【正文】 濃度的增加(從0,1,2,3,4,5μM)。0 2 4 6 Concetration/uM圖 48 DNA 滴定鈉離子緩沖溶液配合物 2 在 450nm 左右的吸收峰滴定趨勢(shì)圖，[Ru]=10uM,450nm左右的吸收峰變化是由于DNA濃度的增加(從0,1,2,3,4,5μM)。 釕配合物對(duì)端粒 G四鏈體與 DNA 作用強(qiáng)度的研究人類的端粒含有重復(fù)銜接的雙鏈DNA 序列(5 ′ TTAGGG): (5 ′CCCTAA) 。這些重復(fù)序共 32 頁 第 24 頁┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊裝┊┊┊┊┊訂┊┊┊┊┊線┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊列的DNA 可能形成特殊的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)。富G 的鏈能在K+ 、Na+等陽離子誘導(dǎo)下形成由堆積的四分體組成通過氫鍵穩(wěn)定的Gquadruplex 結(jié)構(gòu)。G四鏈體被認(rèn)為對(duì)體內(nèi)端粒酶延長(zhǎng)端粒具有負(fù)向調(diào)控作用。目前，G四鏈體被認(rèn)為是潛在的癌癥治療靶標(biāo)。通常認(rèn)為，多吡啶釕配合物與DNA 結(jié)合后，如果出現(xiàn)熒光增強(qiáng)現(xiàn)象，說明配合物與 DNA 之間發(fā)生了某種方式的結(jié)合。熒光增強(qiáng)幅度的大小，基本上可以反映出配合物與DNA 作用的強(qiáng)弱。因此，我們也可以根據(jù)作用強(qiáng)度差異表現(xiàn)出的熒光強(qiáng)度變化來識(shí)別不同種類的DNA。從圖4441412中可以看出，DNA 在鉀、鈉離子緩沖溶液中幾乎沒有發(fā)光。當(dāng)加入配合物2后，熒光顯著增強(qiáng)，推測(cè)產(chǎn)生以上結(jié)果是由于G四鏈體末端的四分體結(jié)構(gòu)便于平面芳香環(huán)堆積，所以熒光大幅增強(qiáng)。說明配合物與G四鏈體的鍵合能力很強(qiáng)。因此可以通過觀察熒光強(qiáng)度的變化情況來識(shí)別特異性端粒結(jié)構(gòu)，圖中變化情況還顯示K +環(huán)境下G 四鏈體的加入對(duì)配合物1，2 的熒光強(qiáng)度影響大于 Na+環(huán)境下的熒光強(qiáng)度變化。也說明 K+緩沖環(huán)境對(duì)著兩種結(jié)構(gòu)識(shí)別區(qū)分效果更好，這可能是由于K +緩沖條件下形成的的G四鏈體更有利于其與配合物的作用。5050606507075080050101502025030IntesityWavelngth/nm DNA 10uL合1 2 30uL1 4合 50uL1 6 70uL合1 8 90uL1 1合圖49 鉀離子緩沖液中，配合物1 與Gquadruplex作用的熒光滴定曲線，[Ru]=10uM，600nm左右的吸收峰變化是由于配合物1 濃度的增加 (從0,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10μM)。共 32 頁 第 25 頁┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊裝┊┊┊┊┊訂┊┊┊┊┊線┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊50506065070750800501015020250IntesityWavelngth/nm DNA 10uL合1 2 30uL1 4合 50uL1 6 70uL合1 8 90uL1圖 410 納離子緩沖液中，配合物 1 與 Gquadruplex 作用的熒光滴定曲線，[Ru]=10uM，600nm左右的吸收峰變化是由于配合物1 濃度的增加 (從0,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10μM)。5050606507075080050101502025030IntesityWavelngth/nm DNA 10uL合1 2 30uL1 4合 50uL1 6 70uL合1 8 90uL1 1合 0uL1圖411 鉀離子緩沖液中，配合物2與Gquadruplex作用的熒光滴定曲線，[Ru]=10uM，600nm左右的吸收峰變化是由于配合物1 濃度的增加 (從0,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10μM)。共 32 頁 第 26 頁┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊裝┊┊┊┊┊訂┊┊┊┊┊線┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊5050606507075080202040608010120140160180IntesityWavelngth/nm DNA 10uL合1 2 30uL1 4合 50uL1 6 70uL合1 8 90uL1圖412 鈉離子緩沖液中，配合物2與Gquadruplex作用的熒光滴定曲線，[Ru]=10uM，600nm左右的吸收峰變化是由于配合物1 濃度的增加 (從0,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10μM)。根據(jù)圖414141416，由配合物滴定DNA鉀、鈉離子緩沖溶液，由于DNA是多齒配體，可以與配合物進(jìn)行多方面結(jié)合，熒光強(qiáng)度不斷增強(qiáng)，結(jié)合比大于一比一。0 2 4 6 8 10501015020IntesityConcetration/uM圖 413 配合物 1 滴定 DNA 鉀離子緩沖溶液在 600nm 左右的吸收峰滴定趨勢(shì)圖，[Ru]=10uM，600nm左右的吸收峰變化是由于配合物1 濃度的增加 (從0,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10μM)。