wb原理、步驟及總結-資料下載頁
2025-06-25 23:50本頁面
【正文】 線 從－20℃取出1mg/ml BSA，室溫融化后，備用。 ，3個一組，分別標記為0mg，，。 按下表在各管中加入各種試劑。 0mg1mg/ml BSA－100mlG250考馬斯亮藍溶液1ml1ml1ml1ml1ml1ml 混勻后，室溫放置2min。在生物分光光度計上比色分析。 ?。?） 檢測樣品蛋白含量 ，每管加入4℃儲存的考馬斯亮藍溶液1ml。室溫放置30min后即可用于測蛋白。 ，混勻放置2分鐘可做為空白樣品，將空白倒入比色杯中在做好標準曲線的程序下按blank測空白樣品。 棄空白樣品，用無水乙醇清洗比色杯2次（），再用無菌水洗一次。 取一管考馬斯亮藍加95 ，混勻后靜置2min，倒入扣干的比色杯中按sample鍵測樣品。 注意：每測一個樣品都要將比色杯用無水乙醇洗2次，無菌水洗一次。可同時混合好多個樣品再一起測，這樣對測定大量的蛋白樣品可節(jié)省很多時間。測得的結果是5 ml樣品含的蛋白量。主要參考生物化學實驗教程 劉箭 主編分子生物學實驗指導 魏群 主編還有百度上搜的關于wb的方法步驟及試驗中出現(xiàn)的問題 熱致相分離法的英文縮寫TIPS，是Thermally Induced Phase ，將聚合物溶于高沸點，低揮發(fā)性的溶劑（又稱稀釋劑）中，形成均相溶液。然后降溫冷卻。在冷卻過程中，體系會發(fā)生相分離。這個過程分兩類，一類是固－液相分離（簡稱SL相分離），一類是液－液相分離（LL相分離）?？刂七m當?shù)墓に嚄l件，在分相之后，體系形成以聚合物為連續(xù)相，溶劑為分散相的兩相結構。這時再選擇適當?shù)膿]發(fā)性試劑（即萃取劑）把溶劑萃取出來，從而獲得一定結構形狀的聚合物微孔膜。與NIPS法相比，TIPS有許多優(yōu)點：它通過較為迅速的熱交換促使高分子溶液分相，而不是緩慢的溶劑一非溶劑交換；TIPS法避免了NIPS法（非溶劑致相分離法）由于存在溶劑一非溶劑交換，導致成膜液中部分溶劑參與了聚合物的凝膠化，所以孔隙率低的缺點；TIPS法可用于難以采用NIPS法制備的結晶性聚合物微孔濾膜的制備，而且TIPS法的影響因素要比NIPS法少，更容易控制；由TIPS法可獲得多種微觀結構，如開孔，閉孔，各同向性，各異向性，非對稱等。 2 熱致相分離制膜步驟 TIPS法制備微孔膜的步驟主要有溶液的制備（可連續(xù)也可間歇制備）、膜澆注和后處理3步。具體操作為：（1）聚合物與高沸點、低分子量的液態(tài)或固態(tài)稀釋劑混合，在高溫時形成均相溶液；（2）將混合物溶液制成所需要的形狀（平板、中空纖維或管狀）；（3）冷卻溶液使其發(fā)生相分離；（4）除去稀釋劑（常用溶劑萃取）；（5）除去萃取劑（蒸發(fā)）得到微孔結構。
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