【正文】 讓培養(yǎng)菌正常的生長。要保持培養(yǎng)基的無菌狀態(tài)，消毒滅菌后不能讓培養(yǎng)基直接接觸外界空氣，防止空氣中的雜菌混入。9. 細(xì)菌、放線菌、酵母菌和霉菌四大類微生物在細(xì)胞結(jié)構(gòu)和菌落形態(tài)上的主要區(qū)別？細(xì)菌：單細(xì)胞原核生物，細(xì)胞由細(xì)胞壁，細(xì)胞膜。細(xì)胞質(zhì)和內(nèi)含物，核區(qū)組成，少數(shù)含有特殊結(jié)構(gòu)，如鞭毛、莢膜等。革蘭氏染色有G+、G 菌落一般呈現(xiàn)濕潤較光滑，較粘稠，易挑起，質(zhì)地均勻，菌落正反面及邊緣中心部位顏色一致，主要為裂殖少數(shù)為牙殖 放線菌：單細(xì)胞多核原核生物，革蘭氏染色顯陽性，細(xì)胞壁的成分主要為肽聚糖，細(xì)胞呈絲狀分枝，形成基內(nèi)菌絲，氣生菌絲干燥、不透明、表面呈致密的絲絨狀，上有一層彩色“干粉”難挑起，菌落正反面顏色不一致多數(shù)進(jìn)行孢子繁殖，少數(shù)以基內(nèi)菌絲分裂，形成孢子狀細(xì)胞進(jìn)行繁殖 霉菌：由菌絲構(gòu)成，直徑310μm，與酵母菌細(xì)胞類似，細(xì)胞壁主要有幾丁質(zhì)構(gòu)成，少數(shù)含有維生素菌落的形態(tài)較大，質(zhì)地疏松，外觀干燥，不透明，呈現(xiàn)或松或緊的蛛網(wǎng)狀、絨毛狀、棉絮狀，與培養(yǎng)基結(jié)合緊密，不易挑起氣生菌絲轉(zhuǎn)化成各種子實(shí)體，子實(shí)體上或里面產(chǎn)生無性或有性孢子，進(jìn)行繁殖。 酵母菌：細(xì)胞直徑為細(xì)菌10倍，是典型的真核微生物細(xì)胞主要由細(xì)胞壁，細(xì)胞膜，細(xì)胞核構(gòu)成。細(xì)胞壁分為三層，成分為酵母維生素，較濕潤，較透明，表面較光滑，容易挑起，菌落知底均勻，正反面以及邊緣與中央部位的顏色一致。無性繁殖：牙殖，裂殖，無性孢子；有性繁殖：產(chǎn)生子囊孢子。一、名詞解釋(每小題2分，共20分)營養(yǎng)缺陷型：某一野生型菌株發(fā)生突變(自然突變或人工誘變)后，失去合成某種(或某些)對該菌株生長必不可少的物質(zhì)(通常是生長因子如氨基酸、維生素)的能力，必須從外界環(huán)境獲得該物質(zhì)才能生長繁殖，這種突變型菌株稱為營養(yǎng)缺陷型。菌落：是在固體培養(yǎng)基上以母細(xì)胞為中心的肉眼可見的，有一定形態(tài)、構(gòu)造等特征的子細(xì)胞集團(tuán)。肽聚糖：由N乙酰葡萄糖胺和N乙酰胞壁酸交替連接成二糖鏈經(jīng)短肽相交聯(lián)而形成的網(wǎng)絡(luò)狀分子 ，是真細(xì)菌細(xì)胞壁特有的成分，構(gòu)成細(xì)菌細(xì)胞壁堅(jiān)硬的骨架部分。烈性噬菌體：一類侵入寄主細(xì)胞后，引起寄主細(xì)胞的代謝改變，在寄主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制其核酸、蛋白質(zhì)，裝配成新的噬菌體，最終使寄主細(xì)胞破裂而釋放大量子代噬菌體的噬菌體。有氧呼吸：是一種最普遍又最重要的生物氧化或產(chǎn)能方式，其特點(diǎn)是底物按常規(guī)方式脫氫或電子后，脫下的氫或電子（常以還原力[H]形式存在）經(jīng)完整的呼吸鏈傳遞，最終被外源分子氧接受，產(chǎn)生了水并釋放出ATP形式的能量。菌核：真菌生長到一定階段，菌絲體不斷地分化，相互糾結(jié)在一起形成一個(gè)顏色較深而堅(jiān)硬的菌絲體組織顆粒。必須利用有機(jī)碳源的微生物。一步生長曲線：測定噬菌體侵染和成熟病毒體釋放的時(shí)間間隔, 并用以估計(jì)每個(gè)被侵染的細(xì)胞釋放出來的新的噬菌體粒子的數(shù)量的生長曲線, 稱為一步生長曲線。定量描述毒性噬菌體生長規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線。類毒素：細(xì)菌的外毒素經(jīng)甲醛脫毒（％～％）后仍保留原有的免疫原性的預(yù)防用的生物制品。朊病毒：又稱蛋白質(zhì)侵染因子。朊病毒是一類能侵染動物并在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制的小分子無免疫性疏水蛋白質(zhì)。抗原：抗原是指一種能刺激人或動物機(jī)體產(chǎn)生抗體或致敏淋巴細(xì)胞，并能與這些產(chǎn)物在體內(nèi)或體外發(fā)生特異性反應(yīng)的物質(zhì)?？