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基因表達和調(diào)控ppt課件-資料下載頁

2025-05-12 04:30本頁面
  

【正文】 re of the 3’UTR the metabolic state of the cell eukaryotes 環(huán)境因素誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控 由于環(huán)境因子的改變,使得生物體特定基因的表達受到了相關(guān)基因的調(diào)控,這種調(diào)控形式稱為環(huán)境因素誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。 溫度誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件 ? 熱休克基因( Heat- Shock gene) :編碼熱休克蛋白的基因。例如: hsp70 gene ? 熱休克轉(zhuǎn)錄因子( heatshock transcription factor,HSTF):存在于細胞核中一種對溫度敏感的多肽因子。 ? 熱休克反應(yīng)因子( heat shock response elements,HSEs):在 hsp70 gene上游 40- 90bp,被 HSTF識別的 DNA序列。 溫度誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控 ? 熱休克基因( Heat- Shock gene) 在原核和真核生物中都發(fā)現(xiàn)了這類基因,當(dāng)生物體處于高溫時,熱休克轉(zhuǎn)錄因子( heatshock transcription factor,HSTF)被激活,結(jié)合到熱休克反應(yīng)序列上,促使熱休克基因轉(zhuǎn)錄,表達的蛋白為 HSP70,對細胞在高溫下起穩(wěn)定作用。 eukaryotes Environment factors induce transcriptional activity: temperature eukaryotes 生物因子誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控 ? 生物體在生物因子誘導(dǎo)下的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。 這類因子的調(diào)控一般都需要通過細胞信號傳導(dǎo)系統(tǒng),將信息傳遞細胞核內(nèi)的 DNA上,誘導(dǎo)了轉(zhuǎn)錄進行。 其中有的因子直接進入細胞內(nèi)參與誘導(dǎo),有些因子通過細胞跨膜蛋白受體,間接進行誘導(dǎo)。 eukaryotes Biological factors induce transcriptional activity1: steroid hormones eukaryotes Biological factors induce transcriptional activity2: peptide hormone ? Three general properties of enhancers ? they act over relatively large distances ? their influence on gene expression in independent of orientation ? their effects are independent of position 增強子( enhancer) ? 生物中能夠增強基因表達的調(diào)控序列。 作用特征: 1. 可以相隔數(shù)千個堿基對遠距離發(fā)生調(diào)控作用。 2. 不管正向或反向,均可以發(fā)揮調(diào)控作用。 3. 在結(jié)構(gòu)基因的上游或下游都具有調(diào)控的作用。 eukaryotes DNA sequences involved in the control of transcription: enhancer eukaryotes eukaryotes Structure of the enhancer of SV40 融合基因構(gòu)建:將細菌編碼 β - 半乳糖苷酶的 lacZ基因插入果蠅 P因子, lacZ基因受 P因子啟動子調(diào)控 P/lacZ 融合基因 轉(zhuǎn)基因: 將融合基因( fusion gene)與催化 P因子轉(zhuǎn)座的酶共同顯微注射至果蠅胚胎細胞中 在發(fā)育過程中,該 P因子整合到胚胎細胞的染色體上 這個果蠅的后代與普通果蠅品系雜交構(gòu)建基因組中含 P/lacZ融合基因的品系 融合基因表達: 在各品系中分析 lacZ基因表達 方法:組織切片染色 原理: X- gal顯色 X- gal為顯色底物,在 β -半乳糖苷酶作用下顯為藍色 ? 結(jié)果: 品系一 只有眼睛為藍色 品系二 只有腸為藍色 品系三 所有組織均顯為藍色 ? 為什么在三個品系中結(jié)果不同? ? P/lacZ融合基因在果蠅染色體上受調(diào)控序 列增強子 (enhancer)的調(diào)控。這一序列可 與 P啟動子相互作用,起始 lacZ的轉(zhuǎn)錄。 ? 在三個品系中, P/lacZ融合基因插入位置 不同 品系一 插入位置靠近眼特異性增強子,只在眼睛細胞中調(diào)控轉(zhuǎn)錄 品系二 插入位置靠近腸特異性增強子,只在腸細胞中調(diào)控轉(zhuǎn)錄 品系三 插入位置靠近非特異性增強子,在不同組織的各種細胞中均調(diào)控轉(zhuǎn)錄 只在眼中表達 只在腸 中表達 廣泛表達 眼特異增強子 腸特異增強子 廣泛增強子 ? Enhancer traps 增強子 捕獲: 假設(shè)不同組織特異性 增強子在染色體上的位置靠近其所調(diào)控的基因。例如,在眼睛中,眼特異性增強子在對眼睛功能或發(fā)育重要的基因附近。用“隨機插入”的融合基因 P/lacZ可鑒別不同種類的增強子,以及其所控制的基因,因此稱為 增強子捕獲
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