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造血干細(xì)胞捐獻(xiàn)者的hla基因分型-全文預(yù)覽

  

【正文】 擴(kuò)增,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作; ? 隨著毛細(xì)管電泳基因測(cè) 序儀及新的 HLA分析軟件 的應(yīng)用, HLA測(cè)序分型處 理樣本的能力逐步高通量 化。 HLA測(cè)序分型( SBT) 技術(shù) HLA座位 檢測(cè)對(duì)象 HLAA 第 2, 3, 4 外顯子的正、反向序列 HLAB 第 2, 3, 4 外顯子的正、反向序列 HLACw 第 2, 3外顯子正、反向序列 HLADRB1 第 2外顯子正、反向序列, Condon 86反向序列。 流式磁珠分析技術(shù)的特點(diǎn)(二) ? 配合 DNA全自動(dòng) DNA提取儀及多個(gè) PCR基因擴(kuò)增儀,具有高通量、操作簡(jiǎn)便、快速特點(diǎn)。 ? 應(yīng)用:適合于經(jīng)典 HLAⅠ 、 Ⅱ 類分子的基因分型 ? 分辨率:低分辯、高分辯基因分型水平。 ? 結(jié)果既報(bào)告每一樣本的基因型,同時(shí)報(bào)告對(duì)應(yīng)的特異性。 HLA基因分型技術(shù)取代了血清學(xué)方法。 ? HLA高分辨水平基因定型:確定 HLA基因第 4位以后的數(shù)字。 HLA等位基因命名原則:位點(diǎn)后加 “ *” , 再加數(shù)字表示 。 ? 檢測(cè) HLAA、 B和 DRB1三個(gè)位點(diǎn),有 6個(gè)等位基因,即 6個(gè) HLA分型數(shù)據(jù)。 HLA基因 ? 定位于人類第 6號(hào)染色體短臂( ), 全長(zhǎng) Mb, 占人類基因組堿基數(shù)的 %。 ? HLAII類:由 34KD的 ? 鏈和 29KD的 β 鏈以非共價(jià)鍵連接而成,包括 HLADR、 DP、 DQ抗原; 僅分布于 B淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突細(xì)胞等少數(shù)細(xì)胞表面。 HLA抗原的分類 ? HLAI類:由一條具有多態(tài)性的 α 多肽鏈和一條沒有多態(tài)性的 ?2微球蛋白通過非共價(jià)鍵組成異二聚體。 人類白細(xì)胞抗原 (Human Leucocyte Antigen, HLA) ? 1958年, Dausset采用白細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn),檢測(cè)出第一個(gè)人類白細(xì)胞 抗原 Mac( A2)。 主要內(nèi)容 ( 1)捐獻(xiàn)者 HLA基因定型血樣的運(yùn)輸 ( 2) HLA相關(guān)基本概念 ( 3) HLA分型(定型)技術(shù) HLA血清學(xué)分型技術(shù) HLA基因分型技術(shù) 捐獻(xiàn)者 HLA基因定型血樣的運(yùn)輸 注意事項(xiàng): 因 “ 登記表 ” 中填寫的內(nèi)容審核不合格血樣、以及經(jīng) HBV等化驗(yàn)檢查健康不合格的血樣,予以剔除; 檢查血樣管有無(wú)破管; 路途遠(yuǎn)、條件許可,可放置適量干冰;
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