乖哂忻庖咴院头磻?yīng)原性兩種性質(zhì)。得分二、是非題(每小題1分，共10分；對“√”錯“X”)（ ）立克次氏體、支原體和衣原體均為專性活細(xì)胞寄生的生物。 （√ ）發(fā)酵作用的最終電子受體是有機(jī)化合物，呼吸作用的最終電子受體是無機(jī)化合物。（√ ）一切好氧微生物都含有超氧化物歧化酶。（ ）根據(jù)培養(yǎng)器內(nèi)菌體生長的濁度，通過光電系統(tǒng)來控制培養(yǎng)基流速的連續(xù)培養(yǎng)稱為恒化培養(yǎng)。（√ ）鞭毛與菌的趨避性運(yùn)動有關(guān)。（ ）當(dāng)培養(yǎng)基中含有葡萄糖和乳糖時(shí)，大腸桿菌只利用葡萄糖。（ ）單純擴(kuò)散不能進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸，而促進(jìn)擴(kuò)散則能進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸。（√ ）青霉素的抑制作用在于它干擾肽聚糖單體間肽橋的形成，從而抑制肽聚糖的合成。（√ ）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)中，無溶血現(xiàn)象出現(xiàn)稱補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)陽性，說明樣品中有抗原存在。 （ ）干擾素是一種具有廣譜抗病毒活性的蛋白質(zhì)，它能直接與病毒的mRNA作用使之降解，從而抑制病毒的增殖。得分三、填空題(，共10分) 生物體內(nèi)葡萄糖被降解成丙酮酸的四種途徑是 HMP 、 EMP 、 ED 和 PK或HK。放線菌的菌絲可分為 基內(nèi)菌絲____、__氣生菌絲____和__ 孢子絲 。亞病毒可以分為____類病毒__、__擬病毒____和 脘病毒 三類。伍斯以rRNA為生物分子進(jìn)化尺，將細(xì)胞生物分為 細(xì)菌、 真核生物 和 古生菌 。微生物生長繁殖所需六大營養(yǎng)要素是碳源、氮源、能源、無機(jī)鹽、生長因子和水等。紫外線照射能使DNA相鄰堿基形成__嘧啶二聚體_，從而導(dǎo)致DNA復(fù)制產(chǎn)生錯誤，用紫外線誘變微生物后應(yīng)在__紅光或暗處___條件下進(jìn)行，以防止__光復(fù)活__現(xiàn)象的產(chǎn)生。得分四、選擇題(，共10分)（B ）微生物間的互生關(guān)系如纖維素分解細(xì)菌與：A. 紫硫細(xì)菌 B. 自生固氮菌 C. 綠硫細(xì)菌 D. 硝化細(xì)菌（D ）擬病毒的侵染對象是：A. 高等植物 B. 高等動物 C. 動物病毒 D. 植物病毒長江大學(xué)試卷 院(系、部) 專業(yè) 班級 姓名 學(xué)號 …………….…………………………….密………………………………………封………………..…………………..線……………………………………..（C ）實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)放線菌的培養(yǎng)基是： （B ）多數(shù)霉菌細(xì)胞壁的主要成分為 （A ）運(yùn)到細(xì)胞膜外的肽聚糖單體要進(jìn)一步合成肽聚糖網(wǎng)套，其合成的引物為A. Park核苷酸 （C ）能通過ED途徑進(jìn)行細(xì)菌酒精發(fā)酵的菌種是： （A ）一般酵母菌適宜的生長pH值為：A. ～ ～ C ～ ～（D ）根霉和毛霉在形態(tài)上的不同點(diǎn)是： （A ）在大腸桿菌的乳糖操縱子模型中，其中真正對乳糖代謝的三個(gè)酶基因的表達(dá)起負(fù)調(diào)控作用的下列哪個(gè)物質(zhì)：A．lacI基因產(chǎn)物 B. cAMPCAP蛋白質(zhì)復(fù)合物 （CAP或CRP） （B ）人工接種卡介苗是屬于: 得分五、填表題 (，共3分)5. 滅菌方法6. 使用溫度7. 作用時(shí)間8. 應(yīng)用舉例9. 巴斯德消毒法（新式高溫瞬時(shí)法）10. 72℃11. 15 S12. 牛奶13. 高壓蒸汽滅菌14. 121℃15. 15～20 min16. 實(shí)驗(yàn)室用培養(yǎng)基17. 干熱滅菌18. 160℃19. 2 h20. 玻璃器皿21. 連續(xù)加壓滅菌（連消法）22. 135～140℃23. 