動物胚胎移植技術及體外受精-資料下載頁
2025-05-12 18:02本頁面
【正文】 提。 （ 1）從屠宰場家畜卵巢中采集， （ 2）從超數(shù)排卵的卵巢獲得卵泡。借助腹腔鏡，手術法取卵 （ 3）陰道超聲波監(jiān)視穿刺法直接從牛卵巢收集卵母細胞和內(nèi)窺鏡借助套筒穿刺陰道穹隆獲得。 卵母細胞的采集 . . 2）卵母細胞的成熟 ?未成熟的卵母細胞的核在細胞中央，成熟過程中遷移到動物極質膜下，核變得膨大，改稱發(fā)生泡，接著進行第一次成熟分裂， 減數(shù)分裂的完成標志著卵母細胞核的成熟。 （ 1） 細胞核成熟 （ 2） 細胞質的成熟 ? 顯著的蛋白質合成發(fā)生在生發(fā)泡破裂前后，這些新合成的蛋白質不僅與卵細胞自身成熟有關（激活成熟促進因子），而且與卵母細胞輸精后的發(fā)育能力直接有關。所以 細胞質成熟的質量如何直接影響到早期胚胎的發(fā)育能力。 ? 胞質成熟主要表現(xiàn)為細胞器變化和紡錘體的形成。 ? 卵母細胞成熟后期細胞器完成重新組裝，如高爾基體消失，線粒體分布核的周圍，胞質內(nèi)有 PAS陽性的囊膜和脂滴。 （ 3）細胞膜和透明帶的成熟 ?細胞膜穩(wěn)定性發(fā)生改變，膜微絨毛發(fā)生重排，表現(xiàn)密集而有彎曲，并從透明帶內(nèi)退出或斷裂 ?透明帶外層呈網(wǎng)狀，變軟。 體外獲能 ?指精子在體外獲得受精能力的過程。 ?包括在體外環(huán)境中除去精漿和精子表面吸附的大分子物質，減少表面陰性電荷，提高膜流動性，增加精子呼吸率和加快運動幅度等一系列生理生化過程。 ? 精子體外獲能是體外受精技術的關鍵環(huán)節(jié)， 主要包括 精子的洗滌 和 添加特定成分 ? Brackett（ 1982）以 高離子強度液 處理使精子獲能 ? 鈣離子 在精子獲能時起關鍵作用，能較快的誘發(fā)精子超活化運動和頂體反應。 ? 氨基多糖（ GAGs） 是牛精子獲能的主要物質，可促進對鈣離子的吸收，誘發(fā)頂體反應。如肝素也可使精子獲能，但同樣是一個鈣離子依賴的過程。 ? 血清白蛋白（ BSA） 也可誘發(fā)精子獲能?？赡茏鳛?Zn離子融合劑引起 PLA2的表達，或者在獲能中去除精子膜上的膽固醇。 體外受精 ?體外受精是以正常體內(nèi)受精的研究為基礎的，盡可能給精 — 卵提供一個適宜的共培養(yǎng)體系是研究體外受精的目的。 ?受精成功的標志是看受精卵是否可發(fā)育至囊胚期階段。 ?多精子受精一直是體外受精的一個難點 受精卵的體外培養(yǎng) 受精卵要在體外條件下培養(yǎng)發(fā)育一段時間，再移植到受體子宮內(nèi)，因此， “ 試管動物 ” 實際上要在體外進行三個階段的培養(yǎng)： 第一階段 是卵子成熟培養(yǎng)和精子獲能培養(yǎng)； 第二階段 是受精培養(yǎng)； 第三階段 才是受精卵早期發(fā)育培養(yǎng)。 存在的問題 ? 1）體外受精的效率有待提高 ? 2）體外培養(yǎng)體系有待進一步完善 ? 3）基礎理論研究有待加強 作業(yè) 概念 ?胚胎移植、超速排卵、同期發(fā)情、胚胎分割、發(fā)育阻斷、體外受精、精子獲能 簡答 ?胚胎移植的生理學基礎 ?胚胎移植的基本原則 ?牛胚胎移植基本程序
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