【導(dǎo)讀】2．術(shù)語和定義······；附錄B梅毒血清學(xué)檢查0u，u，u?根據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》制定本標(biāo)準(zhǔn)。按照國家質(zhì)檢總局國家標(biāo)準(zhǔn)委公告(2020年。則》自本標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施之日起廢止。本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部傳染病標(biāo)準(zhǔn)專業(yè)委員會提出。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中。本標(biāo)準(zhǔn)適用于全國各級各類。醫(yī)療、疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)及其工作人員對梅毒的診斷和報(bào)告。常，甚至危及生命。4．1．3．2非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。外陰及肛周皮損多為濕丘疹及扁平濕疣?？谇豢砂l(fā)生黏膜斑。4．2．2．3可出現(xiàn)梅毒性骨關(guān)節(jié)損害、眼損害、內(nèi)臟及神經(jīng)系統(tǒng)損害等。樹膠腫，上腭及鼻中隔黏膜樹膠腫可導(dǎo)致上腭及鼻中隔穿孔和鞍鼻。骨梅毒，眼梅毒，其他內(nèi)臟梅毒，可累及呼吸道、消化道、肝脾、泌尿生殖系、內(nèi)分泌腺及骨骼肌等。4．3．3．2梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)：陽性。4．4．1流行病學(xué)史：有多性伴，不安全性行為；或性伴有梅毒感染史。

　　

【正文】 5。 C～ 25。 C孵 育 2h觀察結(jié)果。 B． 2． 2熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn) IFIFAABS) B． 2． 2． 1原理 FTAABS試驗(yàn)以完整形態(tài)的 Nichol梅毒螺旋體作為抗原，加上經(jīng)吸收劑 (用 Reiter株螺旋體制備 而成 )處理過的患者血清形成抗原抗體復(fù)合物，再加入熒光素 (FITC)標(biāo)記的抗人免疫球蛋白，與血清梅 毒螺旋體抗體結(jié)合。在熒光顯微鏡下，螺旋體顯示蘋果綠色的熒光，即為陽性反應(yīng)。 B． 2． 2． 2材料 ?、一、 a．梅毒螺旋體抗原玻片，有直徑 0． 5cm涂布梅毒螺旋體的圓圈，在高倍鏡下每視野不少于 30條螺 旋體，丙酮固定。 b．吸收劑 (5mL冷凍干燥品 )，由體外培養(yǎng)的 Reiter株螺旋體制備而成。使用前用無菌蒸餾水恢 復(fù)原體積。 c．熒光抗體，用熒光素標(biāo)記羊或鼠抗人免疫球蛋白。 d．血清稀 釋板。 B． 2． 2． 3方法 m將血清標(biāo)本于 56℃ 滅活 30min，備用； WS 273—2020 b．吸收劑加入 5mL無菌蒸餾水，用作血清的稀釋； c．血清標(biāo)本和吸收劑按 1： 5～ 1： 20稀釋，混勻后置有蓋濕盒內(nèi)于 3522～ 37℃ 孵育 30min； d．將系列稀釋的血清分別加到抗原片上 (每孔不少于 30p． L)，放入有 蓋濕盒內(nèi)，置 35。 C～ 37。 C孵 育 30min； e．用 0． 01mol／ L的 PBS沖洗抗原片，用磁力攪拌器低速以 0． 01mol／ 1． PBS溶液洗滌抗原片，每 5min更換 PBS液 1次，共 3次。最后一次用蒸餾水沖洗一遍，冷風(fēng)吹干備用； f．抗原片每個圈內(nèi)加 30止熒光抗體 (熒光抗體稀釋為工作液 )，放濕盒 35C～ 37。 C孵育 30rain。 重復(fù)步驟 5的洗滌和吹干； g．抗原片加固封劑 (甘油緩沖液 )1滴，覆以蓋玻片，在熒光顯微鏡下觀察； h．試驗(yàn)對照：每批次試驗(yàn)包括下列對照。 ——4+陽性血清和 1+陽性血清對照， 血清用 PBS液和吸收劑分別按 1： 5～ 1： 20稀釋。 ——非特異血清對照。 ——染色對照：用 0． 01mol／ L PBS和吸收劑分別替代熒光抗體。 B． 2． 2． 4結(jié)果 梅毒螺旋體均勻地發(fā)出中等或高強(qiáng)度的蘋果綠色熒光 陽性 梅毒螺旋體均勻地發(fā)出弱蘋果綠色熒光 弱陽性 梅毒螺旋體呈微弱黃色光或觀察不到熒光 陰性 B． 2． 3梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISAl B． 2． 3． 1原理 該試驗(yàn)是用經(jīng)純化及超聲裂解處理的梅毒螺旋體為抗原包被固相板條，加上梅毒血清和辣根過氧 化酶標(biāo)記的抗人 IgG抗體，利用酶免疫法檢 測患者血清中的抗梅毒螺旋體特異性抗體。采用特異的梅 毒螺旋體重組蛋白作為抗原，使試驗(yàn)更加敏感、特異。 B． 2． 3． 