5～15 S24. 發(fā)酵工廠用培養(yǎng)基得分六、簡答題 (本大題共6小題，共37分)試述革蘭氏染色的原理。（本小題6分） 答：通過結(jié)晶紫液初染和碘液媒染后，在細(xì)菌的細(xì)胞膜內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。（1分）G+菌由于其細(xì)胞壁較厚，肽聚糖網(wǎng)層次多和交聯(lián)致密，故遇脫色劑乙醇處理時(shí)，因失水而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇的處理不會溶出縫隙，因此能把結(jié)晶紫和碘的復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其保持紫色。（）而G菌因其細(xì)胞壁薄，外膜層類脂含量高，肽聚糖層薄和交聯(lián)度差，遇脫色劑乙醇后，以類脂為主的外膜迅速溶解，這時(shí)薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物的溶出，因此細(xì)胞退成無色，這時(shí)，再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染，就使G菌呈紅色，而G+菌仍為紫色。（）試說明單細(xì)胞微生物的生長曲線，并指明各期的特點(diǎn)，及如何利用微生物的生長規(guī)律來指導(dǎo)工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)？（本小題9分）答：單細(xì)胞微生物典型的生長曲線至少可以分為延滯期、對數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期等四個(gè)生長時(shí)期。延滯期(lag phase) ：是指把少量微生物接種到新培養(yǎng)液剛開始的一段時(shí)間細(xì)胞數(shù)目不增加的時(shí)期，甚至細(xì)胞數(shù)目還可能減少。延滯期有如下特點(diǎn)：1）生長的速率常數(shù)為零。2）細(xì)胞的體積增大，DNA含量增多為分裂作準(zhǔn)備。3）合成代謝旺盛，核糖體、酶類和的合成加快，易產(chǎn)生誘導(dǎo)酶。4）對不良環(huán)境敏感。（） 對數(shù)生長期(log Phase) ：又叫指數(shù)期，指在生長曲線中，緊接著延滯期后的一段時(shí)期。此時(shí)菌體細(xì)胞生長的速率常數(shù)R最大，分裂快，細(xì)胞每分裂繁殖一次的增代時(shí)間（即代時(shí)，generationtime）短，細(xì)胞進(jìn)行平衡生長，菌體內(nèi)酶系活躍，代謝旺盛，菌體數(shù)目以幾何級數(shù)增加，群體的形態(tài)與生理特征最一致，抗不良環(huán)境的能力強(qiáng)。（）穩(wěn)定生長期(stationary phase) ：又叫最高生長期或恒定期。處于穩(wěn)定期的微生物其特點(diǎn)是新繁殖的細(xì)胞數(shù)與衰亡細(xì)胞數(shù)幾乎相等，即是正生長與負(fù)生長達(dá)動態(tài)平衡，此時(shí)生長速度逐漸趨向于零。穩(wěn)定期的微生物，在數(shù)量上達(dá)到了最高水平，產(chǎn)物的積累也達(dá)到了高峰，這時(shí)，菌體的總產(chǎn)量與所消耗的營養(yǎng)物質(zhì)之間存在著一定關(guān)系。（）衰亡期(decline或death phase) ：穩(wěn)定期后，微生物死亡率逐漸增加，以致死亡數(shù)大大超過新生數(shù)，群體中活菌數(shù)目急劇下降，出現(xiàn)了“負(fù)生長”（R為負(fù)值），此階段叫衰亡期。這時(shí)，細(xì)胞形態(tài)多樣，例如產(chǎn)生很多膨大、不規(guī)則的退化形態(tài)；有的細(xì)胞內(nèi)多液泡，革蘭氏染色反應(yīng)為陽性的變成陰性；有的微生物因蛋白水解酶活力的增強(qiáng)發(fā)生自溶（autolysis）；有的微生物在這時(shí)產(chǎn)生抗生素等次生代謝產(chǎn)物；對于芽孢桿菌，芽孢釋放往往也發(fā)生在這一時(shí)期。（）生長曲線的制作在實(shí)踐中的指導(dǎo)意義：在工業(yè)發(fā)酵和科學(xué)研究中遲緩期會增加生產(chǎn)周期而產(chǎn)生不利影響，因此需采取必要措施縮短遲緩期。