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正文內(nèi)容

瘧原蟲(chóng)鏡檢技術(shù)培訓(xùn)手冊(cè)-資料下載頁(yè)

2025-06-07 04:18本頁(yè)面
  

【正文】 否存在作參考;色素顆粒的形態(tài)、顏色、排列。對(duì)于這一點(diǎn)應(yīng)掌握,尤其是厚血膜更為重要。否則在形態(tài)鑒別上會(huì)混淆弄錯(cuò)。(二)瘧色素顆粒鑒別與原蟲(chóng)在同一水平面;有立體感;色澤特殊,只有單色(色澤與背景色有關(guān),須將視野放暗些);形狀如米粒狀、沙粒狀、顆粒狀、短桿狀,細(xì)粒可凝聚成堆。(三)大滋養(yǎng)體與大配子體的形態(tài)鑒別大滋養(yǎng)體:大小一般不超過(guò)被寄生的紅細(xì)胞的3/4。核一個(gè)或延長(zhǎng)呈帶狀,周?chē)恢珟Р幻黠@。胞漿邊緣不整齊,有時(shí)有空泡。在厚血膜上表現(xiàn)有活動(dòng)性,故形態(tài)變化很大,胞漿收縮不均勻,有時(shí)斷裂成團(tuán)塊,瘧色素分布凌亂。大配子體:大小幾乎充滿真?zhèn)€紅細(xì)胞。核一個(gè),較緊密,常偏于一側(cè),周?chē)幸蝗Σ蝗旧珟?。胞漿邊緣整齊,無(wú)空泡。瘧色素平均散在分布。在厚血膜上則體形較小,胞漿收縮均勻,不染色帶明顯,瘧色素分布規(guī)則則沿邊分布。(四)裂殖子與血小板的形態(tài)鑒別血小板:由骨髓巨噬細(xì)胞成熟脫落后解離而成,因此結(jié)構(gòu)松散,嚴(yán)格地說(shuō)不是個(gè)完整細(xì)胞(無(wú)核)。在吉氏染色中多見(jiàn)顯淡紅色或淡紫色,中間顆粒為紫紅色,形狀近似石榴子,且邊緣不甚光滑。裂殖子:由成熟裂殖體破裂逸出,以致類(lèi)似血小板聚集一起,或單個(gè)、或三五成群,但形體較血小板小。核較大,相對(duì)的難見(jiàn)到胞漿,核染深紅色或紫紅色,四周胞漿圍繞,染藍(lán)色,呈卵園形,邊緣光滑。如附近查有瘧色素顆粒是有力的佐證。四、厚血膜鏡檢厚血膜由于細(xì)胞重迭,干燥緩慢,以致蟲(chóng)體皺縮,空泡消失,胞質(zhì)變形,加之紅細(xì)胞被溶解,所以蟲(chóng)種和蟲(chóng)體的鑒別比薄血膜困難,但用血量多,瘧原蟲(chóng)鏡下密度高,因此檢出率,常用于瘧原蟲(chóng)檢出。(一)檢查方法在厚血膜上先滴香柏油一滴,用油鏡(100)鏡檢。鏡檢時(shí)應(yīng)從厚血膜上開(kāi)始。從上而下,從左到右,在由右至左,這樣往返一行接一行,一個(gè)視野接一個(gè)視野順序的查完整個(gè)血膜。(二)鑒別要點(diǎn)在厚膜中必須根據(jù)瘧原蟲(chóng)的核、胞漿、瘧色素三個(gè)條件鑒別是否是瘧原蟲(chóng)及何種蟲(chóng)種。在一般情況下,具備三條中的二條也能給以判定。有時(shí)因染色較淺,不見(jiàn)原蟲(chóng)的核和胞漿,只見(jiàn)到典型的瘧色素可斷定。僅見(jiàn)到核和少許胞漿,或者因染液過(guò)偏酸性連胞漿也看不清楚,同時(shí)又不見(jiàn)色素,但是只要對(duì)被染血膜的顏色、紅細(xì)胞的殘影、瘧原蟲(chóng)所處的背景加以綜合分析,仍可正確做出判斷。看完血片后,若為陽(yáng)性,應(yīng)立即按血片編號(hào)登記原蟲(chóng)的種、期,以防差錯(cuò)。為檢查后記錄結(jié)果方便起見(jiàn),對(duì)瘧原蟲(chóng)的種、期可使用英文字母縮寫(xiě)作為代號(hào)。間日瘧=;惡性瘧=;三日瘧=;卵形瘧=;環(huán)形體=R(Ring form);大滋養(yǎng)體=T(trophozoite);裂殖體=S(Schizont);配子體=G(Gametocytr)。