2材料 a． ELISA試劑盒：含包被梅毒螺旋體抗原的反應(yīng)板 (96孔 )；標(biāo)本稀釋液；洗滌液，使用前按說明書 要求稀釋；酶結(jié)合物；底物液 (A液和 B液 )；反應(yīng)終止液；陽性對照血清；陰性對照血清。 b．其他：酶標(biāo)檢測儀；洗板機(jī)。 B． 2． 3． 3方法 a．取標(biāo)本稀釋液 100／ I．加到反應(yīng)板孔內(nèi)，再加入待檢血清 10／ L，同時作陽性和陰性對照，置 37。 C 孵育 30min； b．洗滌液洗板 5次，拍干； c．每孔加酶結(jié)合物 100pI。，置37℃ 孵育 15min； d．洗滌液洗板 5次，拍干； e．每孔加底物液 A液、 B液各 1滴 (各 50pI。 )， 37℃ 避光孵育 15min； f．每孔加終止液 1滴 (50pI。 )終止反應(yīng)； g．置酶標(biāo)檢測儀 450nm波長測定光密度 (OD值 )。 B． 2． 3． 4結(jié)果判定 臨界值 (cut off)一 o． 10+陰性對照平均 OD值 (陰性對照 OD值 o． 05時按 0． 05計(jì)算 )。標(biāo)本OD 值 臨界值時，結(jié)果為陰性。標(biāo)本 ≥臨界值，結(jié)果為陽性 (或按各診斷試劑要求判定結(jié)果 )。 B． 2． 3． 5注意事項(xiàng) a．試劑 盒置 4。 C～ 8℃ 保存。 b．不同批號試劑不能混用。 C．嚴(yán)格按試劑盒說明書要求操作。 d．反應(yīng)的溫度和時間必須嚴(yán)格控制。 lO WS 273—． 2020 B． 2． 4臨床意義 B． 2． 4． 1梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的敏感性和特異性均高，一期梅毒的敏感性為70％～ 100％，二期 梅毒達(dá) 100％，三期梅毒 95％～ 98％，特異性 94％～ 100％。 B． 2． 4． 2梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)多用作證實(shí)試驗(yàn)，特別是隱性梅毒及一些非螺旋體抗原血清試驗(yàn) 陰性而又懷疑為梅毒的患者。但不能用于觀察療效、判斷復(fù)發(fā)及再感染。 B． 2． 4． 3梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)偶可出現(xiàn)生物學(xué)假陽性反應(yīng)。 WS 273—2020 附錄 C (規(guī)范性附錄 ) 梅毒的組織病理 梅毒的基本病理變化： ① 血管特別是小動脈內(nèi)皮細(xì)胞腫脹與增生； ② 血管周圍大量淋巴細(xì)胞和漿細(xì) 胞浸潤。二期梅毒晚期和三期梅毒常見上皮樣細(xì)胞和多核巨細(xì)胞等組成的肉芽腫性浸潤。 c． 1一期梅毒 硬下疳： a．損害邊緣表皮棘層肥厚，海綿形成，淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞外滲。 b．近中心表皮變薄，出現(xiàn)水腫及炎癥細(xì)胞浸潤。病損中央可出現(xiàn)表皮缺損。 c真皮乳頭水腫，真皮血管特別是小動脈內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、增生、閉塞，周圍有多量漿細(xì)胞與淋巴細(xì) 胞浸潤，常混有中性粒細(xì)胞。 d．銀染色在真皮血管周圍和表皮中 可見梅毒螺旋體。 C． 2二期梅毒 斑疹、丘疹和丘疹鱗屑性皮損： a．表皮增生，海綿形成，基底層空泡改變，淋巴細(xì)胞外滲，海綿狀膿皰，角化不全。 b．真皮乳頭水腫，真皮血管擴(kuò)張，管壁增厚，內(nèi)皮細(xì)胞腫脹，血管周圍淋巴細(xì)胞、組織細(xì)胞和漿細(xì)胞 浸潤。浸潤的炎癥細(xì)胞圍繞血管呈袖套狀。 c．銀染色約 1／ 3的病例可見梅毒螺旋體。 扁平濕疣： 除上述表現(xiàn)外，有明顯的表皮增生，表皮內(nèi)微膿腫形成，含大量梅毒螺旋體。 C． 3三期梅毒 真皮由上皮樣細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞等構(gòu)成的肉芽腫性浸潤，其中含血管較多，并常有多核巨細(xì) 胞 存在。 結(jié)節(jié)型：浸潤限于真皮，肉芽腫較小，干酪樣壞死不廣泛，甚或缺如。 樹膠腫型：浸潤侵及真皮和皮下組織，有大量漿細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、上皮樣細(xì)胞和多核巨細(xì)胞，病損中 央有大塊凝固性壞死。病變處彈性纖維被破壞，炎癥愈重破壞亦愈重。 c． 4內(nèi)臟梅毒 病理變化為樹膠腫性及彌漫性間質(zhì)性炎癥。 c． 5胎傳梅毒 無一期梅毒硬下疳的局部病變，其余皮膚病變與獲得性各期梅毒相同。其不同者為早期胎傳梅毒 可有水皰一大皰病變。 a．其水皰頂部為 1～ 2層疏松幼稚表皮細(xì)胞。 b．皰液內(nèi)含多少不等單核及多形核白細(xì)胞及脫落表皮細(xì)胞。 C．真皮呈彌漫性急性炎癥浸潤，浸潤細(xì)胞為多形核白細(xì)胞及淋巴細(xì)胞，無漿細(xì)胞。 d．銀染色可在疏松的組織間隙中及皰液內(nèi)可發(fā)現(xiàn)大量梅毒螺旋體。