造血干細胞捐獻者的hla基因分型-預覽頁
【正文】 由專人運送，防震、防顛覆； 合格的 HLA基因定型血樣與捐獻者樣本清單一并送往組織配型實驗室。 ? HLA基因家族位于人類第 6號染色體短臂 ， 全長 Mb， HLA基因家族是迄今為止最復雜、多態(tài)性最豐富、免疫功能相關(guān)基因最集中、與疾病關(guān)聯(lián)最密切的一個區(qū)域。 非經(jīng)典 HLAI類抗原：包括 HLAE、 G 、 F位點抗原，抗原在特定時間選擇性分布。 ? 無關(guān)供者骨髓移植中， NMDP、 JMDP有研究資料表明，供 /受者對 HLACW基因的匹配程度，與 GVHD、 移植成活率相關(guān)。 HLA基因結(jié)構(gòu) ? 體細胞為二倍體，同源染色體之間相互配對， ? 每一 HLA位點有 2個等位基因，一個來自于母親，另一個來自于父親。 以大寫字母 A、 B、 C… 表示 HLA的遺傳座位； HLA特異性以數(shù)字表示；除HLAA、 B位點抗原的特異性的命名數(shù)字不重復外 ， 其它位點抗原連續(xù)獨立命名 ； C位點抗原以 Cw為字首命名 ， 以和補體系統(tǒng)區(qū)別 。 ? HLA低分辨水平基因定型：確定 HLA基因前 2位數(shù)。 PCR為基礎(chǔ)的 HLA基因分型技術(shù) 分型所需要的血樣量少，不需要有活性的細胞，實驗重復性好、結(jié)果的準確性高，易于質(zhì)控和準標化。 “中國造血干細胞捐獻者資料庫”對捐獻者血樣 HLA基因分型技術(shù)的要求 ? 對 HLAA、 B和 DRB1進行基因分型，分辨率達低分辨水平。 主要步驟： DNA提取 PCR擴增 瓊脂糖凝膠電泳檢測 結(jié)果分析 PCR序列特異性引物（ PCRSSP） 分型技術(shù) PCR序列特異性引物 （ PCRSSP） 分型技術(shù) ? 特點：簡便、快速、直觀等，特別適合于尸腎移植的組織配型；所需設(shè)備簡單，易于開展；為常規(guī)采用的經(jīng)典 HLA基因分型技術(shù)。 ? PCR擴增反應(yīng)結(jié)束后，將標記探針的磁珠直接加入PCR產(chǎn)物中，微量離心管（反應(yīng)板）置于 PCR擴增儀上進行分子雜交； ? 雜交產(chǎn)物用流式磁珠儀進行自動進樣檢測，用 HLA分析軟件確定 HLA基因型。 ? 可用于 HLAA、 B、 C、 DRB1和 DQB1座位的基因分型。 HLA測序分型（ SBT） 技術(shù) ? 國際公認的 HLA基因分型方法，高分辨率、高精度； ? HLA測序分型技術(shù)較復雜，受實驗室設(shè)備條件、試劑價格的限制，以往能夠開展 HLA測序分型的實驗室尚不多； ? 隨著非血緣關(guān)系造血干細胞移植供 /受者對HLA高分辯確認實驗，以及人類學研究、HLA與疾病相關(guān)聯(lián)等領(lǐng)域的需要， SBT技術(shù)的開展已
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