五、雜質(zhì)與瘧原蟲(chóng)的鑒別由于染液和載玻片上可能存在雜質(zhì)以及染液酸堿度的影響,常與瘧原蟲(chóng)混淆,應(yīng)注意鑒別!見(jiàn)圖58(一)疑似瘧色素 血魔上的染料殘?jiān)盎覊m,有時(shí)被誤認(rèn)為瘧色素,可依據(jù)顆粒的大小,色澤及分布范圍加以區(qū)別。轉(zhuǎn)動(dòng)顯微鏡微調(diào)時(shí),可見(jiàn)其浮于紅細(xì)胞上,與瘧原蟲(chóng)不在一個(gè)平面。(二)疑似瘧原蟲(chóng)核 細(xì)菌尤其是球菌或白細(xì)胞破裂后散出的顆粒,皆為紅色小點(diǎn),最易混淆。但球菌形體較大,邊緣光滑,常多見(jiàn)聚集一處,分布較廣。嗜中性和嗜酸性粒細(xì)胞顆粒,著色較淡,邊緣整齊,附近常有白細(xì)胞的碎屑。(三)疑似瘧原蟲(chóng)胞質(zhì) 網(wǎng)織紅細(xì)胞殘留物和白細(xì)胞殘留物通常為藍(lán)色,與瘧原蟲(chóng)的胞質(zhì)相似,如與某些紅點(diǎn)結(jié)合在一起,易被誤認(rèn)為是瘧原蟲(chóng)。鑒別時(shí)如形同大滋養(yǎng)體,可依據(jù)瘧色素的特點(diǎn)加以區(qū)別;如形狀似小滋養(yǎng)體,可依據(jù)蟲(chóng)體大小、折光是否均勻以及核與胞質(zhì)是否在一個(gè)平面上予以區(qū)別。圖58 各種影響診斷的矯作物六、瘧原蟲(chóng)計(jì)數(shù)為了了解病人的嚴(yán)重程度、病人是否需要輸血及抗瘧藥的效果測(cè)定瘧原蟲(chóng)密度是十分必要的。下面介紹常用的幾種計(jì)數(shù)方法。 (一)半定量計(jì)數(shù)用厚血膜每個(gè)視野中所觀察到瘧原蟲(chóng)的平均數(shù)可粗略地估計(jì)出瘧原蟲(chóng)密度。這種方法簡(jiǎn)便,缺點(diǎn)是計(jì)數(shù)的瘧原蟲(chóng)數(shù)受血膜厚度影響,在流行病學(xué)上不宜用作定量分析。國(guó)內(nèi)常用此方法將密度分為6級(jí):全厚血膜查見(jiàn)瘧原蟲(chóng)數(shù)在10個(gè)以內(nèi),記錄實(shí)際數(shù)字;全厚血膜查見(jiàn)瘧原蟲(chóng)數(shù)在10個(gè)以上,但平均每個(gè)視野不到1個(gè)蟲(chóng),記錄“少”;100個(gè)視野中查見(jiàn)的瘧原蟲(chóng)數(shù)平均每個(gè)視野1~5個(gè),記錄“+”;100個(gè)視野中查見(jiàn)的瘧原蟲(chóng)數(shù)平均每個(gè)視野6~10個(gè),記錄“++”;100個(gè)視野中查見(jiàn)的瘧原蟲(chóng)數(shù)平均每個(gè)視野11~100個(gè),記錄“+++ ”;100個(gè)視野中查見(jiàn)的瘧原蟲(chóng)數(shù)平均每個(gè)視野100個(gè)以上,記錄“++++ ”。(二)厚血膜的瘧原蟲(chóng)計(jì)數(shù)在制作厚血膜的同時(shí),計(jì)數(shù)每181。l血中白細(xì)胞數(shù)。然后鏡檢厚血膜,計(jì)數(shù)每個(gè)視野中的瘧原蟲(chóng)數(shù)和白細(xì)胞數(shù),瘧原蟲(chóng)密度較高時(shí)計(jì)數(shù)100~200個(gè)白細(xì)胞即可,密度很低時(shí)計(jì)數(shù)1 000個(gè)。用下式算出瘧原蟲(chóng)密度。瘧原蟲(chóng)數(shù) 247。 白細(xì)胞數(shù) 每μl血中白細(xì)胞數(shù) = 瘧原蟲(chóng)數(shù)/μl血。