【正文】 正庚烷中40℃反應36h。由表可知，微孔活性炭001120為載體固定化PSL的催化活性最高，反應36h 轉化率即達到理論轉化率(50%)，底物和產(chǎn)物的ee值均高達98%，顯示了良好的對映體選擇性；竹炭000227在相同條件下轉化率僅為20%，這可能是由于竹炭密度較小，附在正庚烷溶劑的表面，與游離酶接觸較少，固定化效果不好。游離酶在有機相容易聚集而失活所致；吸附劑的表面缺少吸附酶的孔道，故吸附固定PSL的效果不好，其他載體如煤基活性炭00111煤基活性炭00112中孔活性炭（吸附劑）00020中孔活性炭00106等固定化PSL的催化活性與微孔活性炭001120的相差不大，故進一步的進行比較。表33為PSL/Fe3O4@SiO2NH2拆分其他活性炭的催化性能，在正庚烷中40℃反應。由表32可知，固定化酶催化拆分微孔活性炭001120反應24h轉化率即已達到50%，而在相同條件下，固定化酶拆分煤基活性炭001118反應36 h才達到50%，產(chǎn)物的ee值略有有下降。以此類推，也即固定化PSL對微孔活性炭001120的活性和對映體選擇性要高于煤基活性炭00111煤基活性炭001121和中孔活性炭001066。表33PSL/Fe3O4@SiO2NH2 拆分其他仲醇催化劑時間(h)eeS(%)eeP(%)C(%)E微孔活性炭001120122436煤基活性炭001118122436煤基活性炭001121122436中孔活性炭001066122436 圖33產(chǎn)物隨反應時間的變化曲線圖33展示了在PSL/AC的催化作用下，1苯乙醇的轉化率等隨反應時間的變化趨勢。當反應時間達到128 h時，反應達到平衡，此時的轉化率達到拆分反應得到目的產(chǎn)物的最大理論轉化率50%，并且隨著反應時間延長至36h，轉化率仍然保持不變，體現(xiàn)了在正庚烷溶劑中固定化酶催化1苯乙醇的拆分反應過程中，（R）1苯乙醇為優(yōu)先選擇的對映體，完全反應生成（R）乙酸苯乙酯，而（S）1苯乙醇一直沒有參與反應。此后反應時間選擇為12 h。第四章 結論制備有機溶劑中高選擇性固定化脂肪酶，是獲得高對映體純度的手性藥物中間體的關鍵步驟。本文簡要探討了各種活性炭作為固定化酶催化劑載體拆分對映異構體的實驗研究，并將它們應用于拆分手性仲醇。以固定化酶催化拆分(R,S)1苯乙醇為典型反應，分別對載體制備條件、載體結構性質、固定化條件、表面嫁接基團性質及其反應條件等工藝參數(shù)對固定化酶催化性能的影響進行了系統(tǒng)的研究。通過研究，得到以下結論：不同的活性炭通過吸附固定的方法在有機溶劑中固定化脂肪酶并用于1苯乙醇的轉酯化拆分。實驗結果表明，固定化酶活性都大于游離酶活性，且固定化酶活性大小順序如下：PSL/微孔活性炭 PSL/中孔活性炭 PSL/煤基活性炭 PSL/吸附劑 PSL/竹炭，孔道的大小對脂肪酶的催化活性有著明顯的影響。這些結果說明了對于純的加以修飾的的活性炭，孔徑對酶催化活性有著重要的影響，孔徑適中，相應的酶活性越高。參考文獻[1] R. T. 莫里森, R. N. 博伊德. 有機化學(上冊，復旦大學有機化學教研組譯). 北京, 科學出版社, 1980, 94~104[2] 王普善. 加速手性技術的開發(fā)迎接世界制藥工業(yè)的手性挑戰(zhàn)(一). 中國新藥雜志, 1998, 7(5): 89~91[3] 汪秋安, 麻秋娟, 湯建國. 不對稱催化合成技術及其最新進展. 工業(yè)催化, 2003, 11(5): 1~6[4] 杜燦屏, 林國強, 施敏, 等. 手性與手性藥物研究中的若干科學問題. 中國科學基金, 2003, (2): 72~75[5] 莊英萍, 許建和. 手性藥物的酶法拆分研究近況. 中國藥學雜志, 1988, 33(4): 197~200[6] 李燦. 固體催化劑上手性化合物的不對稱合成. 精細化工原料及中間體, 2005, (8): 3~5[7] 劉鳳艷, 龐小琳, 鄭秩群等. 手性物質及其拆分方法. 遼寧化工, 2007, 36(11): 103~106 [8] 杜剛, 梁勇. 制備手性化合物的研究進展. 甘肅科技, 2007, 23(12): 85~86[9] 楊振云. 手性工業(yè). 中國醫(yī)藥工業(yè)雜志, 1996, 27(10): 469~475[10] 李雷鳴. 對映體制備性分離方法的進展. 化學通報, 1997, 2: 7~24[11] 戴立信. 手性技術的興起. 化學通報, 1995, 6: 15~21[12] 殷元麒, 蔣耀忠. 不對稱催化反應進展. 北京: 科學出版社, 2000, 1~15[13] Halldorsson A, Thordarson P, Kristinsson B, et al. Lipasecatalysed kinetic resolution of 1Oalkylglycerols by sequential transesterification. Tetrahedron: Asymmetry, 2004, 15(18):2893~2899 [14] Wu H Y, Xu J H, Tsang SF. Efficient resolution of chiral alcohol (RS)HMPC by enzymatic transesterification with vinyl acetate using