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水樣的微生物檢測ppt課件-資料下載頁

2025-05-12 08:45本頁面
  

【正文】 0mL) ? = 100 總大腸菌群菌落數(shù)( CFU/100mL) 數(shù)出的總大腸菌群菌落數(shù) 過濾的水樣體積 ? 方法:酶底物法 ? 范圍 本法可在 24h判斷水樣中是否含有總大腸菌群及含有的總大腸菌群的最可能數(shù) ( MPN) 。 ? 本法可同時檢測大腸埃希氏菌 。 總大腸菌群的檢驗 耐熱大腸菌群 ? 耐熱大腸菌群 ? 用提高培養(yǎng)溫度的方法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群分開,在℃ 仍然能生長的大腸菌群,稱為耐熱大腸菌群。 ? 總大腸菌群乳糖發(fā)酵試驗陽性管 EC培養(yǎng)基, ℃ 培養(yǎng) 24h ? 不產(chǎn)氣 陰性 ? 產(chǎn)氣 轉(zhuǎn)接 EMB平板, ℃ 培養(yǎng) 18~ 24h 典型菌落,陽性 ? 未經(jīng)氯化消毒的水,且僅檢耐熱大腸菌群,或水源水: ? 水樣 接種乳糖蛋白胨培養(yǎng)液, ℃ 培養(yǎng) 24h ? 不產(chǎn)氣 陰性 ? 產(chǎn)氣 EC培養(yǎng)基, ℃ 培養(yǎng) 24h,判斷方法同上面步驟 ? 幻燈片 35 ? 耐熱大腸菌群濾膜法: 是指用孔徑為 m的微孔濾膜過濾水樣 ,細菌被阻留在膜上 , 將濾膜貼在添加乳糖的選擇性培養(yǎng)基上 , ℃ 培養(yǎng) 24h, 能形成特征菌落以此來檢測水中耐熱大腸菌群的方法 ? 檢驗步驟: ? 準備工作:同總大腸菌群 ? 過濾水樣:同總大腸菌群 ? 培養(yǎng) ? 用滅菌鑷子移取濾膜于 MFC培養(yǎng)基上,放入℃ 恒溫箱內(nèi)培養(yǎng) 24h177。 2h。耐熱大腸菌群在此培養(yǎng)基上菌落為藍色,非耐熱大腸菌群菌落為灰色至奶油色。 ? 對可疑菌落轉(zhuǎn)種 EC培養(yǎng)基, ℃ 培養(yǎng) 24h177。 2h,如產(chǎn)氣則證實為耐熱大腸菌群。 ? 計算被證實的耐熱大腸菌群數(shù),報告每 100mL水樣中的耐熱大腸菌群數(shù)( CFU/100mL) ? = 100 耐熱大腸菌群菌落數(shù)( CFU/100mL) 所計的總大腸菌群菌落數(shù) 過濾的水樣體積 ? 大腸埃希氏菌 ? 大腸埃希氏菌多管發(fā)酵法是指多管發(fā)酵法總大腸菌群陽性,在含有熒光底物的培養(yǎng)基上 ℃ 培養(yǎng) 24h產(chǎn)生 β葡萄糖醛酸酶,分解熒光底物釋放出熒光產(chǎn)物,使培養(yǎng)基在紫外光下產(chǎn)生特征性熒光的細菌,以此來檢測水中大腸埃希氏菌的方法。 ? 檢驗步驟: ? 總大腸菌群乳糖發(fā)酵試驗陽性管 EC- MUG管中, ℃ 培養(yǎng)24h 366nm波長 6W的紫外燈照射 ? 產(chǎn)生藍色熒光 陽性 ? 計算 ECMUG的管數(shù),查 MPN表 ? 耐熱大腸菌群 2 ? 濾膜法: ? 用濾膜法檢測水樣后,將總大腸菌群陽性的濾膜在含有熒光底物的培養(yǎng)基上培養(yǎng),能產(chǎn)生 β葡萄糖醛酸酶,分解熒光底物釋放出熒光產(chǎn)物,使菌落能夠在紫外光下產(chǎn)生特征性熒光。 ? 檢驗步驟 ? 接種: 總大腸菌群濾膜上有典型生長菌落 將濾膜轉(zhuǎn)移至 NA- MUG上,細菌生長面向上,37℃ 培養(yǎng) 4h。 將培養(yǎng)后的平板在暗處用 366nm波長 6W的紫外燈照射,如果菌落邊緣或菌落背面有藍色熒光產(chǎn)生則表示水樣中含有大腸埃希氏菌。 記錄有藍色熒光產(chǎn)生的菌落數(shù)并報告,格式同 總大腸菌群濾膜法 。
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