共 32 頁 第 27 頁┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊裝┊┊┊┊┊訂┊┊┊┊┊線┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊0 2 4 6 8 100501015020IntesityConcetration/uM圖 414 配合物 1 滴定 DNA 鈉離子緩沖溶液在 600nm 左右的吸收峰滴定趨勢(shì)圖，[Ru]=10uM，600nm左右的吸收峰變化是由于配合物1 濃度的增加 (從0,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10μM)。02468101250101502025030IntesityConcetration/uM圖 415 配合物 2 滴定 DNA 鉀離子緩沖溶液在 600nm 左右的吸收峰滴定趨勢(shì)圖，[Ru]=10uM，600nm左右的吸收峰變化是由于配合物2 濃度的增加 (從0,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10μM)。共 32 頁 第 28 頁┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊裝┊┊┊┊┊訂┊┊┊┊┊線┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊0 2 4 6 8 102040608010120140160180IntesityConcetration/uM圖 416 配合物 2 滴定 DNA 鈉離子緩沖溶液在 600nm 左右的吸收峰滴定趨勢(shì)圖，[Ru]=10uM，600nm左右的吸收峰變化是由于配合物2 濃度的增加 (從0,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10μM)。共 32 頁 第 29 頁┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊裝┊┊┊┊┊訂┊┊┊┊┊線┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊5 結(jié)論和展望 結(jié)論本文設(shè)計(jì)合成了一個(gè)鉑配合物，運(yùn)用兩種手段研究了釕配合物與端粒 DNAG四鏈體結(jié)構(gòu)的鍵合作用，得到了以下結(jié)論：（1）通過核磁、質(zhì)譜表征方法證明首次合成了鉑配合物即[(ptap)Pt(en)](PF 6)2，只是由于時(shí)間限制，沒有進(jìn)行再次提純。（2）紫外吸收光譜發(fā)生一定的增色效應(yīng)，但變化幅度很小，釕配合物很有可能與 DNA AG3(T2AG3)3 的作用模式是外部堆積模式，又由于此 DNA 易形成 G四鏈體結(jié)構(gòu)，所以發(fā)生的作用很可能為非特異性結(jié)合。有明顯的紅移現(xiàn)象也說明了，配合物和 DNA AG3(T2AG3)3 是有發(fā)生結(jié)合的。（3）配合物與DNA 作用后的減色率比在Na +緩沖條件下的減色率大，可能是由于K+環(huán)境下形成的DNA 微觀結(jié)構(gòu)更有利于其與配合物的鍵合。也說明 K+緩沖環(huán)境對(duì)結(jié)構(gòu)識(shí)別效果更好，這可能是由于K +緩沖條件下形成的的G四鏈體更有利于其與配合物的作用。（4）熒光大幅增強(qiáng)說明配合物與G四鏈體的鍵合能力很強(qiáng)，由于 G四鏈體末端的四分體結(jié)構(gòu)便于平面芳香環(huán)堆積，所以可以通過觀察熒光強(qiáng)度的變化情況來識(shí)別特異性端粒結(jié)構(gòu)。 展望 端粒酶的活性與細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化具有密切關(guān)系。本文的研究雖然取得了初步的成功，但依然任重道遠(yuǎn)，尚有許多有待進(jìn)一步深入進(jìn)行的研究工作，這里擇其要者簡(jiǎn)要討論如下：（1）本文從現(xiàn)象上分析了兩種種多吡啶單核釕配合物與G四鏈體的結(jié)合情況，下一步可以將釕多吡啶配合物作為端粒G 四鏈體分子開關(guān)的研究，以及運(yùn)用分子模擬等手段深入探究其與G四鏈體具體的結(jié)合方式和結(jié)合位點(diǎn)。（2）細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，研究配合物對(duì)腫瘤細(xì)胞中端粒的抑制效果（3）本文說明[(ptap)Pt(en)](PF 6)2 的合成是可行的，下一步工作在于對(duì)其進(jìn)行提純，進(jìn)行分析師譚，探討其余 G四鏈體的作用機(jī)制。共 32 頁 第 30 頁┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊裝┊┊┊┊┊訂┊┊┊┊┊線┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊┊參考文獻(xiàn)[1] Fabio Arnesano， Giovanni Natile，Mechanistic insight into the cellular uptake and processing of cisplatin 30 years after its approval by FDA，Coordination Chemistry Reviews 253 (2022) 2070–2081[2] Carla Francisco，a Sofia Gama，a Filipa Mendes，a Fernanda Marques，a Isabel Cordeiro dos Santos，aAnt′onio Paulo，a Isabel Santos，a Joana Coimbra，b Elisabetta Gabanoc and Mauro Ravera*c，Pt(II) plexes with bidentate and tridentate pyrazolylcontaining chelators:synthesis， structural characterization and biological studies，Dalton Trans.， 2022， 40， 5781[3] Mariana S. 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