surfactantmodified lipase. Enzyme Microb Technol, 2004, 34(11): 523~528[15] Fishman A, Eroshov M, DeeNoor, et al. A twostep enzymatic resolution process for largescale production of (S) and (R)ethyl3hydroxybutyrate. Biotech Bioeng, 2001, 74(3): 256~263[16] Ghanem A, Schurig V. Entrapment of Pseudomonas cepacia lipase with peracetylated βcyclodextrin in solgel: application to the kinetic resolution of secondary alcohols. Tetrahedron: Asymmetry, 2003, 14(17): 2547~2555 [17] 劉峻, 韓小茜, 李軍, 等. 高效液相色譜手性固定相拆分手性化合物. 化學試劑, 2006, 28(3): 172~174[18] 譚斌, 駱廣生, 汪家鼎, 等. 液膜及膜萃取拆分手性物質的研究進展. 現(xiàn)代化工, 2005, 25(增刊): 288~292[19] 李爽, 張鳳寶, 張國亮. 膜法分離手性異構體研究的進展. 膜科學與技術, 2005, 25(2): 85~90[20] Kirchener G., Scollar M. P., Klibanov A. M. Resolution of racemic mixtures via lipase catalysis in organic solvent. Journal of American Chemical Society, 1985, 107(24): 7072~7076[21] Margolin A. L., Klibanov A. M. Peptide synthesis catalyzed by lipases in anhydrous organic solvents. Journal of American Chemical Society, 1987, 109(12): 3802~3804[22] Breuer M., Ditrich K., Habicher T., et al. Industrial methods for the production of optically active intermediates. Angewandte Chemie International Edition, 2004, 43: 788~824[23] Schmid A., Dordick J. S., Hauer B., et al. Indutrial biocatalysis today and tomorrow, Nature, 2001, 409: 258~268致 謝本論文是在薛屏老師和房俊卓老師的悉心指導下完成，從論文選題、實驗方案的制定、實驗的安排到論文的撰寫、修改，每一步都傾注了導師的大量的心血和汗水。在此，謹向導師致以崇高的敬意和衷心的感謝！導師淵博的知識、嚴謹?shù)闹螌W態(tài)度、求真務實的風范、孜孜不倦的求知境界和忘我的工作熱情是我永遠不斷努力進取的動力；導師虛懷若谷的人格、真誠的為人態(tài)度、厚道的處事風格、嚴于律己寬以待人的品格令我終生難忘。感謝能源化工重點實驗室的領導、老師們給予了我無私幫助和指導，對他們表示深深的謝意！此外，在實驗過程中，得到了張立根學長的許多指導和幫助，感謝他為此付出了大量的精力和寶貴的時間，同時還得到了同我一起做實驗的同學們的幫助和支持，在此謹向他們表示衷心的感謝。正是得益于眾多老師、同學和朋友的熱情幫助，我的論文才得以順利完成，在此謹向我的導師和所有關心、幫助過我的老師、同學、朋友致以衷心的感謝！衷心感謝父母對我的養(yǎng)育和呵護!感謝親人對我的關心和愛護！感謝在百忙之中抽出寶貴的時間為我精心審閱論文的各位老師！袁節(jié)膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肅芅蕿袈羋膁蚈羀肁蒀蚇蝕襖莆蚇螂肀莂蚆羅袂羋蚅蚄膈膄蚄螇羈蒂蚃衿膆莈螞羈罿芄螁蟻膄膀螁螃羇葿螀裊膃蒅蝿肈羆莁螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃螞肂莈蒂螄羋芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羈莀蒈羃膇芆蕆蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇薄罿膄芃薃蠆羆艿薃袁節(jié)膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肅芅蕿袈羋膁蚈羀肁蒀蚇蝕襖莆蚇螂肀莂蚆羅袂羋蚅蚄膈膄蚄螇羈蒂蚃衿膆莈螞羈罿芄螁蟻膄膀螁螃羇葿螀裊膃蒅蝿肈羆莁螈螇芁芇莄袀肄膃莄羂艿蒂莃螞肂莈蒂螄羋芄蒁袆肀膀蒀罿袃薈葿螈聿蒄葿袁羈莀蒈羃膇芆蕆蚃羀膂蒆螅膅蒁薅袇羈莇薄罿膄芃薃蠆羆艿薃袁節(jié)膅薂羄肅蒃薁蚃芀荿薀螆肅芅蕿袈羋膁蚈羀肁蒀蚇蝕襖莆蚇螂肀莂蚆羅袂羋蚅蚄膈膄蚄螇羈蒂蚃衿膆莈螞