分子生物學(xué)考試復(fù)習(xí)題-資料下載頁
2025-06-07 16:15本頁面
【正文】 neDiagnosis)：采用分子生物學(xué)的技術(shù)方法來分析受檢者的某一特定基因結(jié)構(gòu)（DNA水平）或功能（RNA）水平是否異常，以此來對相應(yīng)的疾病進(jìn)行診斷，是病因診斷。3單鏈構(gòu)象多態(tài)性（SSCP）：把PCR后獲得的雙鏈DNA加熱變性后形成單鏈DNA，相同長度的DNA單鏈由于堿基順序不同，它們在中性聚丙稀酰胺凝膠中可有不同的構(gòu)象而導(dǎo)致電泳速度的不同，這種現(xiàn)象稱為單鏈構(gòu)象多態(tài)性。3聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）：利用人工合成的一對引物，在被擴(kuò)增的(DNA)模板鏈的兩端形成雙鏈，由DNA聚合酶催化一對引物之間的聚合反應(yīng)。3基因干預(yù)：采用特定方法抑制某個(gè)基因的表達(dá)或破壞某個(gè)基因使其不表達(dá)以達(dá)到治療疾病的目的。DNA指紋：針對重復(fù)序列人工合成寡核苷酸片斷作為探針，與經(jīng)過酶切的人基因組DNA進(jìn)行southrenblot雜交，可以得到大小不等的雜交帶而且雜交帶的數(shù)目和分子量大小具有個(gè)體特異性，就象人的指紋一樣，以因而把這種雜交帶圖譜稱。4RNA干擾：由短雙鏈RNA誘導(dǎo)同源mRNA降解過程，可使基因的表達(dá)受到抑制。反義RNA：能與mRNA互補(bǔ)配對的RNA分子，配對后在空間上妨礙以此mRNA為模板的蛋白質(zhì)合成，因而可在翻譯水平調(diào)控基因表達(dá)。4簡述癌基因及其激活機(jī)制。癌基因:指細(xì)胞基因組中具有能夠使正常細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化基因。是細(xì)胞內(nèi)控制細(xì)胞生長的基因，具有潛在的誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的話特性，在癌基因異常表達(dá)時(shí)，其產(chǎn)物可使細(xì)胞無限分裂。原癌基因激活機(jī)制：(1)點(diǎn)突變，(2)獲得外源啟動(dòng)子，增強(qiáng)子，轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)，表達(dá)活性增強(qiáng)。(3)原癌基因甲基化程度降低。(4)原癌基因重排。(5)染色體易位。4簡述基因診斷的常用分子生物學(xué)技術(shù)。（1）、核酸分子雜交：按照堿基互補(bǔ)配對原則，將不同來源的序列互補(bǔ)大量的DNA/DNA,RNA/RNA互補(bǔ)配對成雙鏈雜交分子。原位雜交：用核苷酸探針對特殊的核苷酸順序在其原位進(jìn)行雜交，可用于DNA,RNA的定位研究。（2）、聚合酶鏈反應(yīng)：利用人工合成的一對引物，在被擴(kuò)增的(DNA)模板鏈的兩端形成雙鏈，由DNA聚合酶催化一對引物之間的聚合反應(yīng)。（3）、單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析：把PCR后獲得的雙鏈DNA加熱變性后形成單鏈DNA，相同長度的DNA單鏈由于堿基順序不同，它們在中性聚丙稀酰胺凝膠中可有不同的構(gòu)象而導(dǎo)致電泳速度的不同，這種現(xiàn)象稱為單鏈構(gòu)象多態(tài)性。（4）、限制酶酶譜分析：基因突變致酶切位點(diǎn)的丟失或相對位置發(fā)生改變，以此酶消化待測DNA和野生型對照DNA,通過比較二者的酶切片斷的長度、數(shù)量上的差異就可判斷待測DNA的突變情況。（5）、DNA序列測定；分子克隆到載體上，或直接對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序。（6）、DNA芯片技術(shù)：將許多特定的DNA片段或cDNA片段作為探針，有規(guī)律地緊密排列固定于單位面積的支持物上。44．簡述基因治療的主要策略。(一)基因標(biāo)記解決：（1）外源基因能否安全的轉(zhuǎn)移到患者體內(nèi)。（2）患者體細(xì)胞中能否檢測到轉(zhuǎn)移基因的存在。（二）基因置換（基因矯正）特定的目的基因轉(zhuǎn)入特定的細(xì)胞，通過定位重組或同源重組進(jìn)行基因矯正。（三）基因添加導(dǎo)入外源基因使靶細(xì)胞表達(dá)其本身不表達(dá)的產(chǎn)物。（1）導(dǎo)入正?；蜓a(bǔ)償缺陷基因的功能。（2）導(dǎo)入新基因，利用其表達(dá)的產(chǎn)物治療。四）基因干預(yù)采用特定方法抑制某個(gè)基因的表達(dá)或破壞某個(gè)基因使其不表達(dá)，已達(dá)到治療的目的。 方法：(1)反義RNA、(2)RNA干擾、（3）三鏈DNA、(4)核酶6
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