【正文】 前痛閾均值 芎附正天軟膠囊對電刺激小鼠痛反應的電壓閾值的影響(?x177。 s ,n = 10) 組別 劑量 (g/kg 給藥前電壓 (V) 給藥后電壓 (V) 痛閾提高率 (%) 溶媒對照組 PEG400 〒 〒 阿斯林腸溶片 〒 〒 芎附正天軟膠囊 〒 〒 * 芎附正天軟膠囊 〒 〒 * 芎附正天軟膠囊 〒 〒 [L1] 【 評價 】 ? 電刺激鼠尾 嘶叫法是對組織施加短暫的可逃避的傷害性刺激，造成一種時相性急性疼痛，稱為急性實驗痛。反映體表痛。疼痛持續(xù)的時間也長短不一。一般認為動物嘶叫的整合中樞涉及高位腦干 (如中腦 )， 能反應強、弱、鎮(zhèn)痛藥物的效應 ,但機體組織阻抗不易控制 ,敏感性不高 ,反應與動物的種族、品系、年齡、性別及基礎閾值等因素有關。由于本法有反射性因素 ,臨床無鎮(zhèn)痛作用的藥物可能呈陽性反應。 ? 不如機械刺激實驗方法嚴謹。設備簡單 , 痛反應指標明確 ,直觀記錄 , 方法可靠、重現(xiàn)性好。 【 注意事項 】 ? ,應預選合格小鼠供實驗。于鼠尾刺激部位涂上薄層導電膠 ,以增加導電性能。 ? (方波 )刺激是生理藥理最常用的實驗方法之一 ,而刺激儀功能的強弱、方波設定范圍的寬窄、波形的好壞、使用方便與否往往是實驗成敗的關鍵。 ? 。 ,必須經(jīng)預試驗確定最佳刺激參數(shù)。 角叉菜膠誘發(fā)大鼠炎痛模型 ? 【 原理 】 外周傷害性信息傳人可導致痛及痛過敏。大鼠右后掌足跖部皮下注射后角叉菜膠后，動物出現(xiàn)早期的痛反應和隨后的痛覺過敏 ,表現(xiàn)為局部迅速腫脹，動物出現(xiàn)反復抬腿，舔足、搖動后掌，后掌抬離盒底等自發(fā)痛行為。隨著炎癥介質的釋放，加強炎癥 ,也增加對疼痛的敏感性，降低痛閾值，產(chǎn)生痛敏，對熱刺激的耐受性下降等。表明射角叉菜膠后，動物出現(xiàn)了炎性痛與痛過敏。伴隨這些行為變化及注射局部的炎癥反應 ，從 3小時開始可持續(xù)到 24小時。局部炎癥反應于 24小時達高峰，之后自發(fā)痛行為自行消失。由此誘發(fā)大鼠炎痛模型，用于鎮(zhèn)痛藥的研究。 【 評價 】 ? 注射角叉菜膠已用于制備多種組織炎癥模型。角叉菜膠皮下注射后 324小時，大鼠處于一種穩(wěn)定的痛敏狀態(tài)，便于觀察藥效及作用時程。 ? 致炎大鼠分早期時相（ 26小時）和晚期時相（ 1524小時）都表現(xiàn)為痛覺過敏。 ? 早期時相是由于周圍敏感引起，而晚期時相是中樞敏感引起。早期時相和晚期時相比較明確，是研究炎癥痛雙時相常用模型。 ? 己用于鎮(zhèn)痛藥作用效應、中樞和外周鎮(zhèn)痛藥的評價研究。 【 注意事項 】 ? ，在中性和堿性溶液中也很穩(wěn)定，即使加熱也不水解，但酸性溶液中比較容易發(fā)生酸水解作用 , 尤其是 Ph4以下時。 ? 2. 為了獲得穩(wěn)定、可靠的測定結果 , 實驗室溫在20～ 25℃ ，環(huán)境安靜 ,避免光線的干擾。 ? 調節(jié)輻射熱強度 ,使之恒定于一定水平 ,基礎痛閾在8～ 15秒，超過 20秒終止照射 ,以避免損傷后腳掌皮膚組織。每次輻射熱照射的部位應保持一致 (預先標定光斑落點范圍 )。間隔時間要相對恒定。 福爾馬林試驗 ? 【 原理 】 將福爾馬林注射于大鼠后爪皮下，可提供一個持續(xù)的傷害性刺激，從而激發(fā)一種明顯的、彌散的、長時間持續(xù)的痛行為反應，即回縮或震搖及舔咬注射足現(xiàn)象，可模擬人類損傷后疼痛的某些特征。 將福爾馬林溶液注射入大鼠一側足底皮下后產(chǎn)生兩個截然分開的疼痛時相，立即誘發(fā)出一持續(xù) 05分鐘的自發(fā)縮足反射期（第 1相）、抬足和舔足行為反應，然后是 1520分鐘的靜止期（靜止相），隨后又出現(xiàn) 2040分鐘的持續(xù)反應期（第 2相），傷害性反射行為持續(xù) 1小時左右停止。 方法 ? 給藥后 , 用微量注射器于小鼠后足底皮下注射 2%福爾馬林溶液 6μl/只，立即把小鼠放入離實驗臺10 cm高處玻璃板上的平底大燒杯，在燒杯下臵一傾斜 30度左右大鏡子 , 從鏡面上觀察小鼠痛反應，以小鼠注射福爾馬林后舔足反應作為痛反應指標(為福爾馬林直接刺激神經(jīng)引起的疼痛反應）。記錄 0— 5分小鼠累積舔足反應時間作為痛閾值 , 計算其均值 , 與對照組比較，檢驗其組間顯著性差異。 OT 05B對小鼠福爾馬林致痛閾值影響 (x177。 