金銀花內(nèi)生真菌分離及其次生代謝產(chǎn)物相關(guān)性研究分析畢業(yè)論文-資料下載頁
2025-06-20 12:46本頁面
【正文】 A222淺綠色干燥結(jié)合牢固不整齊無 顯微形態(tài)鑒定通過對三株內(nèi)生真菌的菌落形態(tài)及顯微形態(tài)觀察，觀察其孢子形態(tài)，產(chǎn)孢方式，孢子囊及孢子柄等顯微形態(tài)來初步推測菌株的分類學地位。三株菌株的顯微形態(tài)如下：圖14菌株A324鏡下特征(1040)（菌絲體顯微形態(tài)）圖15 菌株A324鏡下特征(1040)（孢子囊及孢子柄顯微形態(tài)）圖16 菌株 B415鏡下特征(1040)（孢子囊及孢子柄顯微特征）圖17 菌株B431鏡下特征(1040)(孢子產(chǎn)生方式)圖18 菌株A222鏡下特征(1040)（孢子顯微形態(tài)）圖19 菌株A222鏡下特征(1040)（菌絲體顯微形態(tài)）根據(jù)對三株菌株鏡下顯微形態(tài)的觀察，初步鑒定結(jié)果如下：表5 四株菌株顯微形態(tài)描述 顯微特征菌株孢子分生孢子梗真菌菌絲分類歸屬A324圓形，孢子淺紅色孢子梗細長，無分支菌絲有分支，有隔毛霉屬B415圓形或類圓形，孢子單生分生孢子聚集在分生孢子梗頂端呈頭狀。菌絲有分支，無隔絲胞綱曲霉屬B431孢子單生，顏色淡綠色分生孢子梗細長，有分支菌絲體細長，有分支，向空中呈放射狀生長青霉屬A222單生，基部疤痕明顯直，彎或屈曲，叢生在子座上，產(chǎn)孢細胞有明顯疤痕多埋生，表面菌絲不發(fā)達尾孢屬 二次發(fā)酵條件的優(yōu)化結(jié)果發(fā)酵條件的單因素優(yōu)化結(jié)果編號因素結(jié)果1碳源蔗糖2氮源蛋白胨3溫度28℃通過對發(fā)酵條件的摸索，得到基本發(fā)酵培養(yǎng)基為PDA培養(yǎng)基，考慮到蔗糖價格便宜，且在實驗過程中與葡萄糖起到相同的實驗作用，故選擇主要碳源為蔗糖，主要氮源為蛋白胨，溫度選擇在28℃,發(fā)酵條件的單因素優(yōu)化只能客觀評價培養(yǎng)基中各成分所起的作用，而對于培養(yǎng)基整體而言還需要做下一步的實驗工作，接下來會以菌株中綠原酸含量為指標，進行發(fā)酵條件的正交實驗，優(yōu)選最佳的碳源、氮源濃度和最佳培養(yǎng)溫度。最終確定發(fā)酵培養(yǎng)基為PDB培養(yǎng)基，培養(yǎng)條件為28℃,120r/min，震蕩培養(yǎng)72小時。5 結(jié)論與討論 為確保從金銀花植株上分離到的菌是其內(nèi)生菌，本實驗對實驗材料做了嚴格消毒。在內(nèi)生菌分離過程中，應(yīng)該選取老的植物組織進行菌的分離，這樣能夠最大程度的發(fā)現(xiàn)內(nèi)生菌的多樣性。通過對金銀花內(nèi)生菌的分離得知葉片中內(nèi)生真菌含量豐富，其次為花和莖，根部內(nèi)生真菌數(shù)量最少。，金銀花體內(nèi)存在較為豐富的內(nèi)生菌，包括內(nèi)生真菌、內(nèi)生細菌，其中內(nèi)生真菌77株，內(nèi)生細菌9株；不同部位葉中分離內(nèi)生菌最多，其中真菌31株，細菌2株；這可能是因為葉與其他部位相比，與外界接觸面積最大，受到外界微生物的侵入，因此產(chǎn)生的內(nèi)生真菌相應(yīng)可能更多一些，但詳細的機理還需要進一步研究.，發(fā)現(xiàn)與綠原酸及木犀草苷有相同的顯色反應(yīng)，遷移率相當?shù)膶游鰩В醪奖砻髌浯x產(chǎn)物中可能產(chǎn)生綠原酸及木犀草苷，經(jīng)過HPLC再次驗證之后發(fā)現(xiàn)，金銀花內(nèi)生菌可以產(chǎn)生綠原酸和木犀草苷；如果能夠更加深入的研究，進行工業(yè)化生產(chǎn)，內(nèi)生菌發(fā)酵則可能成為解決金銀花資源短缺問題的一條新途徑。參考文獻[1]項勇，崔京霞，呂安國．東北紅豆杉內(nèi)生真菌的分離和篩選[J]．東北林業(yè)大學學報，2002，30(3)：3034．[2]馬天有，董兆麟．植物分離產(chǎn)紫杉醇的內(nèi)生真菌的研究[J]．西北大學學報，1999．29(1)：4749．[3] 項勇，[J],東北林業(yè)大學學報 ，2002,30（2）：3034[4]李海燕．一種桃兒七內(nèi)生真菌的分離初報．云南大學學報，1999，21(3):243[5]一株產(chǎn)鬼臼毒素內(nèi)生真菌發(fā)酵條件的研究[J].西北大學學報[6][M].上海:上海科學技術(shù)出版社,1979.[7]郭良棟，菌物系統(tǒng)，2001,20（1）：148152
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