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造血干細胞捐獻者的hla基因分型-資料下載頁

2025-05-26 22:00本頁面
  

【正文】 ? PCR擴增反應(yīng)結(jié)束后,將標記探針的磁珠直接加入PCR產(chǎn)物中,微量離心管(反應(yīng)板)置于 PCR擴增儀上進行分子雜交; ? 雜交產(chǎn)物用流式磁珠儀進行自動進樣檢測,用 HLA分析軟件確定 HLA基因型。 流式磁珠分析技術(shù)的特點(二) ? 配合 DNA全自動 DNA提取儀及多個 PCR基因擴增儀,具有高通量、操作簡便、快速特點。適合骨髓庫、臍血庫大批量樣本的 HLA基因分型工作。 ? 基于流式磁珠分析技術(shù),已有多家商品化、低分辯水平的 HLA基因分型試劑盒。 ? 可用于 HLAA、 B、 C、 DRB1和 DQB1座位的基因分型。 HLA測序分型( SBT) 技術(shù) HLA座位 檢測對象 HLAA 第 2, 3, 4 外顯子的正、反向序列 HLAB 第 2, 3, 4 外顯子的正、反向序列 HLACw 第 2, 3外顯子正、反向序列 HLADRB1 第 2外顯子正、反向序列, Condon 86反向序列。 HLADQB1 第 2外顯子正、反向序列,第 3外顯子的反向測序。若存在 DQB1*0201/0202 或 0301/0309, 分析第 3外顯子的測序結(jié)果 。 HLA測序分型( SBT) 技術(shù) ? 國際公認的 HLA基因分型方法,高分辨率、高精度; ? HLA測序分型技術(shù)較復(fù)雜,受實驗室設(shè)備條件、試劑價格的限制,以往能夠開展 HLA測序分型的實驗室尚不多; ? 隨著非血緣關(guān)系造血干細胞移植供 /受者對HLA高分辯確認實驗,以及人類學(xué)研究、HLA與疾病相關(guān)聯(lián)等領(lǐng)域的需要, SBT技術(shù)的開展已日益增多。 HLA測序分型( SBT) 技術(shù) ? 可在同一 PCR反應(yīng)條件 、同一測序反應(yīng)的條件下, 對不同 HLA座位進行同步 擴增,簡化了實驗操作; ? 隨著毛細管電泳基因測 序儀及新的 HLA分析軟件 的應(yīng)用, HLA測序分型處 理樣本的能力逐步高通量 化。 HLA基因分型技術(shù)的展望 ?HLA基因分型技術(shù)呈現(xiàn)多元化趨勢, HLA基因分型涵蓋面不斷擴大; ?低分辯、中分辯向高分辯水平發(fā)展; ?分型結(jié)果的準確性和精確度不斷提高; ?實驗操作更為簡便快速; ?不同的 HLA分型技術(shù),其實驗原理、優(yōu)缺點不同,因而各實驗室可根據(jù)自身的目的、需要并結(jié)合自身的技術(shù)工作平臺,加以選擇應(yīng)用。 謝謝!
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