s) 組別 劑量 (μg/kg) 舔后足時間 (s) 抑制鎮(zhèn)痛 % 對照 〒 Te 05B 〒 對照 〒 Te 05B 〒 * 對照 〒 嗎啡 5mg/kg 〒 ** 【 注意事項 】 ? ,大鼠為 10%，但文獻中報道皮下注射福馬林濃度相差懸殊 ,低者 %,高者 5%,甚至達 15%。 .小鼠痛覺模型濃度常用 l～ 5％，該濃度下小鼠出現(xiàn)強烈的疼痛反應 ,％濃度小鼠呈現(xiàn)明顯的痛反應 , 與 生理鹽水組相比有顯著性差異。 ? ％，小鼠呈現(xiàn)強烈疼痛反應，并引起小鼠注射部位的組織損傷，加劇、延長痛反應。在小鼠福爾馬林痛覺模型中， ％是一個最適合、理想的致痛濃度，既能引起小鼠明顯的痛反應，又不引起注射部位的組織損傷 ? : 小鼠則將福爾馬林溶液注射到腳底爪的中央皮下 , 大鼠可將福爾馬林溶液注射到腳拇指背上踝下方的皮下或前爪背面。 ? ，立即將動物放回到容器內并開始記錄疼痛第一期內大鼠總的后抓抽縮次數(shù)或小鼠的舔腳趾的總時間。大鼠福爾馬林注射后 30分即可開記錄第二期的抽縮次數(shù)，一般計算 20分；小鼠注射后 10～ 40分開始記錄第二期。 ? 180～ 220克 , 太大會漸遲鈍。福爾馬林注射不當或測痛方法不對都可造成實驗結果的偏差，因此，應注意動物體重、注射程序和有效的測痛方法。 辣椒素誘導疼痛動物模型 ? 【 原理 】 辣椒素 (CAP)是辣椒的主要成分，可激活小直徑的感覺神經(jīng)元中的辣椒素受體 (vanidlloid 1R， VR1)而引起痛覺，并呈劑量相關性地釋放 SP等神經(jīng)肽類物質。 VR1廣泛分布于初級感覺神經(jīng)元的末梢 (又稱傷害性感受器 )。辣椒素等與 VR1上的結合位點結合，激活 VR1引發(fā)傷害性傳導。 ? 生理條件的 H+不會激活 VR1，但在病理條件下，組織酸化使得 H+能易化或激活 VR1，加強傷害性疼痛傳導。鎮(zhèn)痛藥可使小鼠疼痛反應減輕，舔腳掌時間縮短。 【 評價 】 ? 通過實驗確定辣椒素致痛劑量，認為200umol/L是理想的致痛濃度，既能引起顯著疼痛反應，又不引起炎性損傷的致痛濃度，適于研究受體拮抗劑的抗痛作用。 【 注意事項 】 ? ① 辣椒素致痛劑量要恰當。當注射辣椒素200umol/L時致痛效果較好，當辣椒素濃度≥4ooumol/L時，則具有鎮(zhèn)痛作用。 ? ②辣椒素受體阻滯藥（ CPZ）是一種合成的辣椒素類似物，可特異性地阻斷辣椒素受體。在小鼠痛覺模型中， CPZ能有效抑制辣椒素的致痛作用，而其本身并不致痛。因此，辣椒素致痛模型可用于鎮(zhèn)痛藥的篩選。 坐骨神經(jīng)擠壓模型實驗 ? 【 原理 】 坐骨神經(jīng)擠壓模型實驗 (sciatic nerve crush, SNC)是通過機械擠壓坐骨神經(jīng)引起動物損傷側后肢出現(xiàn)明顯的對機械、冷及熱刺激的痛覺超敏和痛覺過敏現(xiàn)象，給藥后動物痛閾的變化直接反映受試藥物鎮(zhèn)痛作用的強弱。 坐骨神經(jīng)部分結扎模型 ? 【 原理 】 坐骨神經(jīng)部分結扎模型 (partial nerve injury， PNI)是通過部分結扎（ 1/3～ 1/2）坐骨神經(jīng)引起動物損傷側后肢出現(xiàn)明顯的對機械及熱刺激的痛覺超敏和痛覺過敏現(xiàn)象，給藥后動物痛閾的變化直接反映受試藥物鎮(zhèn)痛作用的強弱。 急性內臟痛模型 ? 【 原理 】 急性內臟痛模型（ model of acute visceral pain） 是基于腸道存在對多種刺激敏感的感受器，大多數(shù)感受器對化學和機械性刺激敏感，腸道可能還存在特異和非特異內臟傷害性感受器，部分感受器對腸道擴張、局部缺血及緩激肽敏感，提示這些感受器可對不同強度、性質的傷害刺激編碼，最終的感覺是中樞整合的結果，而隨著重復、持續(xù)傷害性感受的傳入，脊髓背角神經(jīng)元興奮性增高，由甲醛刺激乙狀結腸壁引起的傷害性沖動傳入可能是由多種炎癥介質加入引起的更多外周感受器興奮經(jīng)中樞整合后的結果。 三叉神經(jīng)痛模型 青霉素 G鉀法 ? 【 原理 】 K+為致痛物質。三叉神經(jīng)脊束核尾側部是三叉神經(jīng)痛發(fā)病的關鍵部位。在該部位用微量進樣器注入微量青霉素 G鉀，復制大鼠三叉神經(jīng)痛實驗動物模型，誘發(fā)出類似人的三叉神經(jīng)痛樣反應，表現(xiàn)為尖叫、甩頭、左后肢快速抓同側面部等特定指標。通過青霉素 G鉀致三叉神經(jīng)痛反應模型，研究藥物對三叉神經(jīng)痛的鎮(zhèn)痛作用。