液相20xx中國藥品檢驗標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程雜質(zhì)檢測,流動相比例調(diào)節(jié)-資料下載頁
2025-05-28 01:49本頁面
【正文】 足色譜柱系統(tǒng)適用性要求， 試驗中有時需要調(diào)整流動相組分的比例。在調(diào)整流動相組分比例時，以組分比例較低者（小于或等于 50%）相對改變量不超過 177。 30%且絕對改變量不超過 177。 10%為限，如 30%相對改變量的數(shù)值超過 10%時，則改變量以 177。 10%為限 。下面舉例說明。 二元流動相系統(tǒng) ?例 1 兩組分比例為 50： 50 按上述原則， 50%的最大相對該變量為 15%，已超過了絕對改變量允許的范圍，故該流動相比例調(diào)節(jié)的范圍是177。 10%，即 40： 60至 60:40。 ?例 2 兩組分比例為 2:98 按上述原則， 2%的最大相對改變量為 %，故該流動相比例調(diào)節(jié)的范圍是 : :。 三元流動相系統(tǒng) ?例 3 三組分比例為 60:35:5 按上述原則，可每次調(diào)節(jié)流動相系統(tǒng)中比例較低的兩個組分。 ?對于 35%的組分，其最大相對改變量為 %，已超過了絕對該變量允許的范圍，故該組分比例調(diào)節(jié)的范圍是177。 10%，即 25% ～ 45%，則流動相系統(tǒng)比例的調(diào)節(jié)范圍是 50:45:5至 70:25:5。 ?對于 5%的組分，其最大相對改變量為 %，該組分比例調(diào)節(jié)的范圍是 177。 %，即 % ～ %，則流動相系統(tǒng)比例的調(diào)節(jié)范圍是 :35: :35:。 雜質(zhì)檢查時色譜參數(shù)的設(shè)置 ? 在進行雜質(zhì)檢查時，選擇適宜的檢測靈敏度和設(shè)定適宜的積分參數(shù)非常重要。國內(nèi)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，通常制備與雜質(zhì)限度相當(dāng)濃度的對照溶液，用以調(diào)節(jié)檢測靈敏度，使對照溶液的主成分色譜峰高達滿量程的 10% ～ 25%，再進行供試品溶液的測定，以峰面積計算單個雜質(zhì)量和總雜質(zhì)量。 ? 目前國內(nèi)色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)大致有積分儀和色譜工作站兩種類型，對于傳統(tǒng)的積分儀，由于記錄儀的滿量程是固定的，因此檢測靈敏度的調(diào)節(jié)通常是調(diào)節(jié)檢測器的靈敏度使色譜峰高達到記錄儀滿量程的某個范圍；而對于色譜工作站，由于記錄標(biāo)尺的滿刻度是可調(diào)的所以通常是調(diào)節(jié)滿刻度的設(shè)定值，使色譜峰的量程占滿刻度的某個范圍。 ?無論使用的是積分儀，或者是色譜工作站，如質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中沒有明確規(guī)定峰面積的取舍限值，或沒有設(shè)定靈敏度測試溶液，則在實際檢驗中，實驗者通常根據(jù)以往經(jīng)驗設(shè)定積分參數(shù)和最小峰面積，由此也出現(xiàn)了同批樣品的雜志總量在不同實驗室（或不同實驗者）之間差異較大的現(xiàn)象。 ?如遇到這種情況，建議實驗者在檢測靈敏度調(diào)節(jié)（或工作站標(biāo)尺量程調(diào)整）完畢后，采用對照溶液逐步稀釋法配制系統(tǒng)溶液來確定此色譜系統(tǒng)的檢測限，在與供試品溶液及對照溶液相同的標(biāo)尺下記錄色譜圖，通常以信噪比 3:1時的相應(yīng)濃度作為檢測限，以該檢測限對應(yīng)的峰面積作為計算雜志總量時色譜峰峰面積的取舍限值。 梯度洗脫 ? 梯度洗脫所用的溶劑純度要求高，以保證良好的重現(xiàn)性。要注意溶劑的互溶性，不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動相。有些溶劑在一定比例內(nèi)混溶，超出范圍后就不互溶，使用時要引起注意。當(dāng)有機溶劑和緩沖液混合時，還可能析出鹽的晶體，尤其使用磷酸鹽時須特別小心。 ? 混合溶劑的黏度常隨組成而變化，因而在梯度洗脫時常出現(xiàn)壓力的變化。例如甲醇和水黏度都小，當(dāng)二者以相近比例混合時黏度增大很多，此時的柱壓大約是甲醇或水為流動相時的兩倍。因此要注意防止梯度洗脫過程中壓力超過輸液泵或色譜柱承受的最大壓力。 ? 樣品分析前必須進行空白梯度洗脫，以辨認(rèn)溶劑雜質(zhì)峰，如洗脫過程中基線漂移較大，亦可對色譜圖進行空白扣除處理。
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