薯病毒抗血清的國產(chǎn)化才是解決問題的根本之道。本研究利用重組CP成功制備出了高效價的抗血清，為實現(xiàn)基于重組CP多克隆抗體的DASELISA檢測技術(shù)的建立奠定了基礎(chǔ)，同時也為PVM的ELISA檢測及ELISA檢測試劑盒的國產(chǎn)化與大量生產(chǎn)提供了技術(shù)保障。本研究工作是總體研究的一部分，本實驗室的目標(biāo)是利用重組CP制備出6種主要病毒的特異性抗血清。重組CP途徑不僅具有穩(wěn)定可靠性，同時也具有技術(shù)難度低、成本也低的特點，通過該途徑制備出足量抗血清是切實可行的。致謝本論文是在導(dǎo)師郭寶太教授的悉心指導(dǎo)下完成的，從課題的選題、方案的設(shè)計與實驗的具體操作到論文的完成都傾注了導(dǎo)師的心血。導(dǎo)師淵博的知識、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度以及對于科學(xué)不斷追求的精神讓我受益匪淺，并給我很大啟迪。在論文試驗階段以及論文寫作階段，導(dǎo)師給我提出了嚴(yán)格的要求，引導(dǎo)我不斷開闊思路，鼓勵我大膽創(chuàng)新。在論文完成之際，謹(jǐn)向我的導(dǎo)師致以最誠摯的感謝！在實驗和論文的完成過程中師姐辛佳、師兄宋志成給予了我專業(yè)知識以及實驗方面的幫助，師姐師兄的認(rèn)真負(fù)責(zé)將成為我日后學(xué)習(xí)工作的榜樣，在此特別感謝！值此論文完成之際，謹(jǐn)向所有幫助、支持過我的老師與同學(xué)致以最誠摯的謝意！參考文獻(xiàn)：[1] Jansky S，Jin L，Xie K，Xie C，Spooner D. Potato production and breeding in China. Potato Research，2009, 52 (1)：57–65.[2]SolomonBlackburn R M, Barker H. Breeding virus resistant potatoes（Solanum tuberosum）：A review of traditional and molecular approaches. Heredity, 2001, 86 (1)：17–35.[3] Gilbert J, Spillane C, Kavanagh T A, et al. Elicitation of Rxmediated resistance to PVX in potato does not require new RNA synthesis and may involve a latent hypersensitive response. Mol Plant Microbe Interact, 1998, 11 (8)：833–835.[4] Zavriev S K. The genome organization of potato virus M RNA[J]. Journal of General Virology, 1991, 72: 914.[5] Robert R M, Paul K, Keese M J, et a1．Evolution and molecular biology of Luteovirus [J]．Annu．Rev．Phytopathol, 1990, 28：341363.[6] Makkouk K, Kumari S. Molecular diagnosis of plant viruses [J]. Plant Disease, 2006, 24(2):135138.[7] Casper R. Detection of potato leafroll virus on potato and in Physalis floridana by enzymelinked innunosorbent assay (ELISA) [J]. Phytopathol. Z, 1977, 96: 97107.[8] Cerovska N, Moravec T, Plchova H,et al. Production of polyclonal antibodies to the rebinant Potato virus M (PVM) nonstructural triple gene block protein 1 and coat protein[J]. Journal of phytopathology 2012, 160:252254.[9] 魏廣彪．馬鈴薯卷葉病毒的分子鑒定與檢測技術(shù)[D]．福州：福建農(nóng)林大學(xué)，2005，5．[10] Nie X Z. Reverse transcription loopmediated isothermal amplification of DNA for detection of potato virus Y[J]. Plant Disease, 2005, (89):605610.[11] 呂典秋，李學(xué)湛，呂文河，等．NCMELISA檢測馬鈴薯Y病毒(PVY)技術(shù)的研究及應(yīng)用[J]．中國馬鈴薯，2006，20(6)：339304．[12] 白艷菊，范國權(quán)，高燕玲，等．馬鈴薯M病毒提純技術(shù)及抗血清制備．植物保護(hù)學(xué)報，2010,37（5）：479480．[13] 邱德義，楊雷亮，岳巧云．李痘病毒CP基因在大腸桿菌中的表達(dá)、純化及其抗血清制備．植物檢疫，2008，(5):271～274．[14] 鄧叢良，韓麗娟，燕照玲，等．，2005, 35（5）：442～445．[15] 孫現(xiàn)超，安德榮，薛楊．大麥條紋花葉病毒中國株CP基因克隆分析、原核表達(dá)及抗血清制備．植物病理學(xué)報，36（5）：397～403．17
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