對數(shù)期的培養(yǎng)物由于生活力強(qiáng)，因而在生產(chǎn)上普遍用作“種子”，對數(shù)期的細(xì)胞常常用來進(jìn)行生物化學(xué)和生理學(xué)的研究，生產(chǎn)上如以獲菌體為目的，該期最好。穩(wěn)定期是積累代謝產(chǎn)物的重要階段，如某些抗生素的大量形成就在此時(shí)期，因此如果及時(shí)采取措施，補(bǔ)充營養(yǎng)物或去除代謝物或改變條件，可以延長穩(wěn)定期以獲得更多的菌體或代謝產(chǎn)物。（）長江大學(xué)試卷 院(系、部) 專業(yè) 班級 姓名 學(xué)號 …………….…………………………….密………………………………………封………………..…………………..線……………………………………..簡述原核微生物與真核微生物的區(qū)別？（本小題7分）答：原核微生物：細(xì)胞較?。ǎ患?xì)胞壁含有肽聚糖（）；沒有真正的細(xì)胞核，沒有核膜和核仁（）；細(xì)胞質(zhì)中不含細(xì)胞器，但有間體和聚－b－羥丁酸核糖體為70S（）。真核微生物： 細(xì)胞較大（）；細(xì)胞壁含纖維素，幾丁質(zhì)（）；有完整的細(xì)胞核，有核膜和核仁（）；細(xì)胞質(zhì)中含細(xì)胞器如線粒體、高爾基體等，不含間體。核糖體為80S（）。試述病毒的增殖過程？（本小題7分）答：病毒粒子感染宿主細(xì)胞后進(jìn)行增殖產(chǎn)生大量子代病毒，導(dǎo)致宿主細(xì)胞破裂死亡，其增殖過程分為6個(gè)連續(xù)步驟（）（1）吸附：吸附是病毒表面蛋白與細(xì)胞受體特異性的結(jié)合，導(dǎo)致病毒附著于細(xì)胞表面，這是病毒感染的第一步。（）（2）侵入：病毒的核酸或整個(gè)病毒粒子進(jìn)入宿主細(xì)胞的過程。不同的病毒侵入宿主細(xì)胞的方式不一樣。（）（3）脫殼：病毒侵入后，病毒的包膜和／或殼體除去而釋放出病毒核酸。（）（4）生物合成：核酸的復(fù)制、mRNA的轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)的合成。包括早期轉(zhuǎn)錄和晚期轉(zhuǎn)錄。（）（5）裝配：在病毒感染的細(xì)胞內(nèi)，新合成的毒粒結(jié)構(gòu)組分以一定的方式結(jié)合，組裝成完整的新病毒粒子的過程為裝配。 （）（6）釋放：成熟病毒粒子從被感染細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞外的過程稱為釋放。（） 微生物培養(yǎng)過程中pH值變化的規(guī)律如何？如何調(diào)整？（本小題5分）答： 1)在微生物的培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基中的糖類、脂肪等有機(jī)物經(jīng)微生物分解，氧化成有機(jī)酸，使pH值下降；（）單擺質(zhì)脫羧成胺類而使pH值上升（），硫酸銨等無機(jī)鹽在微生物代謝過程中由于銨離子被選擇吸收，留下硫酸根而使pH值下降（），硝酸鈉等無機(jī)鹽在微生物代謝過程中由于硝酸根離子被選擇吸收，留下鈉離子而使pH值上升。（）在一般培養(yǎng)過程中，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長，pH值會下降，在碳氮比高的培養(yǎng)基中尤為明顯。（）2)調(diào)節(jié)措施：治標(biāo)：中和反應(yīng)，過酸時(shí)，加NaOH、Na2CO3等中和；過堿時(shí)，加HCl、H2SO4等酸中和（1分）；治本：過酸時(shí)，加適當(dāng)?shù)矗缒蛩?、氨水、NaNO3等，提高通氣量；過堿時(shí)，加適當(dāng)碳源，如葡萄糖、乳酸、油脂等，降低通氣量。（1分）大腸桿菌在37℃ min繁殖一代，假設(shè)牛奶消毒后，大腸桿菌的含量為1個(gè)/100ml，請問按國家標(biāo)準(zhǔn)（30000個(gè)／ml），該消毒牛奶在37℃下最多可存放多少時(shí)間(min)？(假設(shè)該菌的生長為指數(shù)生長，lg2=，lg3=)（本小題3分）解：設(shè)每100ml初始菌數(shù)為N0＝1，經(jīng)過t時(shí)間后菌數(shù)為Nt =3106，代時(shí)G= min （）Nt = N0 2n，兩邊取對數(shù)后則lg Nt = lgN0 + nlg2 （）繁殖代數(shù)n =( lg Nt– l