如果無(wú)法進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù),則以6 000個(gè)白細(xì)胞 / μl 血計(jì)算。(三)薄血膜的瘧原蟲(chóng)計(jì)數(shù)在涂制薄血膜的同時(shí),計(jì)數(shù)每181。l血液中的紅細(xì)胞數(shù),也可按男性500萬(wàn)個(gè)、女性按450萬(wàn)個(gè)/μl血計(jì)算。鏡檢薄血膜,算出紅細(xì)胞的瘧原蟲(chóng)感染率,然后按下式算出瘧原蟲(chóng)密度。紅細(xì)胞瘧原蟲(chóng)感染率紅細(xì)胞數(shù)/μl血=瘧原蟲(chóng)數(shù)/μl血如果瘧原蟲(chóng)密度較高,檢查1 000個(gè)紅細(xì)胞即可,但瘧原蟲(chóng)密度低時(shí),則應(yīng)檢查更多的紅細(xì)胞。可按公式N=(IP)247。P確定需檢查的紅細(xì)胞數(shù)。式中N為需要檢查的紅細(xì)胞數(shù),P為1萬(wàn)個(gè)紅細(xì)胞中的瘧原蟲(chóng)數(shù),I為血樣單位(以1萬(wàn)個(gè)紅細(xì)胞計(jì)算)。此外,血膜的不同區(qū)域視野中的紅細(xì)胞瘧原蟲(chóng)感染率有較大差別,通常血膜后端和邊緣部瘧原蟲(chóng)密度常比前半部或中央部高,所以,鏡檢時(shí)不宜只檢查一個(gè)角落,應(yīng)順玻片的橫軸檢查。鏡檢時(shí),應(yīng)當(dāng)記錄下所觀察到的各種瘧原蟲(chóng),不要籠統(tǒng)地記作混合感染。七、血檢質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及規(guī)范(一)血片制作和染色質(zhì)量判定標(biāo)準(zhǔn)血片制作質(zhì)量判定標(biāo)準(zhǔn)好:厚薄血膜均好,或薄血膜好,厚血膜中。中:薄血膜中,厚血膜好或中。差:薄血膜差,或厚薄血膜均差。血片制作和染色合格率要求分別以血片制作、染色和清潔度的好、中,合并計(jì)算合格率。(1)血片制作合格率應(yīng)在85%以上。(2)染色合格率應(yīng)在85%以上。(3)清潔度合格率應(yīng)在80%以上。(二)血片制作和染色質(zhì)量規(guī)范見(jiàn)表51。表51 血片制作的染色質(zhì)量規(guī)范好中差血片制作質(zhì)量厚血膜血量位置直徑外觀玻片右1/3圓形,厚膜均勻,邊緣整齊略多或略少稍偏右圓形,稍不均,不整齊過(guò)多或過(guò)少偏右過(guò)多厚薄不均勻影響著色薄血膜血量位置長(zhǎng)寬外觀玻片1/21/3處舌狀,厚薄均勻略多或略少稍偏右或偏左稍大或稍小舌狀,稍不均過(guò)多或過(guò)少偏右或偏左過(guò)多過(guò)大或過(guò)小薄厚不均呈波浪型染色質(zhì)量外觀鏡下藍(lán)紫色白細(xì)胞,瘧原蟲(chóng)胞漿呈藍(lán)色,核深紅深藍(lán)色胞漿淡藍(lán)或深藍(lán),核紅色紅色或灰白色胞漿不易見(jiàn),核淡紅或藍(lán)色清潔度外觀鏡下光潔無(wú)油灰無(wú)沉渣稍有油污稍有沉渣油灰粘連沉渣多或有雜菌附錄 間日瘧環(huán)狀體 (薄血膜) 間日瘧滋養(yǎng)體(薄血膜) 間日瘧滋養(yǎng)體(厚血膜)   間日瘧裂殖體(薄血膜) 間日瘧雄配子體(薄血膜) 間日瘧雌配子體(薄血膜) 間日瘧環(huán)狀體(厚血膜) 間日瘧滋養(yǎng)體(厚血膜) 惡性瘧雌配子體(厚血膜) 間日瘧裂殖體(厚血膜) 間日瘧雄配子體(厚血膜) 間日瘧雌配子體(厚血膜)
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